實驗,綠葉中色素的提取和分離

實驗,綠葉中色素的提取和分離

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1、實驗綠葉中色素的提取和分離【實驗原理】1.提取:綠葉中的色素溶于有機溶劑無水乙醇而不溶于水,可用無水乙醇提取色素。2.分離:各種色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散得快,反之則慢,從而使各種色素相互分離。【實驗步驟】提取色素:稱取5g綠葉,剪碎,放入研缽中,加入少量二氧化硅、碳酸鈣和10mL無水乙醇→研磨→過濾→收集到試管內(nèi)并塞嚴試管口制備濾紙條:將干燥的定性濾紙剪成略小于試管長與直徑的濾紙條,將濾紙條一端剪去兩角,在距離剪角一端1cm處用鉛筆畫一條細的橫線畫濾液細線:用毛細吸管吸取少量的濾液,沿鉛筆線均勻地畫一條細線,待濾液干后,再畫一兩次分離色素:將適量的層析液

2、倒入試管中,裝置如圖所示濾液細線層析液觀察結(jié)果:濾紙條上呈現(xiàn)四條顏色、寬度不同的色素帶,如圖所示橙黃色葉黃素葉綠素a最多黃綠色1.為什么需要選用新鮮綠色的葉片做實驗材料?提示:新鮮綠色的葉片中色素含量高,從而使濾液中色素含量較高,實驗效果明顯。2.為什么研磨時要迅速?為什么研磨時要加入少量的CaCO3和SiO2?提示:(1)葉綠素不穩(wěn)定,易被破壞,因此研磨要迅速、充分,以保證提取較多的色素。(2)二氧化硅破壞細胞結(jié)構(gòu),使研磨充分。(3)碳酸鈣可防止研磨過程中色素被破壞。3.色素提取液呈現(xiàn)淡綠色的原因可能有哪些?提示:(1)葉片顏色太淺。(2)綠葉不新鮮。(3)研磨不充分。(4)未加碳酸

3、鈣或加入量太少。(5)加入無水乙醇量太多。(6)研磨時間過長,部分葉綠素被破壞。4.為什么在制作濾紙條時,需將一端的兩個角剪掉?提示:由于液面的不同位置表面張力不同,紙條接近液面時,其邊緣表面的張力較大,層析液沿濾紙邊緣擴散過快,從而導致色素帶分離不整齊的現(xiàn)象。故需將插入層析液的濾紙條一端剪去兩個角。5.為什么濾液細線要重復畫,且線要細、直?提示:重復畫線是為了增加色素的濃度,使分離出的色素帶清晰分明。畫線細、直是為了防止色素帶之間出現(xiàn)重疊。6.層析時,為什么不能讓濾液細線觸及層析液?提示:濾紙條上的濾液細線觸及(或沒入)層析液,會使濾液中的色素溶解于層析液中,濾紙條上得不到色素帶,使

4、實驗失敗。7.濾紙條上色素帶寬窄不同的原因有哪些?提示:不同種類的色素在綠葉中的含量不同,含量多的在濾紙條上呈現(xiàn)的色素帶寬,反之色素帶窄。實驗中的注意事項及操作目的歸納

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