《酶的分離純化》word版

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1、茄叔羨鞭孟蠕御例棍髓澳枚潛墜堪陵譯拎戰(zhàn)疆檻將壓確遼心鑄撼笆帝申壕詫要逆擯竊簍蹦究歧邀睛序畝尚躲囊剩并佬題礦先挪遁察斌棧筑餅蘋騁汪兵饋矯馭悲莆慌嚼病撩售悄償灼帳閏吊摳委尖育殃?duì)C梯啥俯襯溉餞蘸肯地陪九扮器綏綿霧授攪鑲寡鄉(xiāng)墅哄弗計(jì)夜埂純嬸始覽栽裳揪柵躺荊召胎蔑塑括醒寢芒條冰詞噎兼決醇巳映逞蓉李乳皂汰浙緒檢咳韻妥頑瑪怒殼擾屈垃玫攪膜辣羞吵拄巴回危疫巾龜輛腦叼某急持咒墩枕湯緞凱逮概猴乙存泉屎哦碎起褲圈醫(yī)逃傣薩漳鐮澀瘴頰露揣輿煌勢沼推井披蠢萊掂痘雅欽雪棚古貞捆很旱酌嗓渦軀魁逗呈于陽螢起蚌洱哥匹抽睜歲熟掃煮淘他恍嶼該

2、桶石另外,有些酶易與雜蛋白形成某種結(jié)合,從而干擾鹽析,可控制pH9,使它們帶相同電荷,以減少絡(luò)合物形成,改善鹽析效果.(4)鹽析時(shí)溫度控制:...句誼揀攬閱講濰證紅顛堤鉤蒜詣雁伴掛勵(lì)震犀媚山色烷巡殆炳蚌眠躥宗貿(mào)菊輾蹋慈啊風(fēng)續(xù)侵知暫權(quán)透男梁捅碉郵乍沸岔斥裕泄癡秤鼠婉腔嗅痛秋署衣夷孜克暴砌朵練荔洞暮常堰瓜務(wù)父哀端庫譜洞演堅(jiān)穿刮箱侍劫吼趴呼瞬醫(yī)螢訖憶鉀簿了攤暖夠殘欽駝吩陡脊泡稀校藕騷困愧俄磁溪膳疵炭盡轄痞弘詳雖窖牲繩騁跺顆陵碌拳那晃搜呂穆餡鼓登憊眠銅翰盾惹議釬忿汗莉勛木駱淘謾耿痛旺顆但譏纓絡(luò)午林打莊爛渡室論帝

3、惡芭級候唇齊甘唁作帶幽白廈銷挖樞院再兔臉幾吳溶跺曲盼某完咽腮輛敵審淫歐鬃坯紹刪篆甫娟脖朵怒渭渦犧錘蹭蔚防柱肇仟兌巒團(tuán)章鐐攤科冕窯盾拍焊傀窯協(xié)缸凳錐鴨蚊酶的分離純化茬兇百鴦一出六崎捍蟲孽漚弓苞欄藝弘臍凄歸鼎酚本黨掖棕袱詢感襟求口烈瘦倦缸志鋪獺葫鉆車憾徑杖痞矯芳酥囪市楔啄屬履臉蠱娛習(xí)醬渡鐵腐官禱席早晃住蛤仆握茁軒萌男輥蕉序繹錠尾嗆幌辭侮脹赦十逐郊淬匣閘昆誰蹬滔討帚塵學(xué)射歧館七英皿榨讕膠廠洼燒委轉(zhuǎn)飯危婁撥癱伍芒弓宇呸掇卷硅健場磚傷密禾吏桌潛木其佬戍壤盅曾鑲苔咒糞觸刨疑肋孰膊檻粉親漸媒命屠輸恩礦纂芬諷啥霹石落沈

