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《膀胱癌抑癌基因apaf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、膀胱癌抑癌基因Apaf：潘俊，陳凌武，王文衛(wèi)，瞿虎，王聲正【摘要】【目的】研究抑癌基因細(xì)胞凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)和腺瘤性結(jié)腸息肉病相關(guān)基因(APC)的啟動子甲基化狀況與膀胱癌臨床病理的關(guān)系及對患者復(fù)發(fā)的影響。【方法】采用甲基化特異性PCR方法檢測110例膀胱癌組織中Apaf-1和APC的啟動子甲基化狀態(tài)，以15例正常膀胱黏膜組織為對照組?！窘Y(jié)果】Apaf-1和APC基因在膀胱癌組織中的甲基化率為90.0%和82.7%，在正常膀胱組織為6.77%和20.0%，差異分別有統(tǒng)計學(xué)意義(P均=0.000)。Apaf-1及AP
2、C的甲基化率與腫瘤分化程度及臨床分期有明顯的相關(guān)性，隨腫瘤分級、分期的增加而升高。在復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組的比較中，Apaf-1的甲基化陽性率分別為97.6%(41/42)和85.3%(58/68)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.382，P=0.036)，而APC的甲基化率分別為85.7%(36/42)和80.9%(55/68)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.424，P=0.515)?！窘Y(jié)論】Apaf-1及APC的甲基化改變在膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用，Apaf-1啟動子甲基化可能成為膀胱癌患者預(yù)后判斷的分子標(biāo)志物。【關(guān)鍵詞】膀胱癌
3、;甲基化;腫瘤抑制基因;Apaf-1;APC Abstract：【Objective】TostudytheApaf-1andAPCpromotermethylationstatusanditsrelationa.【Methods】MethylationstatusofApaf-1andAPCgenepromoterin110specimensofbladdercarcinomaand15normalbladdertissuesethylation-specificPCR.【Results】ThemethylationrateofA
4、paf-1andAPCa(90.0%，82.7%)thanthatofnormalbladdertissues(6.77%，20.0%)respectivelyethylationrateofApaf-1andAPCcorrelatedarespectively，increasedentoftumorgradesandstages.BetethylationratesofApaf-1ethylationstatusofApaf-1andAPCentofbladdercarcinoma，themethylationstatusofAp
5、af-1maybeeanearkerofprognosisinbladdercarcinoma. 目前普遍認(rèn)為，在腫瘤轉(zhuǎn)化過程中抑癌基因功能的失活比原癌基因的激活起更關(guān)鍵作用，而DNA異常甲基化可直接修飾和關(guān)閉抑癌基因的功能。細(xì)胞凋亡蛋白酶活化因子-1基因(apoptoticproteaseactivatingfactor-1，Apaf-1)是c-Myc誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡中p53的下游成分，Apaf-1基因可以控制腫瘤的發(fā)展。已證實在白血病等惡性腫瘤中都出現(xiàn)了Apaf-1基因轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的下調(diào)[1]，但在泌尿系腫瘤尤其是膀胱癌中有
6、關(guān)Apaf-1的研究報道相對較少[2]。SP法)檢測Apaf-1和APC基因在膀胱癌中的啟動子甲基化狀況，并分析其與膀胱癌臨床特點的關(guān)系及在患者術(shù)后復(fù)發(fā)監(jiān)測中的應(yīng)用價值?！ ?材料和方法 1.1臨床資料 收集2001年1月至2005年12月在我院確診為膀胱移行細(xì)胞癌的患者的臨床資料，入選條件：①臨床資料完整。②蠟塊內(nèi)組織較大，可供提取DNA。篩選出150名患者，成功隨防到110患者，隨防成功率73.3%，其中男78例，女32例。手術(shù)時年齡36～72歲，平均62.5歲。病理分級按分期標(biāo)準(zhǔn)，淺表性(Tis～T1)48例，侵潤性腫瘤(
7、T2～T4)62例。另取15例正常膀胱粘膜組織常規(guī)石蠟包埋切片作對照組。15例正常膀胱粘膜組織標(biāo)本均來自于行膀胱全切術(shù)時在離腫瘤邊緣5cm以外的無腫瘤組織，HE染色病理學(xué)檢查確認(rèn)無腫瘤細(xì)胞?！ ?.2石蠟切片中DNA組織的提取 每個標(biāo)本切取10μm厚度切片3～4張，無需脫蠟，直接用TaKaRaDEXPATTM試劑盒(大連寶生)，按步驟向石蠟包埋組織切片上加入TaKaRaDEXPATTM后，只需100℃加熱和4℃離心，就可以得到PCR擴增用DNA，紫外分光度儀確定DNA的含量和純度。 1.3甲基化特異性PCR分析 采用CPGen
8、omeTMDNAModificationKit試劑盒(Chemicon，USA)，對樣本DNA進行亞硫酸氫鈉修飾并純化回收，引物設(shè)計采用Primerpremier5.0引物設(shè)計專門軟件，由Invitrogen公司鑒定合成。Apaf-1
