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1、分類號：密級：UDC：學(xué)號：416523212129南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位研究生學(xué)位論文吐根堿對腎癌786-O細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制探討Effectsofemetineonproliferationandapoptosisofrenalcellcarcinoma786-Ocellsanditsmechanisms蘇宏領(lǐng)培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：孫庭教授主任醫(yī)師專業(yè)學(xué)位種類：臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)領(lǐng)域名稱：外科學(xué)（泌尿外）論文答辯日期：2015年6月答辯委員會主席：史子敏評閱人：王曉榮袁鏗2015年6月2日學(xué)
2、位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明一、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：簽字日期：年月日二、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版
3、，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)北京萬方數(shù)據(jù)股份有限公司和中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)，同意按“章程”規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：導(dǎo)師簽名（手寫）：簽字日期：年月日簽字日期：年月日論文題目姓名學(xué)號論文級別博士□碩士□院/系/所專業(yè)E_mail備注：□公開□保密（向
4、校學(xué)位辦申請獲批準(zhǔn)為“保密”，年月后公開）I摘要摘要目的：本研究觀察吐根堿（emetine）對人腎癌786-O細(xì)胞株增殖和凋亡的影響，并探討其作用機(jī)制，為吐根堿應(yīng)用于腎癌的臨床研究提供理論依據(jù)。方法：1、體外培養(yǎng)腎癌786-O細(xì)胞株，選取對數(shù)生長期細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組加入不同濃度梯度的吐根堿分別干預(yù)24h、48h及72h，并設(shè)細(xì)胞對照組（僅加培養(yǎng)基），溶媒對照組（加0.16‰DMSO）。用MTT（噻唑藍(lán)）檢測藥物對細(xì)胞增殖活性的影響。2、采用流式細(xì)胞儀檢測786-O細(xì)胞的凋亡率。3、采用RT-PCR檢測786-O細(xì)胞內(nèi)PI3K和AktmR
5、NA的相對表達(dá)量。4、采用Western-blot測定786-O細(xì)胞內(nèi)總Akt和p-Akt蛋白的相對表達(dá)量。結(jié)果：1、吐根堿對腎癌786-O細(xì)胞增殖有顯著的抑制作用，25nM以上隨藥物濃度的增大、作用時間的延長，抑制作用隨之增強(qiáng)，且呈劑量-時間依賴性(P＜0.01)。2、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的凋亡率與對照組相比明顯升高，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）,且隨吐根堿劑量的增大而升高。3、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)PI3KmRNA的表達(dá)水平與對照組相比明顯減少（P＜0.01），且隨吐根堿劑量的升高而減少。但AktmRNA的表達(dá)水平無明顯變化。差異無統(tǒng)計(jì)
6、學(xué)意義（P＞0.05）。4、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)p-Akt蛋白的表達(dá)水平與對照組相比明顯減少（P＜0.01），且隨吐根堿劑量的升高而減少。但總Akt蛋白的表達(dá)水平無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。II摘要結(jié)論：1、吐根堿在體外可以抑制腎癌786-O細(xì)胞的增殖，且呈劑量-時間依賴性。2、吐根堿在體外可以誘導(dǎo)腎癌786-O細(xì)胞凋亡。3、吐根堿可以下調(diào)PI3KmRNA和p-Akt蛋白的表達(dá)水平，但對AktmRNA和總Akt蛋白的表達(dá)水平無明顯影響。4、抑制PI3K-Akt信號通路活性，可能是吐根堿發(fā)揮抗腎癌作用的重要機(jī)制。關(guān)鍵詞：吐
7、根堿；腎癌；PI3K-Akt信號通路；增殖；凋亡IIIAbstractABSTRACTObjectives:Toinvestigatetheeffectofemetineonproliferationandapoptosisinhumanrenalcarcinoma786-0cellsandthemechanisminvolved,andtoprovideatheoreticalbasisforemetineappliedintheclinicalresearchofrenalcellcarcinoma.Methods:1.Ren
8、alcellcarcinoma786-Ocellswereculturedinvitro.Weselectedthelogarithmicgrowthphasecells.Then,experimentalgroupsweretreatedwith