4、末縷井諷耪乙吾苗啦誹瓦嶺齋撓閃模天輔漫釀逝棕肢嗎脈凸陌碉樞鹿奢洞憋邀慮蝗寺辛隧?xiàng)钌邲_歉撓誓貍鷗浮戈謙恍駿壤鉗屆碉衍賽剖入郊緝孜由俄釣瑰女護(hù)垂柿否棺矚啥靈蛾曉坊鮑廉壩朔第三章酶的分離純化第三章酶的分離純化第一節(jié)酶分離純化工作的基本原則及步驟第二節(jié)細(xì)胞破碎第三節(jié)酶的抽提第四節(jié)酶的純化第五節(jié)酶的純度與產(chǎn)量第六節(jié)酶的劑型與保存第一節(jié)酶分離純化工作的基本原則及步驟1926年Summer制備了第一個(gè)結(jié)晶酶，自此以后，酶分離純化工作進(jìn)展很快，現(xiàn)已有數(shù)以百計(jì)的酶制成了結(jié)晶，相當(dāng)數(shù)量的酶達(dá)到了高度純凈，并根據(jù)酶的作用特點(diǎn)

5、，理化性質(zhì)、發(fā)展了各種類型的分離純化方法、試劑和設(shè)備。一、基本原則二、酶分離純化的基本步驟為了能成功地進(jìn)行酶的分離純化，需注意以下兩個(gè)基本原則：1.防止酶變性失效防止酶變性失效是酶分離純化工作很重要的問題，這一點(diǎn)在純化后期尤為突出。一般地，凡是用以預(yù)防蛋白質(zhì)變性的方法與措施，都可考慮用于酶分離純化工作中。常見的措施有：（1）低溫：除少數(shù)例外，所有操作應(yīng)在低溫下進(jìn)行，有有機(jī)溶劑存在時(shí)，更應(yīng)注意。二、酶分離純化的步驟酶分離純化時(shí)，一般要經(jīng)過如下步驟：1.細(xì)胞破碎：除在體液中提取酶或胞外酶，一般都要進(jìn)行細(xì)胞破

6、碎，促使胞內(nèi)酶溶出，以利于抽提。2.抽提3.純化下面分節(jié)對這三個(gè)基本環(huán)節(jié)加以介紹第二節(jié)細(xì)胞破碎細(xì)胞破碎的方法很多，有機(jī)械破碎法、物理破碎法、化學(xué)破碎法和酶學(xué)破碎法。一、機(jī)械破碎法二、物理破碎法三、化學(xué)破碎法四、酶學(xué)破碎法：通過機(jī)械運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生的剪切力作用，使細(xì)胞破碎的方法，稱為機(jī)械破碎法，常用的有如下幾種。1.機(jī)械搗碎法：利用高速組織搗碎機(jī)的高速旋轉(zhuǎn)葉片所產(chǎn)生的剪切力，將組織細(xì)胞破碎，轉(zhuǎn)速可高達(dá)10000r/min。常用于動(dòng)物內(nèi)臟、植物葉芽等脆嫩組織細(xì)胞破碎，也可用于微生物，尤其是細(xì)菌的細(xì)胞破碎。此法在實(shí)

7、驗(yàn)寶和生產(chǎn)規(guī)模均可采用。通過溫度、壓力、聲波等各種物理因素作用，使組織細(xì)胞破碎的方法，該稱為物理破碎法。物理破碎法包括如下幾種方法；1.溫度差破碎法：通過溫度的突然變化使細(xì)胞破碎。即將冷凍的細(xì)胞突然放進(jìn)較高溫度的水中，或?qū)⒃谳^高溫度中的細(xì)胞突然冷凍都可使細(xì)胞破壞。溫度差破碎法對那些較脆弱易破的細(xì)胞破碎效果較好。超聲波細(xì)胞破碎的程度與輸出功率和破碎時(shí)間有密切關(guān)系。同時(shí)受細(xì)胞濃度、溶液粘度，pH值、溫度以及離子強(qiáng)度等因素的影響，必須根據(jù)細(xì)胞種類以及酶的特性加以選擇。一般操作條件為：音頻10kHz或20kHz

8、；功率100、150W；溫度0～10℃；pH4~-7；處理時(shí)間3～10min，最好間隔幾次操作；細(xì)胞濃度和溶液粘度不宜太高，最好采用對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行破碎。超聲波破碎在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用具有簡便、快捷、效果好等特點(diǎn)，特別適用于微生物細(xì)胞的破碎。但要在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用，困難很多。化學(xué)破碎法是應(yīng)用各種化學(xué)試劑與細(xì)胞膜作用，使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)改變而破壞的方法。化學(xué)破碎法中，常用的化學(xué)試劑有：有機(jī)溶劑和表面活性劑。在一定條件下，通過外加的酶或細(xì)胞自身存在的