凝血酶時(shí)間tt測(cè)定

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1、凝血酶時(shí)間（TT）測(cè)定（分析儀器法）某某人民醫(yī)院檢驗(yàn)科臨檢室凝血酶時(shí)間（TT）測(cè)定（分析儀器法）編號(hào):版本:1頁(yè)數(shù):共5頁(yè)1實(shí)驗(yàn)原理：凝固法確定量的血漿樣本（100μl），加入凝血酶時(shí)間（TT）反應(yīng)試劑（50μl）經(jīng)過一定時(shí)間（3min）加濕后，采用波長(zhǎng)660nm的光照射樣本，凝血過程中血漿的混濁度可以通過測(cè)量散射光光強(qiáng)度的改變來(lái)測(cè)定，然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出凝血酶時(shí)間。2標(biāo)本采集2.1早晨空腹采血(空腹12小時(shí)左右),靜脈采血。2.23.8％(w/v)枸椽酸鈉0.2ml+靜脈血1.8ml,混勻。3標(biāo)本存放1小

2、時(shí)內(nèi)(3000r/min×15min)分離血漿,室溫放置不超過2小時(shí),2～8℃保存不超過4小時(shí)，長(zhǎng)時(shí)間保存需在冰凍條件下，（-70℃不超過6個(gè)月）,只能凍融1次，在37℃迅速解凍，以減低凝血因子的消耗，解凍后立即測(cè)試。4標(biāo)本運(yùn)輸：低溫條件下運(yùn)輸。5標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn):抗凝劑不符合,采血量不準(zhǔn)確,凝固,溶血,脂血標(biāo)本不能作測(cè)定。6.實(shí)驗(yàn)材料:6.1德國(guó)DadeBehringMarburg公司凝血酶時(shí)間測(cè)定試劑,每瓶5ml（用配套稀釋液溶解）共50人份,未開封試劑2～8℃貯存到說明書上有效期，復(fù)溶試劑2～8℃保存不

3、超過7天。6.2DadeCitrol質(zhì)控血漿.用蒸餾水1ml溶解后放置30分鐘,才能使用或分裝。復(fù)溶后,室溫保存2小時(shí),2～8℃4小時(shí)。7.儀器設(shè)備:7.1儀器名稱:SysmexCA-1500全自動(dòng)血液凝固分析儀7.2儀器廠家:日本Sysmex公司57.3儀器型號(hào):SysmexCA-15007.4儀器技術(shù)參數(shù):7.4.1速度:最快檢測(cè)速度180測(cè)試/小時(shí),組合檢測(cè)約140測(cè)試/小時(shí)7.4.2試劑位:36個(gè),具冷藏功能。7.4.3樣本位:50個(gè),可自動(dòng)連續(xù)添加。7.5儀器校準(zhǔn)程序:7.5.1校準(zhǔn)頻率:當(dāng)方法改

4、變,試劑廠家或試劑型號(hào)改變,儀器維修影響測(cè)定結(jié)果等情況時(shí),必須進(jìn)行校準(zhǔn)。7.5.2校準(zhǔn)操作:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線分析(由儀器提供商指定工程師執(zhí)行)8.操作步驟:8.1檢查前準(zhǔn)備:8.1.1清空廢液瓶,清空反應(yīng)杯拋棄槽。8.1.2添加足夠反應(yīng)杯(不能超出警告線)。8.1.3添加清潔液試劑,清洗用蒸餾水等。8.2開機(jī)先開打印機(jī)再開主機(jī),開機(jī)后儀器自檢,約15分鐘,屏幕上方“NotReady”變?yōu)椤癛eady”,表示儀器預(yù)熱完成,進(jìn)入系統(tǒng)準(zhǔn)備工作狀態(tài),可進(jìn)行測(cè)定。8.3輸入工作清單:從主菜單選WorkList→出現(xiàn)第一架

