醒腦靜注射液對內(nèi)毒素休克家兔血漿細胞因子含量的影響

醒腦靜注射液對內(nèi)毒素休克家兔血漿細胞因子含量的影響

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1、醒腦靜注射液對內(nèi)毒素休克家兔血漿細胞因子含量的影響【摘要】目的:探討醒腦靜注射液治療內(nèi)毒素休克的可能機制。方法:日本大耳白兔18只,隨機分為正常對照組、LPS組、LPS+XNJ組,每組各6只。采用耳緣靜脈注射LPS復(fù)制兔內(nèi)毒素休克模型,分別進行治療,于治療后0、1、2、3h觀察各組平均動脈壓(MAP)、心率(HR)、存活率,并取血用ELISA雙抗體夾心法檢測血漿TNF-α及IL-10的含量。結(jié)果:LPS組平均動脈壓在0h后迅速下降,心率明顯加快,2h后又迅速減慢;PLS+XNJ組平均動脈壓在0h后平緩下降,心率先加快后平緩減慢。LPS組存活率為0,PLS+XNJ組存活

2、率為100%。TNF-α的變化:LPS組TNF-α0h開始增高,3h達到頂峰;LPS+XNJ組TNF-α在0h達到頂峰,1h明顯下降,3h降至最低。IL-10的變化:LPS組IL-10在3h達到頂峰,PLS+XNJ組在2h達到頂峰,3h開始下降。結(jié)論:醒腦靜注射液能治療內(nèi)毒素休克,其機制可能與調(diào)節(jié)促炎因子和抗炎因子的平衡有關(guān)。【關(guān)鍵詞】醒腦靜注射液;內(nèi)毒素;休克;TNF?α;IL?10內(nèi)毒素又稱脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS),是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜上的一種含有多糖和類脂的特殊物質(zhì)。內(nèi)毒素休克(Endotox

3、inShock),是由革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素引起的以發(fā)熱、低血壓及多器官功能衰竭為主要特征的綜合征,死亡率高,是臨床常見的危急重癥之一,目前尚無令人滿意的治療藥物。有研究證實[1-4],醒腦靜注射液能通過抑制腫瘤壞死因子?α(TNF?α)的表達,有效地抑制炎性級聯(lián)反應(yīng),減輕內(nèi)皮細胞損傷,清除氧自由基。本實驗擬通過觀察內(nèi)毒素休克模型家兔血清中促炎因子TNF?α及抗炎因子白細胞介素?10(IL?10)含量的變化,探討醒腦靜注射液抗內(nèi)毒素休克的作用機制?! ?材料與方法  1.1動物健康日本大耳白兔18只(合格證號:20054020),體重2-2.5kg

4、,雄性,清潔級動物,由瀘州醫(yī)學(xué)院實驗動物科提供。  1.2試劑醒腦靜注射液購自河南天地藥業(yè)股份有限公司;內(nèi)毒素(LPS)購自美國Sigma公司;兔TNF-α、IL-10試劑盒,均購自上海西唐生物科技有限公司?! ?.3儀器BL-420生物機能實驗系統(tǒng)?! ?.4動物實驗日本大耳白兔18只,隨機分為正常組6只,LPS組6只,LPS+XNJ組6只。耳緣靜脈注射1%戊巴比妥鈉全麻,分離右頸總動脈,插管,BL-420生理儀觀察并記錄平均動脈壓、心率變化。分離右側(cè)股動脈插管放血。待10-20min平均動脈壓穩(wěn)定后記錄平均動脈壓、心率并定為記錄0點。LPS組和LPS+XNJ組沿耳

5、緣靜脈推注LPS2.4mgkg-1,正常組推注等量生理鹽水。待血壓下降至正常的2/3后,治療組沿耳緣靜脈推注醒腦靜注射液0.5mlkg-1,正常組和模型組推注等量生理鹽水。以上各組分別于推注后0、1、2、3h取血2ml,同時回輸?shù)攘可睇}水。所取血以3000rmin-1離心10min,取血漿測TNF?α及IL?10的含量?! ??5觀察并計算動物的存活率  1?6細胞因子(TNF?α以及IL?10)測定按試劑盒說明操作,設(shè)空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管,各管一式兩份。450nm讀取吸光值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取各待測標(biāo)本含量?! ?.7統(tǒng)計學(xué)處理采用SPS

6、S16.0forn;標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,用t檢驗,p<0.05為差異具有顯著性?! ?結(jié)果  2.1平均動脈壓及心率的變化LPS組與PLS+XNJ組在靜脈注入內(nèi)毒素后60min動脈血壓即下降至正常的2/3,PLS組在0h開始平均動脈壓進行性下降;PLS+XNJ組在0h開始平均動脈壓平緩下降,具體數(shù)值如表1示。LPS組0h心率明顯加快,在1h達到頂峰,2h迅速下降,3h降至最低,直至死亡;LPS+XNJ組0h心率明顯加快,1h達到頂峰,2h開始減慢,減慢幅度較LPS組小?! ?.2存活率正常組動物全部存活,存活率為100%。注射LPS后3h,LPS組動物全部死

7、亡,存活率為0。注射LPS后3h,LPS+XNJ組動物全部存活,存活率為100%。  2.3血漿TNF?α檢測正常組兔血漿TNF?α濃度在4個時間點無變化(p>0.05)。LPS組血漿TNF?α濃度在4個時間點表現(xiàn)趨勢為逐漸增高,與0時間點比較差異均有顯著性(p<0.01)。LPS+XNJ組血漿TNF?α濃度在0時間點為峰值,在1h、2h、3h逐漸下降,與0時間點比較差異均有顯著性(p<0.05,p<0.01

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