富氫鹽水對(duì)大鼠脊髓損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究

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1、中圖分類號(hào)R651．2UDC610碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q53三密級(jí)公開(kāi)富氫鹽水對(duì)大鼠脊髓損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究Theexperimentalstudyonprotectiveeffectsofhydrogen—richsalineonspinalcordinjuryinrats作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：孫建鋒臨床醫(yī)學(xué)外科學(xué)湘雅三醫(yī)院王劍龍副教授論文答辯固期絲[3：查!彳答辯委員會(huì)中南大學(xué)2013年5月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰

2、寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明。作者簽名：日期：絲年』月么日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國(guó)家或湖南省有關(guān)部門(mén)規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。作者簽名：善未壘彩導(dǎo)師簽l嗍：粵《嚴(yán)日富氫鹽水對(duì)大鼠脊髓損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究摘

3、要：目的：探討蛛網(wǎng)膜下腔局部灌注富氫鹽水對(duì)脊髓損傷(SCI)的保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。本研究為富氫鹽水治療脊髓損傷提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)，也為富氫鹽水今后用于脊髓損傷的藥物治療提供一定的理論依據(jù)。方法：取SD大鼠75只(重量200—2509)，采用完全隨機(jī)法將SD大鼠隨機(jī)分為三組：A組；B組(SCI后氫水干預(yù)組)；C組(SCI后生理鹽水對(duì)照組)，每組25只。又根據(jù)不同觀察時(shí)間6h、24h、48h、1w、2w把A、B組和C組隨機(jī)各分為A1、A2、A3、A4、A5；B1、B2、B3、B4、B5和C1、C2、C3、C4、C5組，每小組5只。B、C組采用改良Allen’S撞擊法建立脊髓損傷模型并置硬膜內(nèi)導(dǎo)管。A

4、組打開(kāi)椎板后不損傷脊髓，行蛛網(wǎng)膜下腔導(dǎo)管置管。各組大鼠術(shù)后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)行BBB評(píng)分后，取相應(yīng)脊髓組織行HE染色病理學(xué)觀察、行降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)免疫組化染色對(duì)平均OD(opticaldensity)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；并通過(guò)免疫組化法對(duì)含半胱氨酸的門(mén)冬氨酸特異水解酶一3(Caspase、3)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)，各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)處死前行心臟抽血查丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：1．運(yùn)動(dòng)功能評(píng)定(BBB評(píng)分法)：A組各組評(píng)分均為正常的21分；術(shù)后24h、48h、1w、2w，B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的評(píng)分高于C組(P<0．05)。2．HE染色：A組細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，脊髓組

5、織結(jié)構(gòu)致密，細(xì)胞核顯染且居中，核仁顯染。SCI后C1較B1組炎癥反應(yīng)嚴(yán)重；C2組較B2組炎癥反應(yīng)嚴(yán)重，B3組神經(jīng)元萎縮且炎性反應(yīng)較C3組輕；B4組較C4組神經(jīng)元萎縮輕；B5組較C5組疤痕形成少。3．CGRPOD值：術(shù)后24h、48h、1w、2w，B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的0D值高于C組(P<0．05)。4．MDA水平檢測(cè)：術(shù)后24h、48h、1w、2w，C組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的MDA水平高于B組(P<0．05)，且B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的MDA水平高于A組(P<0．05)。5．SOD水平檢測(cè)：術(shù)后24h、48h、1w、2w，B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的SOD水平高于C組fP

6、術(shù)后24h、48h、1w、2w，C組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)Caspase．3的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目高于B組(P<0．05)，且B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)Caspase一3的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)日高于A組(P<0．051。結(jié)論：1．富氫水通過(guò)減輕脊髓損傷早期氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，后期通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)肢體運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)。2．富氫水早期通過(guò)減輕ScI神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)CGRP的下降，后期上調(diào)CGRP的表達(dá)進(jìn)而保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞。圖2l幅，表7個(gè)，參考文獻(xiàn)6l篇。關(guān)鍵詞：脊髓損傷；富氫鹽水；Caspase一3；降鈣素基因相關(guān)肽；丙二醛；超氧化物歧化酶分類號(hào)：R651．2Theexperimentalstudyonprote

7、ctiveeffectsofhydrogen—richsalineOilspinalcordinjuryinratsAbstract：Objectives：ToexploretheprotectiveeffectsoflocalsubarachnoidinfusionwithHydrogenSaline(HS)onspinalcordinjury(SCI)atrats，andanalyzethep