5、樣本工作清單輸入畫面,選IDNOEntry輸入第一個(gè)樣本號(hào)→按相應(yīng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱鍵PT,并同時(shí)輸入此標(biāo)本的其他測(cè)試項(xiàng)目,若選“凝血四項(xiàng)（PT、APTT、Fbg、TT）”，可按Profile#1組合選項(xiàng)選擇，選中項(xiàng)目相應(yīng)位置標(biāo)記為“○”，選完項(xiàng)目后按ENTER確認(rèn)，要?jiǎng)h除某項(xiàng)目時(shí)只需按該項(xiàng)目（按鍵如PT○變?yōu)镻T-）即可，→用↑↓鍵，同樣輸入其他標(biāo)本編號(hào)項(xiàng)目。（快速輸入可用Repeat鍵，輸入重復(fù)標(biāo)本數(shù)，復(fù)制同樣項(xiàng)目的輸入。8.4放置樣本按8.3所設(shè)好的工作清單順序?qū)㈦x心分離好的樣本放置于樣本架上,并按順序把樣

6、本架排列于Sampler進(jìn)樣器右邊位置(最多同時(shí)放5架共50個(gè)樣本)8.5按Start鍵開始測(cè)定.蓋好遮光蓋,確認(rèn)儀器為準(zhǔn)備狀態(tài)(顯示屏正上方顯示“Ready”)按Start鍵,進(jìn)樣開始,→測(cè)定進(jìn)行,儀器顯示為“Analying”(被選擇項(xiàng)目背景變?yōu)?“◎”，此時(shí)可重復(fù)8.3,8.4,繼續(xù)輸入其他架樣本工作清單,按Rigester,繼續(xù)確認(rèn)測(cè)試任務(wù),添加樣本架繼續(xù)測(cè)試,→測(cè)定完成,測(cè)定項(xiàng)目背景變?yōu)椤啊瘛?，打印機(jī)打印出測(cè)定結(jié)果，所有測(cè)定清單完成，系統(tǒng)恢復(fù)“Ready”狀態(tài)。8.6每日維護(hù):完成每日的測(cè)定后,關(guān)

7、機(jī)前維護(hù)。8.6.1沖冼針RinseProbe8.6.2清空廢液瓶,和已使用過的反應(yīng)杯。8.6.3將試劑架連用試劑放入冰箱。8.7關(guān)機(jī):先關(guān)主機(jī),再關(guān)打印機(jī)。9．檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析:9.1儀器測(cè)定TT的線性范圍在5-600秒,測(cè)定完成后儀器顯示TT秒數(shù)，若不能對(duì)參數(shù)進(jìn)行正確計(jì)算,將出現(xiàn)下列信息:﹡﹡﹡.﹡出現(xiàn)錯(cuò)誤,不能得到分析數(shù)據(jù)ˉˉˉ.ˉ不能計(jì)算參數(shù)＋＋＋.＋數(shù)值超出線性范圍.9.2儀器設(shè)定TT參考范圍在14-20秒,如果得不到一個(gè)正常數(shù)值,在數(shù)據(jù)的左側(cè)將出現(xiàn)下列標(biāo)記:﹡出現(xiàn)錯(cuò)誤信息<數(shù)據(jù)低于可報(bào)告的低

8、限>數(shù)據(jù)高于可報(bào)告的高限10.質(zhì)量控制:每批樣本同時(shí)測(cè)定兩個(gè)濃度水平(高值和正常值)的質(zhì)控品,以2S為警告限,3S為失控限,繪制質(zhì)控圖,判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則詳見室內(nèi)質(zhì)控作業(yè)指導(dǎo)書。11臨床意義：11.1參考范圍：14-20秒（不同廠家試劑有不同參考范圍，請(qǐng)參照試劑說明書）11.2TT延長(zhǎng)：患者血循環(huán)中AT-Ⅲ活性明顯增高，肝素增多或類肝素抗凝物質(zhì)存在，如SLE、肝病腎病等，異常纖維蛋白原血癥，低（無(wú)）纖維蛋白原