蘆薈中蘆薈苷的提取、純化及生物活性的研究

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1、上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文蘆薈中蘆薈苷的提取、純化及生物活性的研究姓名：徐蓉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：水產(chǎn)品加工及貯藏工程指導(dǎo)教師：李燕20080105上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文蘆薈中蘆薈苷的提取、純化及生物活性的研究摘要蘆薈苷是蘆薈中的一種主要的生物活性成分，屬于葸醌類(lèi)化合物，主要存在于蘆薈葉片底部表皮附近。本文旨在建立從庫(kù)拉索蘆薈中分離純化蘆薈苷的方法，并研究其抑菌及抗氧化活性。提?。貉芯砍暡ǚㄌ崛?kù)拉索蘆薈中蘆薈苷的工藝條件。通過(guò)對(duì)提取時(shí)間，提取溫度，料液比，乙醇濃度的單因素實(shí)驗(yàn)，確定了提取蘆薈粉末中蘆薈苷的條件，N過(guò)Lg(34)正交實(shí)驗(yàn)，以蘆薈苷得率作為

2、考察指標(biāo)，進(jìn)一步優(yōu)化工藝條件。結(jié)果表明：提取工藝為：乙醇濃度80％，提取時(shí)間為45min，料液比為l：25，提取溫度45℃。按照該提取工藝提取，蘆薈苷的提取率為11．18mg／g。在確定了該提取工藝的基礎(chǔ)上，研究了酸化條件、超聲波輸出功率、提取級(jí)數(shù)對(duì)提取率的影響。結(jié)果表明：醋酸濃度為lmoL／L，室溫條件下酸解30min，功率360W，提取三次，蘆薈苷的提取率為14．9mg／g。純化：研究了6種大孔吸附樹(shù)脂對(duì)蘆薈苷的靜態(tài)吸附和動(dòng)態(tài)洗脫性能，結(jié)果表明：在所選的樹(shù)脂中HZ．801型樹(shù)脂吸附與洗脫效果最佳。優(yōu)化出的最佳工藝條件為：在上樣濃度為0．2765mg／mL

3、的條件下，上樣體積為520mL，洗脫速度2mL／min，先用雙蒸水洗滌至流出液為無(wú)色，再用lO％的乙醇溶液洗滌至流出液為無(wú)色，后用3BV60％7",醇溶液洗滌并收集洗脫液，得到蘆薈苷溶液，經(jīng)濃縮、冷凍干燥后，進(jìn)行純度分析。在此條件下蘆薈苷純度為10．16％，純化倍數(shù)達(dá)到14．72，回收率為86．3％。將粗分離物進(jìn)一步過(guò)層析硅膠柱精制。選擇幾種不同體積比的展開(kāi)劑，通過(guò)TLC法觀察展開(kāi)效果，最終確定乙酸乙酯：甲醇(6：1)為最佳的展開(kāi)劑，柱色譜條件為：硅膠柱規(guī)格為(20x400mm)，上樣量為0．05439，流速一秒一滴，每20mL收集一管，用TLC法追蹤檢測(cè)蘆

4、薈苷流出的位置，收集含有蘆薈苷的流出液，濃縮，冷凍干燥。得到蘆薈苷精制品。對(duì)精制品進(jìn)行定性檢測(cè)——Bom昀gers反應(yīng)和紅外吸收光譜檢測(cè)。結(jié)果表明：Borntragers反應(yīng)中，醚層由黃色褪為無(wú)色，氫氧化鈉層顯紅色，表明有蘆薈苷存在；精制品與蘆薈苷對(duì)照品的吸收光譜很相似，匹配度達(dá)到了90．86。另外，初步研究了高速逆流色譜法對(duì)蘆薈苷的純化。結(jié)果表明：在進(jìn)樣10min后丌始出峰，幾個(gè)峰清晰可見(jiàn)，沒(méi)有重疊也沒(méi)有“毛刺”，有效成分得到了完全的上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文分離。收集各峰所對(duì)應(yīng)的流出液，用TLC法檢測(cè)，確定蘆薈苷溶液流出的位置?；钚裕簩⑻崛〉奶J薈苷進(jìn)行抑菌

5、及抗氧化活性實(shí)驗(yàn)，采用牛津杯法研究蘆薈苷的抑菌性，結(jié)果表明：當(dāng)蘆薈苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0．8％時(shí)，對(duì)大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌有輕微的抑制作用。采用DPPH法和超氧陰離子自由基(02’一)清除法研究蘆薈苷的抗氧化活性，結(jié)果表明：DPPH法中，在樣品濃度均為O．125mol／L的條件下，抗壞血酸對(duì)DPPH溶液的抑制率達(dá)到了90％以上，粗品抑制率為22．29％，粗分離物抑制率為51．94％，而蘆薈苷精制品及對(duì)照品的抑制率僅為12．47％和3．99％。超氧陰離子自由基(02’一)清除試驗(yàn)中，粗品經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂分離純化后，對(duì)02’一清除的IC50值由21．80m

6、g／mL提高到了4．17mg／mL。關(guān)鍵詞：蘆薈苷，超聲波提取，大孔吸附樹(shù)脂純化，硅膠柱，高速逆流色譜，活性試驗(yàn)上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文StudiesonExtractionandPurificationofAioinfromaloeandItsBio．．a(chǎn)ctivitiesABSTRACTAloinwasanimportantbio．a(chǎn)ctivecomponentinaloe．belongingtotheanthraquinones，mainlYinthevicinityofaloeleavesatthebottomoftheepidermis．Thist

7、hesisistoestablishtheoptimumextractionandpurificationconditionsofA10infromAloebarbadensisandstudyitseffectsonantibacterialandantioxidantactivity．Extraction：AloinwasextractedbyusingUltrasonic．Theextractiontime．extractiontemperature．1iquidratio，concentrationofethanolsingle—factorswer

8、etestedtoconfiITntheextrac