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《豬卵巢卵母細胞體外受精的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、分類號：S821.3密級：公開UDC：編號：2015120906010832012級攻讀碩士學位研究生畢業(yè)論文豬卵巢卵母細胞體外受精的研究StudiesonFertilizationinvitroofthePoreineooeytes指導教師：許生成教授鄭新民研究院學生姓名：賈佩學科專業(yè)名稱：基礎獸醫(yī)研究方向：高原動物繁殖生理學學院(系、部)：農(nóng)牧學院論文日期：二零一五年六月QinghaiUniversityMasterDissertationStudiesonFertilizationinvitroofthePoreineooeytesSupervisor
2、:Prof.Sheng-chengXUCo-supervisor:Prof.Xin-minZhengCandidate:Pei-JiaAcademicMajorApplidedfor:HypoxicPhysiologyofPlateauSpecificMajor:BasicVeterinaryCollege(Department):QinghaiAgricultureandAnimalHusbandrycollegeJun,2015獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除文中已經(jīng)標明引用的內(nèi)容外，本論
3、文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名：日期：2015年6月8日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權青海大學大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。本論文屬于：保密□不保密□（請在相應方框內(nèi)打“√”），在_____年解
4、密后適用本授權書。學位論文作者簽名：指導教師簽名：日期：2015年6月8日日期：2015年6月8日摘要摘要本研究以廢棄豬卵巢為實驗初始材料，用機械法抽取獲得未成熟卵母細胞，體外培養(yǎng)成熟后用于體外受精實驗的研究。本文比較了影響豬卵母細胞體外受精的影響因素，以期能夠進一步完善豬胚胎的體外生產(chǎn)體系，為胚胎技術的進一步發(fā)展提供技術保障。本研究包括以下內(nèi)容：（1）比較在mTBM中添加不同濃度的咖啡因、不同受精時間及精子上浮時間對豬體外受精的影響。（2）比較豬卵母細胞體外不同成熟時間、受精過程中顆粒細胞的存在情況及低氧環(huán)境對豬體外受精的影響。（3）研究精子獲能液中添加不
5、同濃度的Ionomycin及Ionomycin作用不同時間對豬體外成熟卵母細胞體外受精效果的影響。主要研究結果如下：1.以改良mTBM為基礎液，添加咖啡因?qū)κ芫咛サ穆蚜崖屎湍遗呗视忻黠@的促進作用，添加3mmol/L咖啡因組的受精胚胎卵裂率顯著高于添加5mmol/L咖啡因組和未添加咖啡因組(P＜0.05)，且該組的囊胚率最高；精子上浮處理1h組的卵裂率和囊胚率均顯著高于其它實驗組(P＜0.05)；精卵孵育時間對受精胚胎卵裂率無顯著影響(P＞0.05)，隨受精時間延長至9h，受精胚胎的囊胚率顯著降低。通過各實驗組比較發(fā)現(xiàn)，受精液中添加3mmol/L咖啡因，精子
6、上浮1.0h，受精6h能得到較好的體外受精結果。2.體外成熟40～42h組的卵母細胞體外受精胚胎的卵裂率和囊胚率顯著高于體外成熟培養(yǎng)36～38h組和46～48h組(P＜0.05)；保留2-3層顆粒細胞組與不脫顆粒細胞組的受精胚胎卵裂率和囊胚率差異均不顯著(P＞0.05)，且這兩組的實驗結果顯著高于無顆粒細胞組(P＜0.05)；就卵裂率和囊胚率而言，5%CO2組顯著高于10%CO2組和15%CO2組(P＜0.05)。通過對各實驗組的比較，卵母細胞體外成熟培養(yǎng)40～42h，保留全部顆粒細胞和氣相環(huán)境為5%CO2能得到較好的體外受精結果。3.獲能液中添加10μmo
7、l/L的Ionomycin能顯著提高受精胚胎的卵裂率和囊胚率(P＜0.05)；用Ionomycin處理精子30min能獲得較好的體外受精效果。關鍵詞：豬卵母細胞體外受精IAbstractAbstractThisstudyhastakenabandonedporcineovarianfromslaughterhouseastheoriginalmaterials,obtainedimmatureporcineoocytesviamechanicalextractionmethodsandutilizedtheminIVF(InVitroFertilizatio
8、n)experimentsaftertheywere
