凝血酶時間tt測定

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1、凝血酶時間（TT）測定（分析儀器法）某某人民醫(yī)院檢驗科臨檢室凝血酶時間（TT）測定（分析儀器法）編號:版本:1頁數(shù):共5頁1實驗原理：凝固法確定量的血漿樣本（100μl），加入凝血酶時間（TT）反應(yīng)試劑（50μl）經(jīng)過一定時間（3min）加濕后，采用波長660nm的光照射樣本，凝血過程中血漿的混濁度可以通過測量散射光光強度的改變來測定，然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出凝血酶時間。2標(biāo)本采集2.1早晨空腹采血(空腹12小時左右),靜脈采血。2.23.8％(w/v)枸椽酸鈉0.2ml+靜脈血1.8ml,混勻。3標(biāo)本存放1小

2、時內(nèi)(3000r/min×15min)分離血漿,室溫放置不超過2小時,2～8℃保存不超過4小時，長時間保存需在冰凍條件下，（-70℃不超過6個月）,只能凍融1次，在37℃迅速解凍，以減低凝血因子的消耗，解凍后立即測試。4標(biāo)本運輸：低溫條件下運輸。5標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn):抗凝劑不符合,采血量不準(zhǔn)確,凝固,溶血,脂血標(biāo)本不能作測定。6.實驗材料:6.1德國DadeBehringMarburg公司凝血酶時間測定試劑,每瓶5ml（用配套稀釋液溶解）共50人份,未開封試劑2～8℃貯存到說明書上有效期，復(fù)溶試劑2～8℃保存不

3、超過7天。6.2DadeCitrol質(zhì)控血漿.用蒸餾水1ml溶解后放置30分鐘,才能使用或分裝。復(fù)溶后,室溫保存2小時,2～8℃4小時。7.儀器設(shè)備:7.1儀器名稱:SysmexCA-1500全自動血液凝固分析儀7.2儀器廠家:日本Sysmex公司57.3儀器型號:SysmexCA-15007.4儀器技術(shù)參數(shù):7.4.1速度:最快檢測速度180測試/小時,組合檢測約140測試/小時7.4.2試劑位:36個,具冷藏功能。7.4.3樣本位:50個,可自動連續(xù)添加。7.5儀器校準(zhǔn)程序:7.5.1校準(zhǔn)頻率:當(dāng)方法改

4、變,試劑廠家或試劑型號改變,儀器維修影響測定結(jié)果等情況時,必須進行校準(zhǔn)。7.5.2校準(zhǔn)操作:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線分析(由儀器提供商指定工程師執(zhí)行)8.操作步驟:8.1檢查前準(zhǔn)備:8.1.1清空廢液瓶,清空反應(yīng)杯拋棄槽。8.1.2添加足夠反應(yīng)杯(不能超出警告線)。8.1.3添加清潔液試劑,清洗用蒸餾水等。8.2開機先開打印機再開主機,開機后儀器自檢,約15分鐘,屏幕上方“NotReady”變?yōu)椤癛eady”,表示儀器預(yù)熱完成,進入系統(tǒng)準(zhǔn)備工作狀態(tài),可進行測定。8.3輸入工作清單:從主菜單選WorkList→出現(xiàn)第一架

5、樣本工作清單輸入畫面,選IDNOEntry輸入第一個樣本號→按相應(yīng)實驗項目名稱鍵PT,并同時輸入此標(biāo)本的其他測試項目,若選“凝血四項（PT、APTT、Fbg、TT）”，可按Profile#1組合選項選擇，選中項目相應(yīng)位置標(biāo)記為“○”，選完項目后按ENTER確認，要刪除某項目時只需按該項目（按鍵如PT○變?yōu)镻T-）即可，→用↑↓鍵，同樣輸入其他標(biāo)本編號項目。（快速輸入可用Repeat鍵，輸入重復(fù)標(biāo)本數(shù)，復(fù)制同樣項目的輸入。8.4放置樣本按8.3所設(shè)好的工作清單順序?qū)㈦x心分離好的樣本放置于樣本架上,并按順序把樣

6、本架排列于Sampler進樣器右邊位置(最多同時放5架共50個樣本)8.5按Start鍵開始測定.蓋好遮光蓋,確認儀器為準(zhǔn)備狀態(tài)(顯示屏正上方顯示“Ready”)按Start鍵,進樣開始,→測定進行,儀器顯示為“Analying”(被選擇項目背景變?yōu)?“◎”，此時可重復(fù)8.3,8.4,繼續(xù)輸入其他架樣本工作清單,按Rigester,繼續(xù)確認測試任務(wù),添加樣本架繼續(xù)測試,→測定完成,測定項目背景變?yōu)椤啊瘛?，打印機打印出測定結(jié)果，所有測定清單完成，系統(tǒng)恢復(fù)“Ready”狀態(tài)。8.6每日維護:完成每日的測定后,關(guān)

7、機前維護。8.6.1沖冼針RinseProbe8.6.2清空廢液瓶,和已使用過的反應(yīng)杯。8.6.3將試劑架連用試劑放入冰箱。8.7關(guān)機:先關(guān)主機,再關(guān)打印機。9．檢驗結(jié)果的判斷與分析:9.1儀器測定TT的線性范圍在5-600秒,測定完成后儀器顯示TT秒數(shù)，若不能對參數(shù)進行正確計算,將出現(xiàn)下列信息:﹡﹡﹡.﹡出現(xiàn)錯誤,不能得到分析數(shù)據(jù)ˉˉˉ.ˉ不能計算參數(shù)＋＋＋.＋數(shù)值超出線性范圍.9.2儀器設(shè)定TT參考范圍在14-20秒,如果得不到一個正常數(shù)值,在數(shù)據(jù)的左側(cè)將出現(xiàn)下列標(biāo)記:﹡出現(xiàn)錯誤信息<數(shù)據(jù)低于可報告的低

8、限>數(shù)據(jù)高于可報告的高限10.質(zhì)量控制:每批樣本同時測定兩個濃度水平(高值和正常值)的質(zhì)控品,以2S為警告限,3S為失控限,繪制質(zhì)控圖,判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則詳見室內(nèi)質(zhì)控作業(yè)指導(dǎo)書。11臨床意義：11.1參考范圍：14-20秒（不同廠家試劑有不同參考范圍，請參照試劑說明書）11.2TT延長：患者血循環(huán)中AT-Ⅲ活性明顯增高，肝素增多或類肝素抗凝物質(zhì)存在，如SLE、肝病腎病等，異常纖維蛋白原血癥，低（無）纖維蛋白原