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《雷帕霉素對膠質(zhì)瘤細胞糖代謝的影響及其抗腫瘤機制研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、中圖分類號R魚51UDC610博士學位論文學校代碼!Q53三密級公玨雷帕霉素對膠質(zhì)瘤細胞糖代謝的影響及其抗腫瘤機制研究ResearchontheeffectofRapamycinonglucosemetabolis。hllmanRlioma：ellsanditsantitumormetabolisminUmanRllomaCellSanItSantl-tUmormechanism作者姓名：李春濤學科專業(yè)：臨床醫(yī)學研究方向：外科學學院(系、所)：湘雅醫(yī)院指導老師：劉運生教授答辯委員會主中南大學201
2、3年5月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。作者簽名：煎日期：蘭亟一年』月墜日學位論文版權使用授權書本人了解中南大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留學位論文并根據(jù)國家或湖南省有關部門規(guī)定送交學位論文，允許學位論文被查閱和
3、借閱；學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復印、縮印或其它手段保存學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。作者簽名：煎導師簽名自量鄉(xiāng)日期：衛(wèi)年三月墮日雷帕霉素對膠質(zhì)瘤細胞糖代謝的影響及其抗腫瘤機制研究摘要：目的：膠質(zhì)瘤是最常見的原發(fā)性腦部腫瘤，且多數(shù)切除后有復發(fā)可能。目前，針對惡性腫瘤細胞增殖、凋亡等方面的研究十分普遍。臨床上使用的抗腫瘤藥物大都是通過抑制腫瘤細胞的增殖、促進腫瘤細胞的凋亡來發(fā)揮作用的。P13
4、列Akt／mTOR信號通路在多種惡性腫瘤中過度激活，調(diào)控惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。mTOR是P13K／Akt信號通路下游重要的激酶，參與調(diào)控包括神經(jīng)膠質(zhì)瘤在內(nèi)的多種腫瘤細胞的生存和增殖。雷帕霉素是mTOR的抑制劑，能通過抑制mTOR的活性，參與調(diào)控P13l淞h，mTOR信號通路在惡性腫瘤細胞中的作用。然而，關于雷帕霉素治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的作用及相關分子機制尚未研究清楚。在惡性腫瘤細胞中，糖酵解水平異常升高，多種糖酵解酶的表達和活性被過度激活，提示糖酵解途徑可能為抗癌治療提供豐富的靶點。最近有研究報道，mi
5、croRNA．143受mTOR通路調(diào)控，且在多種惡性腫瘤中表達異常下調(diào)，其靶基因包括糖酵解關鍵限速酶己糖激酶2(ⅧQ)。然而，關于mTOR通路、miRNA．143以及糖酵解途徑在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的調(diào)控作用及三者之間的關系尚不清楚。本研究利用人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系U251和CHG．5，探索雷帕霉素在增殖、凋亡、糖酵解等多個方面對神經(jīng)膠質(zhì)瘤的調(diào)控作用，并探討相關的分子調(diào)控機制。方法：1)用100mM的雷帕霉素分別處理人膠質(zhì)瘤U251和CHG．5細胞0、6、12、24h，MTT法檢測U251和CHG．5細胞的增
6、殖能力。2)用100mM的雷帕霉素處理人膠質(zhì)瘤U251和CHG．5細胞0、6、12、24h，F(xiàn)CM檢測U251和CHG一5細胞凋亡水平的改變。3)用100mM的雷帕霉素處理人膠質(zhì)瘤U251和CHG一5細胞0、6、12、24h，WesternBlotting檢測磷酸化的S6激酶蛋白分子的表達水平。4)用100mM的雷帕霉素分別處理人膠質(zhì)瘤U251和CHG．5細胞O、6、12、24h，檢測葡萄糖攝取和乳酸分泌的變化。5)用100mM的雷帕霉素分別處理人膠質(zhì)瘤U251和CHG．5細胞0、6、12、24h
7、，分別檢測己糖激酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的活性。6)用100mM的雷帕霉素分別處理人膠質(zhì)瘤U251和CHG．5細胞0、6、12、24h，WesternBlotting分別檢測己糖激酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的蛋白表達水平。7)用100mM的雷帕霉素分別處理人神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251和CHG．5細胞0、6、12、24h，RealtimeqRT—PCR檢測miR一143的表達變化。結(jié)果：1)用100mM的雷帕霉素分別處理神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251和CHG．5細胞0、6、12、24h，隨著處理時間的延長，細胞的增殖
8、呈下降的趨勢。III2)用100mM的雷帕霉素分別處理神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251和CHG一5細胞0、6、12、24h，隨著處理時間的延長，細胞凋亡呈上升的趨勢。3)用100mM的雷帕霉素分別處理神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251和CHG一5細胞0、6、12、24h，隨著處理時間的延長，S6K的磷酸化水平呈下降的趨勢，提示mTOR活性受抑制。4)用100mM的雷帕霉素分別處理神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251和CHG-5細胞0、6、12、24h，隨著處理時間的延長，細胞葡萄糖攝取和乳酸分泌量呈下降趨勢。5)用100mM的雷
