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《周輝 胚胎移植移植技術 教研》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、胚胎移植與體外受精技術雞西實驗中學生物教研組周輝2010.04.08胚胎移植胚胎移植是將良種雌性動物配種后的早期胚胎取出，移植道同種的生理狀態(tài)相同的其他雌性動物體內，使之繼續(xù)發(fā)育成為新個體，所以也稱作借腹懷胎。胚胎移植有什么意義：⑴可以充分發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛力，提高繁殖效率； ⑵可以加速品種改良，擴大良種畜群；⑶可以控制疾病，克服不育；⑷可以代替種畜引進；⑸可以保存遺傳資源；⑹胚胎移植也是其他胚胎技術（胚胎分割、胚胎嵌性、別鑒定和核移植等）的基礎一、同期發(fā)情和超數排卵（一）供體、受體的選擇畜牧學選擇：胚
2、胎移植的供體一般是需要加速繁殖的生產能力較高的優(yōu)良品種，受體則是繁殖性能高的本地品種。獸醫(yī)學選擇：主要任務是排除病畜，尤其是要把那些生殖器官患有疾病的個體清理出去。（二）供體母畜的超數排卵 排卵率可以通過藥物的方法進行控制。應用外源性促性腺激素誘發(fā)卵巢多個卵泡發(fā)育，并排出具有受精能力的卵子的方法，稱為超數排卵，簡稱“超排”。大量研究證明，引起家畜超數排卵的物質是與生殖生理有關的激素或促激素，并且較深入了解了引起卵成熟和排卵的機理，使超數排卵技術廣泛應用于家畜繁殖。各種激素的作用：對卵巢產生作用并能引起卵的
3、成熟和排卵的激素主要有：孕酮，雌二醇（E2），促卵泡激素（FSH）、促黃體激素（LH）、促性腺激素釋放激素（GnRH）等。這些激素對卵巢的作用有相同之處，但也有差別。促黃體激素（LH）和孕酮的急劇增加是排卵的直接原因，排卵后剩下的卵泡細胞轉變?yōu)辄S體，并分泌孕酮，抑制其他卵泡的發(fā)育。一般都采用促卵泡素（FSH）+前列腺素F2α(PGF2α)超排藥物系列，也有人用孕馬血清促性腺激素（PMSG）+PMSG搞血清+PGF2α。誘導家畜超數排卵，都需注射外源激素，其目的就是人工的使動物的激素水平達到閾值。從而誘發(fā)卵的
4、成熟與排放。超數排卵的方法采用不同激素組合的方法進來研究較多，其中誘導母牛超數排卵的試驗歸納起來有：1）促卵泡素（FSH）＋其他激素：小劑量多次注射FSH，每天兩次，3～4天，第3～5天注射前列腺素（PGF2α）以溶解黃體；2）孕馬血清促性腺素（PMSG）＋其他激素：性周期的8～12天注射一次PMSG，兩天后注射PGF2α促使黃體溶解，后48hr，母牛發(fā)情排卵，效果好。（三）供體、受體的同期發(fā)性發(fā)情的同步化：進行胚胎移植，必須使供體與受體同步發(fā)情，也就是有相同的生殖周期。通常供、受體同時注射PGF2α，牛為
5、0.4mg，羊為0.2mg。哺乳動物的生殖周期是各式各樣的，有的一年只有一次發(fā)情期，有一定的生殖季節(jié)。胚胎移植時受體與供體同步發(fā)情，處于相同的生殖生理狀態(tài)，才可能使一個供體超數排卵獲得的胚胎在多個受體子宮內受孕。家畜同步化發(fā)情是胚胎移植能否成功的關鍵之一。4受體母畜與供體同時注射PGF2α。（四）供體的發(fā)性鑒定和配種在正常情況下，供體大多數在超排處理結束后12~48h發(fā)性。發(fā)情鑒定主要是以接受爬跨且站立不支為主要判定標準，輔以直腸檢查。一般在發(fā)情后8~12h第一次輸精，以后每間隔8~12h輸精一次，直到發(fā)性
6、結束。二、胚胎采集（一）采集胚胎時間以發(fā)情日為第零天，在第6~7.5天或第2~3天分別從子宮角或輸卵管回收胚胎。（二）胚胎采集方法1.手術法采集方法（1）輸卵管沖胚用注射器的磨鈍針頭刺入子宮角尖端，注入沖胚液，然后從輸卵管的傘部接取沖胚液，這種方法適用于在排卵后4天以內進行。牛羊沖胚液用量為10ml即可。（2）子宮沖胚從子宮角的輸卵管端注入沖胚液，由基部接?。灰部梢杂勺訉m角基部液注入沖胚液，另一端接取。沖胚液用量依子宮角容積（母畜種類）大小而不同，羊一般為50~100ml.2.非手術法采集胚胎三、胚胎的檢查
7、及鑒定并非所以的胚胎都用于移植，因為受精卵可能有：質量問題；發(fā)育不完全；采集時受損。顯微鏡下觀察采集胚胎應該是：外觀飽滿、透明帶完整、卵間隙小，卵裂球大小均勻，界限清晰，透亮。充實，胞質均勻等。（一）撿卵撿卵借助于實體顯微鏡進行。進口的特制集卵杯，上端連接在沖胚管的出口上，杯中篩也允許沖卵液流出，胚胎集中在杯底，直接在顯微鏡下撿卵，十分方便。（二）胚胎質量的鑒定和分級1.胚胎的鑒定在20~40倍實體顯微鏡下觀察受精卵的形態(tài)、色調、分裂球的大小、均勻度、細胞密度、與透明帶的間隙以及變性情況等。2.胚胎的分級胚
8、胎分A、B、C三個等級。四、胚胎移植（一）手術法移植全身麻醉，手術將子宮和輸卵管拉出，用鈍形針在移植部位刺一個小孔，小心地將胚胎輸入。牛、羊3日齡以前的胚胎（8細胞前）移植部位為輸卵管，將輸卵管由輸卵管傘插入輸卵管內一定深度，將胚胎注入。5日齡后的胚胎應移植到子宮角尖端，即在宮管結合部。手術移植法移卵容易，損傷小。（二）非手術法移植方法已較完善，克服了移植器通過子宮頸的困難和子宮肌肉收縮排斥胚胎的技術問題，成功率
