香菇多糖的抗腫瘤活性研究

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數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志2009年第22卷第3期文章編號(hào)：1004—4337(2009)03—0337-02中圖分類號(hào)：R979．1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A·藥學(xué)研究·香菇多糖的抗腫瘤活性研究尹向前(武漢鋼鐵集團(tuán)公司第二職工醫(yī)院腫瘤科武漢430085)摘要：目的：研究香菇多糖(EGb)的體內(nèi)、體外抗腫瘤活性。方法：選取人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、肝癌細(xì)胞HepG2、胃癌細(xì)胞SW480，不同濃度的香菇多糖分別處理3種腫瘤細(xì)胞，MTT法分別檢測(cè)香菇多糖的體外抗腫瘤活性；選取荷MCF-7腫瘤裸鼠，給予香菇多糖，通過腫瘤生長(zhǎng)抑制率，考察香菇多糖的體內(nèi)抗腫瘤活性。結(jié)果：香菇多糖對(duì)3種腫瘤細(xì)胞均有細(xì)胞毒性，呈劑量依賴性，ICso分別為6．855、10．083、8．563p_M；香菇多糖可顯著降低腫瘤重量，提高腫瘤生長(zhǎng)抑制率。結(jié)論：香菇多糖體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均顯示良好抗腫瘤活性。關(guān)鍵詞：香菇多糖；腫瘤；體內(nèi)；體外香菇多糖最早由日本科學(xué)家研制，從香菇的實(shí)體中提取、阿霉素。將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞接種于96孔板種，接種密度為分離、純化的一組多糖成份，具有生物反應(yīng)調(diào)節(jié)機(jī)制。目前研5×10，待長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后分別加入不同濃度的香菇多糖究發(fā)現(xiàn)香菇多糖(1entinan，LNT)具有增強(qiáng)機(jī)體免疫、治療慢(100，10，1，0．1，0．01>M)，空白對(duì)照組只加培養(yǎng)液，對(duì)照組為性病毒性肝炎和抗腫瘤等藥理活性。腫瘤一直是威脅人類健阿霉素(100，10，1，0．1，0．OI~M)。孵育48h后每孔加入2O止康的重要原因，人們對(duì)于抗腫瘤藥物的篩選從未停止。為進(jìn)MTT，4h后吸去藥物，每孔加入150gL的DMSO溶解，并在一步研究香菇多糖的抗腫瘤活性，以期尋找一種新的具有抗酶標(biāo)儀下于570rim處檢測(cè)細(xì)胞活性。公式計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制腫瘤活性的低毒性天然藥物，本研究選取3種腫瘤細(xì)胞，并建率，細(xì)胞存活率對(duì)劑量對(duì)數(shù)線性回歸計(jì)算It&。值。其中香菇立荷瘤裸鼠模型，考察香菇多糖的體內(nèi)外抗腫瘤活性，揭示其多糖先溶于DMSO，再用培養(yǎng)液稀釋至所需濃度，其中DMSO臨床腫瘤治療的可能應(yīng)用前景。含量不超過0．1。細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率一(1一實(shí)驗(yàn)孔吸光值／空白對(duì)照孔吸光1材料與方法值)×1001．1動(dòng)物1．4．3荷瘤裸鼠模型的建立及藥物對(duì)裸鼠乳腺癌的治療作裸鼠BALWc-nu，雌性，體重18~22g，購(gòu)自第四軍醫(yī)大學(xué)用將MCF-7人乳腺癌細(xì)胞株接種于裸鼠右側(cè)胸壁乳墊下，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物合格證號(hào)：陜動(dòng)準(zhǔn)字第O1號(hào)，軍動(dòng)準(zhǔn)字第復(fù)制裸鼠乳腺癌動(dòng)物模型[2]。動(dòng)物模型復(fù)制成功后，將其分C98001清潔級(jí)。成5組，每組1O只?？瞻讓?duì)照組每只給予生理鹽水0．3ml／d；1．2藥品及試劑陽(yáng)性對(duì)照組阿霉素劑量為10mg／kg，每只給藥0．3ml／d，連續(xù)香菇多糖購(gòu)于南京康海藥業(yè)有限公司；阿霉素由浙江海l0天給藥；香菇多糖3個(gè)劑量組為10．5mg／kg、21mg／kg、正藥業(yè)提供；MTT(噻唑藍(lán))購(gòu)于Sigma公司；人乳腺癌細(xì)胞42mg／kg，口服灌胃給藥每只0．3ml／d，連續(xù)給藥lO天。給藥MCF-7、肝癌細(xì)胞HepG2、胃癌細(xì)胞SW48O均來源于美國(guó)后第ll天稱體重脫臼處死裸鼠，取出腫瘤稱重，計(jì)算抑瘤率，ATCC細(xì)胞庫(kù)；DMEM高糖培養(yǎng)基購(gòu)于Invitrogen公司；其余統(tǒng)計(jì)體重變化情況。試劑均為分析純。抑瘤率一(1一實(shí)驗(yàn)組平均瘤重／對(duì)照組平均瘤重)×1．3主要儀器100ThermoMultiskanMk3酶標(biāo)儀(芬蘭雷勃公司)；光學(xué)顯1．5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理微鏡(13本OLYMPUS公司)。所有數(shù)據(jù)均用結(jié)果均用五S表示，統(tǒng)計(jì)分析用組間t檢1．4方法驗(yàn)。1．4．1細(xì)胞培養(yǎng)MCF-7、HepG2、SW480細(xì)胞均選擇2結(jié)果DMEM高糖培養(yǎng)基，含10％胎牛血清，37℃下5,o4C02培養(yǎng)。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。2．1體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)1．4．2體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)MTT法[檢測(cè)香菇多糖對(duì)香菇多糖各劑量組與空白對(duì)照組比較均能顯著抑制3種MCF-7、HepG2、SW480細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性，陽(yáng)性對(duì)照藥為腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，P<0．05或P<0．001，呈劑量依賴性，與阿霉收稿日期：2009-02—15 JournalofMathematicalMedicineVo1．22No．32009素相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，效果相當(dāng)。見圖1～3。IC。值見表1。各劑量香菇∞多∞糖∞對(duì)M∞CF如-7∞荷如瘤如裸鼠均O有抑瘤效果，大∞劑∞如∞量組效果最佳，抑癌率為63．O3，與空白對(duì)照組比較有顯著表1香菇多糖對(duì)不同腫瘤細(xì)胞系的的IC。(n=3)性差異(P