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《豬卵巢卵母細(xì)胞體外受精的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類(lèi)號(hào)：S821.3密級(jí)：公開(kāi)UDC：編號(hào)：2015120906010832012級(jí)攻讀碩士學(xué)位研究生畢業(yè)論文豬卵巢卵母細(xì)胞體外受精的研究StudiesonFertilizationinvitroofthePoreineooeytes指導(dǎo)教師：許生成教授鄭新民研究院學(xué)生姓名：賈佩學(xué)科專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)：基礎(chǔ)獸醫(yī)研究方向：高原動(dòng)物繁殖生理學(xué)學(xué)院(系、部)：農(nóng)牧學(xué)院論文日期：二零一五年六月QinghaiUniversityMasterDissertationStudiesonFertilizationinvitroofthePoreineooeytesSupervisor
2、:Prof.Sheng-chengXUCo-supervisor:Prof.Xin-minZhengCandidate:Pei-JiaAcademicMajorApplidedfor:HypoxicPhysiologyofPlateauSpecificMajor:BasicVeterinaryCollege(Department):QinghaiAgricultureandAnimalHusbandrycollegeJun,2015獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論
3、文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：2015年6月8日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)青海大學(xué)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本論文屬于：保密□不保密□（請(qǐng)?jiān)谙鄳?yīng)方框內(nèi)打“√”），在_____年解
4、密后適用本授權(quán)書(shū)。學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：2015年6月8日日期：2015年6月8日摘要摘要本研究以廢棄豬卵巢為實(shí)驗(yàn)初始材料，用機(jī)械法抽取獲得未成熟卵母細(xì)胞，體外培養(yǎng)成熟后用于體外受精實(shí)驗(yàn)的研究。本文比較了影響豬卵母細(xì)胞體外受精的影響因素，以期能夠進(jìn)一步完善豬胚胎的體外生產(chǎn)體系，為胚胎技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展提供技術(shù)保障。本研究包括以下內(nèi)容：（1）比較在mTBM中添加不同濃度的咖啡因、不同受精時(shí)間及精子上浮時(shí)間對(duì)豬體外受精的影響。（2）比較豬卵母細(xì)胞體外不同成熟時(shí)間、受精過(guò)程中顆粒細(xì)胞的存在情況及低氧環(huán)境對(duì)豬體外受精的影響。（3）研究精子獲能液中添加不
5、同濃度的Ionomycin及Ionomycin作用不同時(shí)間對(duì)豬體外成熟卵母細(xì)胞體外受精效果的影響。主要研究結(jié)果如下：1.以改良mTBM為基礎(chǔ)液，添加咖啡因?qū)κ芫咛サ穆蚜崖屎湍遗呗视忻黠@的促進(jìn)作用，添加3mmol/L咖啡因組的受精胚胎卵裂率顯著高于添加5mmol/L咖啡因組和未添加咖啡因組(P＜0.05)，且該組的囊胚率最高；精子上浮處理1h組的卵裂率和囊胚率均顯著高于其它實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05)；精卵孵育時(shí)間對(duì)受精胚胎卵裂率無(wú)顯著影響(P＞0.05)，隨受精時(shí)間延長(zhǎng)至9h，受精胚胎的囊胚率顯著降低。通過(guò)各實(shí)驗(yàn)組比較發(fā)現(xiàn)，受精液中添加3mmol/L咖啡因，精子
6、上浮1.0h，受精6h能得到較好的體外受精結(jié)果。2.體外成熟40～42h組的卵母細(xì)胞體外受精胚胎的卵裂率和囊胚率顯著高于體外成熟培養(yǎng)36～38h組和46～48h組(P＜0.05)；保留2-3層顆粒細(xì)胞組與不脫顆粒細(xì)胞組的受精胚胎卵裂率和囊胚率差異均不顯著(P＞0.05)，且這兩組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯著高于無(wú)顆粒細(xì)胞組(P＜0.05)；就卵裂率和囊胚率而言，5%CO2組顯著高于10%CO2組和15%CO2組(P＜0.05)。通過(guò)對(duì)各實(shí)驗(yàn)組的比較，卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)40～42h，保留全部顆粒細(xì)胞和氣相環(huán)境為5%CO2能得到較好的體外受精結(jié)果。3.獲能液中添加10μmo
7、l/L的Ionomycin能顯著提高受精胚胎的卵裂率和囊胚率(P＜0.05)；用Ionomycin處理精子30min能獲得較好的體外受精效果。關(guān)鍵詞：豬卵母細(xì)胞體外受精I(xiàn)AbstractAbstractThisstudyhastakenabandonedporcineovarianfromslaughterhouseastheoriginalmaterials,obtainedimmatureporcineoocytesviamechanicalextractionmethodsandutilizedtheminIVF(InVitroFertilizatio
8、n)experimentsaftertheywere
