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《力學(xué)刺激對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、力學(xué)刺激對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的研究計：學(xué)位論文：27頁表格：O個插圖：12幅林天指導(dǎo)教師：張衛(wèi)國教授申請學(xué)位級別：碩士學(xué)位論文提交日期：2012年4月學(xué)位授予單位：大連醫(yī)科大學(xué)專業(yè)名稱：外科學(xué)論文答辯日期：2012年5月學(xué)位授予日期：2012年6月評閱人：答辯委員會主席：獨(dú)創(chuàng)性聲明IIIIIIIIIIIIIIIIIIIY2283071本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也
2、不包含為獲得大連醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：型絲簽字日期：業(yè)年￡月丑El關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明《七磊1緞耐襁吲之歐枷Jl犯響軹智細(xì)J
3、犯批奶確宕?！废当救嗽诖筮B醫(yī)科大學(xué)攻讀(博士、碩士)學(xué)位期間在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的學(xué)位論文。本人及指導(dǎo)教師完全了解大連醫(yī)科大學(xué)關(guān)于保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版本，允許論文被查閱和借閱，同意學(xué)校將本論文加入：1
4、．中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社——《中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》、《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》及CNKI相關(guān)數(shù)據(jù)庫。2．中國科學(xué)技術(shù)信息研究所——《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》3．國家圖書館本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，可以公布論文的全部或部分內(nèi)容。薹喜耋需蓁莖：一指導(dǎo)教師簽名：．§五星!上＼簽字日期：翟!三年』月五日目錄一、摘要??????????????????????????1(一)中文摘要??????????????????????1(二)英文摘要???
5、???????????????????3二、正文??????????????????????????5(一)前言????????????????????????5(二)材料和方法????????????????????6(三)結(jié)果???????????????????????10(四)討論??????????????????0O0OD??13(五)結(jié)論?0ODOOOO00?????????????????16(六)參考文獻(xiàn)?????????????????????17三、綜述??????????????????
6、???????19(一)綜述??????????????????????19(二)參考文獻(xiàn)???????00QO00??????????24四、附錄?????????????????????????26五、致謝??????????????????-??????··27力學(xué)刺激對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的研究碩士生姓名：林天指導(dǎo)教師：張衛(wèi)國教授指導(dǎo)小組：王壽宇副教授專業(yè)名稱：外科學(xué)摘要目的：在微團(tuán)培養(yǎng)條件下探討不同離心力對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的影響與作用。方法：取6周齡的SD大鼠，在無菌條件下分離
7、出股骨和脛骨并抽取骨髓，使用密度梯度離心法提取原代BMSCs，并經(jīng)過反復(fù)換液和傳代得到純化的BMSCs，使用流式細(xì)胞儀測出CD29,CD90和CD45的含量，鑒定細(xì)胞的純度。取第6代BMSCs采用微團(tuán)方式進(jìn)行立體培養(yǎng)，在培養(yǎng)過程中更換以TGF．pl，ITS為主要成分的誘導(dǎo)培養(yǎng)基并根據(jù)離心力強(qiáng)度將細(xì)胞分為4組：無應(yīng)力對照組、1009應(yīng)力組、2009應(yīng)力組和3009應(yīng)力組。誘導(dǎo)培養(yǎng)28天后，對細(xì)胞團(tuán)塊進(jìn)行鑒定和比較。鑒定指標(biāo)主要為大體觀察細(xì)胞團(tuán)塊的形態(tài)、光澤度等；臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活度；甲苯胺藍(lán)染色測定蛋白聚糖的合
8、成和II型膠原免疫組化檢測H型膠原含量。結(jié)果：1、BMSCs原代細(xì)胞早期接種時，細(xì)胞呈類圓形，48小時后少許細(xì)胞貼壁，并逐漸延伸成長梭性。約7日后即可見明顯的集落形成，與周圍的集落漸漸的融合，2周后，細(xì)胞基本融合達(dá)90％，排列緊密而有序，至第5代時細(xì)胞形態(tài)更加規(guī)矩，單個細(xì)胞已成一致的狹長梭形，排列緊密有序，集落中心呈旋渦狀生長。2、BMSCs流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果：CD29表達(dá)率為97．36％，CD90表達(dá)率為99．61％，均為強(qiáng)陽性反應(yīng)；CD45表達(dá)率為0．44％為陰性反應(yīng)。說明此BMSCs細(xì)胞樣本純度很高，符合
9、本實驗要求。3、BMSCs經(jīng)28天誘導(dǎo)后，于離心管底部肉眼可見的銀白色小質(zhì)塊，，球形，略有光澤，用鑷子夾之韌性較差，各分組間細(xì)胞團(tuán)塊的大小，色澤無明顯差異。4、BMSCs經(jīng)28天誘導(dǎo)后臺盼藍(lán)染色結(jié)果：無應(yīng)力，1009，2009三組之間細(xì)胞活力無明顯差異，而3009應(yīng)力組的細(xì)胞活力則較前三組明顯降低，具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0．05)。5、BMSCs經(jīng)28天誘導(dǎo)后甲苯胺藍(lán)染色：2009應(yīng)力組
