化學(xué)去細(xì)胞異種神經(jīng)復(fù)合ngf、修復(fù)神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究

化學(xué)去細(xì)胞異種神經(jīng)復(fù)合ngf、修復(fù)神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究

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時(shí)間:2019-02-02

化學(xué)去細(xì)胞異種神經(jīng)復(fù)合ngf、修復(fù)神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究_第1頁
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《化學(xué)去細(xì)胞異種神經(jīng)復(fù)合ngf、修復(fù)神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、中文摘要。目的用化學(xué)方法去除日本大耳白兔雙側(cè)脛神經(jīng)的雪旺氏細(xì)胞及髓鞘,制成去細(xì)胞神經(jīng)基膜管,將NGF(神經(jīng)生長(zhǎng)因子)與神經(jīng)基膜管復(fù)合,橋接成年wiStar大鼠坐骨神經(jīng)10mm神經(jīng)缺損,進(jìn)一步探索NGF與異種去細(xì)胞神經(jīng)基膜管復(fù)合后用于異種移植修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的效果。方法選用成年日本大耳白兔15只,切取兔雙側(cè)脛神經(jīng)各4一,隨機(jī)抽取15例新鮮神經(jīng),分別取其中2∞行流式細(xì)胞法檢測(cè)M}IC一Ⅱ類組織相容性抗原,其余2crn行去細(xì)胞處理后再行流式細(xì)胞法檢測(cè)MHC一Ⅱ類抗原及組織學(xué)、電鏡觀察其超微結(jié)構(gòu),另15例新鮮神經(jīng)分別剪成1—長(zhǎng)度,經(jīng)化學(xué)方法制成去

2、細(xì)胞神經(jīng)基膜管,其中15段用4500U/“的NGF溶液4℃浸泡24小時(shí);另15段置于無菌PBS緩沖液中4℃保存?zhèn)溆茫桓鶕?jù)移植物的不同,將wistar大鼠隨機(jī)分為3組,每組15只:實(shí)驗(yàn)組(A組):去細(xì)胞異種神經(jīng)基膜管復(fù)合NGF移植組、對(duì)照組I(B組):去細(xì)胞異種神經(jīng)基膜管移植組、對(duì)照組Ⅱ(C組):自體神經(jīng)移植組。分籠喂養(yǎng),術(shù)后1個(gè)月行神經(jīng)電生理檢測(cè),包括脛后肌群運(yùn)動(dòng)誘發(fā)電位,再生神經(jīng)的傳導(dǎo)速度;用HE染色,免疫組化染色,透射電鏡等方法對(duì)移植段遠(yuǎn)端吻合口再生神經(jīng)纖維進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,并對(duì)再生有髓神經(jīng)纖維的數(shù)量、密度、直徑及雪旺氏細(xì)胞的密度進(jìn)行量

3、化分析。結(jié)果移植前新鮮神經(jīng)組MHc一Ⅱ類抗原檢測(cè)值為72.14±19.88,去細(xì)胞組MHC一Ⅱ類抗原檢測(cè)值為4.19±3.11,兩組比較存在顯著性差異(PO.05),A組與B組比較差異有顯著性(P<0.05),說明神經(jīng)恢復(fù)效果優(yōu)于B組。組織學(xué)觀察見3組移植體遠(yuǎn)端吻合口橫切面

4、再生神經(jīng)纖維呈微束狀,透射電鏡觀察再生神經(jīng)纖維具有正常的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。結(jié)論經(jīng)化學(xué)萃取的去細(xì)胞兔脛神經(jīng)基膜管能夠移植于大鼠,成功修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損,而且復(fù)合NGF的去細(xì)胞基膜管在神經(jīng)修復(fù)質(zhì)量上優(yōu)于單純的去細(xì)胞神經(jīng)基膜管,更加接近自體神經(jīng)移植的效果。關(guān)鍵詞去細(xì)胞;異種神經(jīng)基膜管;NGF;神經(jīng)移植oABSTRACTObjective1、oevaluatetheeffectofthep酬pheralner憮regenerationintheadultwis—tarratS,whichhadbeenmadea1.0鋤lor培gapinthecont

5、inuity0fthesciaticnerveandthegapwasrepairedbyrabbittibialnerveSa“err鋤oval。fSchwannodlandmydhsheathbychemicalextractiontogetaceUuhrb{lsallaminatubes,onwKchnervegrowthfactorw硒appI塒.MethodsFifteenadultrabbitwereused,4cmdoubktibialnen忙wereexci嬈d,fif—teenfreshnervewereslectedr

6、andomly.2cmfreshnerveⅥrereLIsedt?!x鋤ineⅫCⅡanti—genbynowcytometryandtobeobservedtheultrastructⅡrebyelectronmicroscopic;anotherfreshnervealsowereusedtoex哪ine^儺CⅡamigen出erwhichweretreatedwithc}掄mica王detergentst。be啪exerlQgeneicacellularnerveIksalkminascaffdds.Anotherfifteenn

7、erve。f4cmwerecutinto1cm,alsomadeinto煳1qgeneicacellularnerveBasall鋤inascaffolds,fifteenofwhich、ⅣereimersedintoNGF(4500u/h1)dufing24hat4℃;restofthemwereimmersedint。PBS(pH7.2)at4℃unt.1uSe.Acoordingt0differ吼t確plant,thewistarr如weredividedrandornlyintothreegroup8,15ifleach:xenq

8、geneicacellularbasall姍inatubesgraftirlg。ombinedwithNGF(groupA),xenqgendcaceUdarbasalI鋤inatubeSgr

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