csnk2b在肝癌中表達變化及其與肝癌發(fā)生和遷移關(guān)系探索

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1、萬方數(shù)據(jù)指導(dǎo)小組成員余龍復(fù)旦大學(xué)遺傳所教授江松敏復(fù)旦大學(xué)遺傳所副教授楊鮮梅復(fù)旦大學(xué)遺傳所副教授萬方數(shù)據(jù)復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文CSn(愆B在肝癌中的表達變化目錄1111IIIIIII1111IIIY2702516縮略詞表??????????????????????????????。。1中文摘要?????????????????????????????..2Abstract?????????????????.??????????.??????????????。4前言????????????????????

2、????????????????6材料和方法????????????????????????????8一、材料與試劑??????????????????????????.8二、主要的儀器設(shè)備????????????????????????11三、生物信息學(xué)途徑和計算機分析軟件包??????????????.12四、實驗方法???????????????????????????12結(jié)果???????????????????????????????????????????.17一、CSNK2BmRNA水

3、平在肝癌組織中較之癌旁組織有顯著性上調(diào)???17二、CSNK2BmRNA在肝癌組織中上調(diào)與肝癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)聯(lián)分析18三、CSNK2B在肝癌組織中的分布和表達情況????????????..19四、CSNK2B在肝癌組織中的上調(diào)表達與肝癌臨床病理學(xué)資料相關(guān)性分析20五、CSNK2B的siRNA小片段的有效性檢測??????????????22六、siRNA消減CSNK2B表達抑制細(xì)胞的生長?????????????24七、siRNA敲減CSNK2B表達抑制細(xì)胞克隆形成的大小和密度?????一25

4、八、敲減CSNK2B表達減弱細(xì)胞株遷移和侵襲能力??????????..26九、敲減CSNK2B的表達豐度下調(diào)影響細(xì)胞周期蛋cyclinBl的表達??.27十、敲減CSNK2B的表達豐度能夠增強肝癌細(xì)胞對抗腫瘤藥物的敏感性?.27討論???????????????????????????????????????????..:;()參考文獻???????????????????????????????32論文小結(jié)???????????????????????????????33文獻綜述:???????

5、??????????????????????..34參考文獻???????????????????????????????46致謝??????????????????????????????????????????.53萬方數(shù)據(jù)笙呈盔蘭堡主堂垡笙鑾垡翌!墜絲壟壁墮±墮壅塑些FBSPAGEPBSPCRCDNAmRNAbpKDESTRT.PCRsiRNACCK.8GFPHCCWBCK2縮略詞表FetalBovineSerumPolypropyleneAcylGelElectrophoresisPhosp

6、hate.BufferedSalinePolymeraseChainReactionComplementaryDNAMessengerRNABasePairKilodaltonExpressedSequenceTagRealTime.PolymeraseChainReactionSmallinterferingRNACellcountingkit-8GreenfluomscentproteinHepatocellularcarcinomaWesternblotCaseinkinase2萬方數(shù)據(jù)復(fù)旦大

7、學(xué)碩士學(xué)位論文CSNK2B在肝癌中的表達變化及其與肝癌的發(fā)生和遷移的關(guān)系探索中文摘要研究背景與目的:蛋白激酶CK2曾經(jīng)被稱為酪蛋白激酶II,是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的信使非依賴性絲/蘇氨酸蛋白激酶,高度保守且功能多樣。近些年對CK2的研究取得了重大的進展,其參與了許多調(diào)控細(xì)胞增殖和凋亡的途徑[1]。主要集中在頭頸癌,前列腺癌,乳腺癌,肺癌的研究中[2,4,8,9】。大量實驗表明,以非全酶形式存在的CK2各亞基具有各自獨特的生物學(xué)功能[2,5]。CSNK2B亞基不僅是催化亞基a或a’的特異配體,更可

8、以以游離方式存在,行使生物學(xué)功能[3]。本文通過檢測肝癌中的CK2的調(diào)節(jié)亞基CSNK2B的表達水平,探討CSNK2B的表達水平與臨床病理的關(guān)系。并應(yīng)用RNA干擾技術(shù)敲減肝癌細(xì)胞7721中的CSNK2B亞基,探討下調(diào)CSNK2B對肝癌細(xì)胞生長增殖和遷移的影響。我們就CSNK2B是否影響抗腫瘤藥物對肝癌細(xì)胞的敏感性做了初步了研究,探索性的檢測了消減CSNK2B后檢測細(xì)胞對10種抗腫瘤藥物耐藥性是否有所改變。方法:通過realtime-PCR檢測30例肝癌及癌旁樣本及100

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