褪黑素對(duì)噪聲應(yīng)激大鼠肝損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制論文

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1、褪黑素對(duì)噪聲應(yīng)激大鼠肝損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制論文【摘要】目的：探討褪黑素（MT）對(duì)噪聲應(yīng)激大鼠肝損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制.方法：將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組：空白對(duì)照組、模型1組、模型2組、實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組，每組8只.實(shí)驗(yàn)組和模型組分別在應(yīng)激前30min腹腔注射MT(15mg/kg)和等體積生理鹽水.以56式?jīng)_鋒槍射擊時(shí)產(chǎn)生的120dB（A）的脈沖噪聲，對(duì)實(shí)驗(yàn)組及模型組大鼠進(jìn)行連續(xù)噪聲刺激.噪聲應(yīng)激后，觀察MT對(duì)各組大鼠血漿中皮質(zhì)醇、超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）以及肝組織勻漿中SOD，MDA的影響.結(jié)果：肝臟病理檢查顯示模型組大鼠出

2、現(xiàn)明顯的病理性損傷,實(shí)驗(yàn)組大鼠損傷程度明顯減輕；模型組大鼠血漿皮質(zhì)醇、血漿及肝組織勻漿的MDA濃度較空白對(duì)照組顯著升高，血漿及肝組織勻漿SOD活性顯著降低(P0.01)，實(shí)驗(yàn)組大鼠血漿皮質(zhì)醇的濃度、血漿及肝組織勻漿的MDA濃度較模型組顯著降低.freela公司）；超氧化物歧化酶（SOD）測(cè)試盒、丙二醛（MDA）測(cè)試盒（南京建成生物工程研究所）；皮質(zhì)醇測(cè)試盒（北京北方偉業(yè)發(fā)展有限公司）.XH2060型全自動(dòng)γ免疫分析儀(中國(guó)核工業(yè)部西安二六二廠).1.2方法1.2.1動(dòng)物給藥將40只雄性SD大鼠在7d環(huán)境適應(yīng)期后隨機(jī)分為5組：空白對(duì)照組、模型1組、模型

3、2組、實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組，每組8只，模型組及實(shí)驗(yàn)組給予每日120dB（A）噪聲連續(xù)應(yīng)激8h，第1組應(yīng)激1d，第2組應(yīng)激3d，每次噪聲刺激前30min根據(jù)分組,實(shí)驗(yàn)組腹腔注射MT(15mg/kg)，模型組腹腔注射等量生理鹽水.1.2.2槍擊噪音應(yīng)激模型的建立［3］大鼠禁食12h后置于隔音室內(nèi)，用56式?jīng)_鋒槍射擊時(shí)產(chǎn)生的噪音制成錄音，通過(guò)揚(yáng)聲器由電腦控制隨機(jī)播放，揚(yáng)聲器距離大鼠20～30cm.采用國(guó)營(yíng)紅聲器材廠生產(chǎn)的ND2型精密聲級(jí)計(jì)及頻譜分析儀分析檢測(cè)，控制噪音強(qiáng)度為120dB（A），頻率為0.25～4.00kHz.1.2.3血液中皮質(zhì)醇含量、SOD活性

4、及MDA含量的測(cè)定各組大鼠應(yīng)激結(jié)束后，麻醉，開(kāi)胸取血4mL，其中2mL加入100g/L乙二胺四乙酸鈉30μL和抑肽酶40μL的離心管中，混勻，于4℃，3000r/min離心10min，離心半徑12cm，分離血漿，-20℃下保存待測(cè)定.采用放射免疫法測(cè)定血漿中皮質(zhì)醇含量.操作程序嚴(yán)格按照試劑盒及儀器說(shuō)明書(shū)由1人完成檢測(cè).另外2mL血液于3000r/min離心10min，離心半徑12cm，吸取上清液，-20℃下保存待測(cè)定.嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，測(cè)量SOD活性及MDA含量.1.2.4肝組織勻漿中SOD活性及MDA含量的測(cè)定取血后，將大鼠處死，取肝臟組

5、織洗去殘血并吸干水分，用天平稱取1g肝臟組織，用生理鹽水配置成100g/L組織勻漿.于3000r/min離心10min，離心半徑12cm，吸取上清液，-20℃下保存待測(cè)定.嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，測(cè)量SOD活性及MDA含量.1.2.5肝組織的病理學(xué)檢測(cè)將部分肝組織洗去殘血并吸干水分，放入40g/L甲醛溶液中4℃保存，送第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院病理科做病理學(xué)切片檢查.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均以x±s表示，結(jié)果采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析,均數(shù)間的多重比較用LSDt進(jìn)行顯著性檢驗(yàn).2結(jié)果2.1各組大鼠血漿皮質(zhì)醇的變化空白對(duì)照組、模型1組、模型

6、2組、實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組血漿皮質(zhì)醇濃度分別為（0.95±0.10）,（1.99±0.08）,（2.59±0.09）,（1.27±0.14）,（1.63±0.09）.模型1組、模型2組大鼠血漿皮質(zhì)醇均較空白對(duì)照組顯著升高（P0.01），實(shí)驗(yàn)1組較模型1組顯著降低（P0.01），實(shí)驗(yàn)2組較模型2組顯著降低（P0.01）.2.2各組大鼠血漿及肝組織勻漿SOD，MDA的變化模型1組及模型2組顯著低于空白對(duì)照組（P0.01，表1），實(shí)驗(yàn)1組較模型1組顯著升高（P0.01），實(shí)驗(yàn)2組較模型2組顯著升高（P0.01）.各組大鼠血漿肝組織勻漿MDA水平比較，模型1組及

7、模型2組較空白對(duì)照組顯著升高（P0.01），實(shí)驗(yàn)1組較模型1組顯著降低（P0.01或0.05），實(shí)驗(yàn)2組較模型2組顯著降低（P0.01）.表1MT對(duì)噪聲應(yīng)激大鼠血漿肝組織勻漿SOD，MDA的影響（略）bP0.01vs空白對(duì)照組；dP0.01vs模型1組；fP0.01vs模型2組.2.3各組大鼠肝臟組織形態(tài)學(xué)模型組比實(shí)驗(yàn)組肝臟組織明顯充血水腫，有較多炎細(xì)胞浸潤(rùn)，肝小葉結(jié)構(gòu)受到破壞，細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，有部分肝細(xì)胞變性（圖1）.其中模型2組較模型1組嚴(yán)重.實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組肝細(xì)胞損傷明顯減輕.3討論應(yīng)激是機(jī)體在受到各種因素刺激時(shí)所出現(xiàn)的一些非特異性反應(yīng)，而下丘

8、腦垂體腎上腺皮質(zhì)激素系統(tǒng)(HPA軸)是應(yīng)激系統(tǒng)的重要組成部分［4］，機(jī)體主要是通過(guò)HPA軸