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1、溶血對部分血液生化指標的影響【關鍵詞】溶血;生化檢驗在工作中往往因各種原因導致標本溶血,而血清標本溶血時主要影響哪些指標,測定結果是否真實可靠,是所有檢驗工需要了解的問題。為了能及時客觀地分析生化指標的變化是否具有臨床意義,應當詳細了解標本溶血對各項血液生化指標的影響。本文觀察了部分常用生化指標在標本溶血前后檢測結果的變化,旨在為標本溶血時血液生化結果分析提供一定的參考依據(jù),盡量增加生化測定數(shù)據(jù)的可利用性。 1資料與方法1.1儀器與試劑HITACHI7070全自動生化分析儀(日本)。谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總
2、膽紅素(TBIL)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、膽固醇(CHO)、血糖(GLU)生化分析試劑盒,均購自北京康大泰科醫(yī)學科技有限公司。1.2溶血的血清標本的制備健康體檢者50人,禁食不禁水12h,各抽取靜脈血4ml,分別注入兩支干燥試管各2ml。其中一支讓其自然凝固,另一支在血液凝固前用金屬棒攪拌使其溶血,然后以3000r/min離心10min,去上清液分別為未溶血和溶血的血清標本。1.3生化指標的測定用己糖激酶法測定血清葡萄糖(GLU),連續(xù)檢測法測定谷丙轉氨酶(ALT)和谷草轉氨酶(AST),重氮法測定總膽紅素(TBIL)
3、,尿素酶—GLDH法測定尿素氮(BUN),苦味酸法測定肌酐(CRE),氧化酶法測定膽固醇(CHO),以上指標均用HITACHI7070全自動生化分析儀測定。 2結果溶血后AST、TBIL、ALT的值比溶血前的值高;CRE的值比溶血前的值低;GLU、BUN、CHO的值在溶血前后未見明顯改變,見表1。表1溶血對部分生化指標的影響注:**P<0.013討論3.1谷草轉氨酶(AST)人紅細胞中AST活性約為血漿中的40倍[1]。當標本溶血時,勢必引起血清中AST活性的升高,從而使溶血標本的結果明顯高于未溶血標本。AST主要是作為肝
4、損傷的敏感指標,測定結果的偏高會導致假陽性的產(chǎn)生。故出現(xiàn)溶血標本應當在報告中注明。3.2谷丙轉氨酶(ALT)細胞內(nèi)ALT含量比血漿中高約7倍,因此溶血后ALT含量測定的增高主要于細胞內(nèi)ALT的大量釋放。可見與AST相比,ALT受溶血影響輕些,故對標本的要求低一些,但在分析結果時要注意考慮溶血的影響。3.3總膽紅素(TBIL)筆者使用的試劑盒是用重氮法測定總膽紅素的,最后生成紫紅色的偶氮膽紅素,主要在波長為540~560nm處有光吸收。而血紅蛋白在波長540~550nm處有光吸收[2],恰與偶氮膽紅素的比色波長相近。因此溶血后紅細胞
5、破裂時大量血紅蛋白進入血清,勢必造成總膽紅素測定值的升高,是總膽紅素的正向干擾因素。此外,由于血紅蛋白與重氮試劑反應形成的產(chǎn)物可破壞偶氮膽紅素,溶血對重氮法測定膽紅素同時存在負向干擾,使測定結果偏低,但該作用較輕微[3],因此溶血后由于血紅蛋白對測定結果的干擾,膽紅素的測定結果往往偏高。3.4肌酐(CRE)筆者使用的試劑盒是采用苦味酸法測定CRE的,而苦味酸特異性較差,易受其他還原性物質(zhì)影響,主要是維生素C、酮體、丙酮酸等假肌酐干擾[4]。假肌酐物質(zhì)也可與苦味酸形成顏色反應,導致測定值偏差。這種假肌酐物質(zhì)紅細胞中最多,血清中較少,
6、故溶血后紅細胞中假肌酐物質(zhì)是造成測定值發(fā)生偏差的主要原因。3.5溶血原因及防止高亞英[5]等認為溶血的原因主要是操作不當和抽血器具不合格造成的。結合我們?nèi)粘9ぷ鞣治鲈斐扇苎目赡茉蛑饕ǎ海?)由于抽血困難,采血時定位進針不準、針尖在血管中探來探去造成血腫等而發(fā)生溶血。(2)注射器和針頭連接不緊,采血時空氣進入,在抽取的血標本中混有泡沫,這種混有泡沫的血標本,放置一定時間后泡沫破裂或迅速干燥,造成血細胞破壞而發(fā)生溶血。(3)血標本在運輸過程中過度震蕩或貯存不當。(4)不合格的塑料制品會因聚合不完全而具有毒性,這種毒性可造成溶血
7、。(5)試管質(zhì)量粗糙。因此,在采血、檢驗過程中必須注意細心操作,并注意注射器、針頭和試管的質(zhì)量。在報告檢測結果時要注意溶血的影響,并在數(shù)據(jù)中加以標注。【參考文獻】1ThomasL,Haemolysisasinfluenceandinterferencefactor.TheJournalofTheInternationalFederationofClinicalChemistryandLaboratoryMedicine,1999,13(4).2張敏,蒲彥武,闞玫.不同溶血度下20項生化試驗結果分析.西北國防醫(yī)學雜志,1997,18
8、(4):273-274.3邱谷.溶血對重氮法血清膽紅素測定的干擾分析.上海醫(yī)學檢驗雜志,2000,15(6):350.4李影林.中華醫(yī)學檢驗全書(上卷).北京:人民衛(wèi)生出版社,1997,641-860.5高亞英,王曉明,蔣冬青,等.血液標本溶血原因