棉花(gossypium hirsutum)纖維中木聚糖合成相關(guān)基因的分子鑒定

棉花(gossypium hirsutum)纖維中木聚糖合成相關(guān)基因的分子鑒定

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1、分類號(hào)——密級(jí)——UDC——編號(hào)——事·尹蹄黲書零碩士學(xué)位論文益蕉[魚壘嬰垡巫塑魚塹型絲塑』墅絲主木聚糖合成相關(guān)基因的分子鑒定學(xué)位申請(qǐng)人姓名:疊弱申請(qǐng)學(xué)位學(xué)生類別:全旦劌塑±申請(qǐng)學(xué)位專業(yè)方向:生塹絲堂魚僉至壘塑鱟指導(dǎo)教師姓名:迸文亮趲妻至窒趲⑧M—ASTE?R'STHE潞碩士學(xué)位論文IUlIILLLLIIIIIILLILMILItlIIIIIILIILUIY2556231棉花(Gossypiurnhirsutum)纖維中木聚糖合成相關(guān)基因的分子鑒定論文作者:饒弱指導(dǎo)教師:許文亮教授李學(xué)寶教授學(xué)科專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向:植

2、物分子遺傳學(xué)華中師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2014年5月碩士學(xué)位論文MASTER’STHESISMolecularcharacterizationofgenesinvolvedInxylan-l●lbiosynthesis·cott●fibincottonerATheSisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinBiochemistryandmolecularbiologyByRaoYuePostgraduateProgramCollegeofLif

3、eScienceCentralChinaNormalUniversitySupervisor:XuWenliangandLiXuebaoAcademicTitle:ProfessorSignatureMay,2014碩士學(xué)位論文MASTER’STHESIS華中師范大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明和使用授權(quán)說明原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)

4、明。本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。作者簽名:/贏碉日期:羽件年籮月忍日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解華中師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬華中師范大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許學(xué)位論文被查閱和借閱;學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,可以允許采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后遵守此規(guī)定)保密論文注釋:本學(xué)位論文屬于保密,在——年解密后適用本授權(quán)書。非保密論文注釋:本學(xué)位論文不屬于保密范圍,適

5、用本授權(quán)書。作者日期本人學(xué)位論文規(guī)定享受作者日期執(zhí)慌鑰神虢嬲:如淖午5-月站日日期:矽坪年f月謝日已經(jīng)認(rèn)真閱讀“CALLS高校學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫發(fā)布章程",同意將本人的提交“CALLS高校學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫”中全文發(fā)布,并可按“章程”中的相關(guān)權(quán)益。旦童絲丞垡綾籃封趔童J1堂生三一上I二魚玉』至蘭學(xué)、張僥硐挪張俐:加驢j月謠日日期.沙,盱r月氓目碩士學(xué)位論文MASTER’STHESIS摘要棉花是世界上重要的纖維作物和油料作物,棉纖維是研究植物細(xì)胞壁發(fā)生和細(xì)胞伸長的理想模型之一。成熟棉纖維含有超過90%的纖維素、少量的半纖維素、果膠和蛋

6、白質(zhì)。關(guān)于細(xì)胞壁組分(特別是半纖維素)在棉纖維發(fā)育中的作用尚未見報(bào)道,半纖維素的改變?nèi)绾斡绊懨蘩w維發(fā)育,如何影響纖維素一半纖維素網(wǎng)絡(luò)而影響纖維品質(zhì)尚知之甚少。本文根據(jù)擬南芥和楊樹中已經(jīng)報(bào)道的參與半纖維素木聚糖合成的蛋白,基于生物信息學(xué)方法從棉花公共EST資料室中分離鑒定了20個(gè)可能參與棉細(xì)胞纖維半纖維素合成的候選基因,對(duì)這些基因編碼蛋白的特征進(jìn)行了詳細(xì)分析,并分別選擇了一個(gè)參與主鏈合成和還原末端的候選基因進(jìn)行了功能驗(yàn)證,主要結(jié)果如下:1.棉花木聚糖合成相關(guān)基因的篩查鑒定及功能預(yù)測(cè)通過生物信息學(xué)的方法,基于目前擬南芥和楊樹中木聚糖合成

7、基因的研究,結(jié)合棉花D基因組序列信息,從棉花EST文庫中篩查鑒定了20個(gè)可能參與棉花次生細(xì)胞壁半纖維素合成的基因,并獲得全長eDNA序列。通過蛋白質(zhì)序列對(duì)比分析,跨膜結(jié)構(gòu)域分析,信號(hào)肽分析,蛋白定位分析,3D結(jié)構(gòu)分析,蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域分析和進(jìn)化樹等方法分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)所分離鑒定的候選基因所編碼的蛋白質(zhì)分屬不同的參與木聚糖生物合成的酶家族,其中,有2個(gè)GT47家族的基因,8個(gè)GT8家族的基因,5個(gè)ESK類基因,4個(gè)GXMT類基因和1個(gè)RWA類基因,預(yù)測(cè)這些基因可能是定位于高爾基體上的II型膜蛋白,并且具有與木聚糖合成相關(guān)的結(jié)構(gòu)域,說明這些候

8、選基因可能參與木聚糖的合成。2.木聚糖合成相關(guān)基因在棉花組織中的表達(dá)分析提取棉花不同組織和不同發(fā)育階段棉花纖維的RNA,逆轉(zhuǎn)錄成eDNA。利用半定量RT-PCR和熒光定量RT.PCR方法對(duì)這些基因進(jìn)行表達(dá)分析,結(jié)果顯示這些基因均在棉花

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