吐根堿對腎癌786-o細胞增殖、凋亡的影響及其機制探討

吐根堿對腎癌786-o細胞增殖、凋亡的影響及其機制探討

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1、分類號:密級:UDC:學號:416523212129南昌大學專業(yè)學位研究生學位論文吐根堿對腎癌786-O細胞增殖、凋亡的影響及其機制探討Effectsofemetineonproliferationandapoptosisofrenalcellcarcinoma786-Ocellsanditsmechanisms蘇宏領培養(yǎng)單位(院、系):南昌大學第一附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱:孫庭教授主任醫(yī)師專業(yè)學位種類:臨床醫(yī)學專業(yè)領域名稱:外科學(泌尿外)論文答辯日期:2015年6月答辯委員會主席:史子敏評閱人:王曉榮袁鏗2015年6月2日學

2、位論文獨創(chuàng)性聲明一、學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得南昌大學或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名(手寫):簽字日期:年月日二、學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定,同意學校有權保留并向國家有關部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版

3、,允許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權北京萬方數(shù)據(jù)股份有限公司和中國學術期刊(光盤版)電子雜志社將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表,并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務,同意按“章程”規(guī)定享受相關權益。學位論文作者簽名(手寫):導師簽名(手寫):簽字日期:年月日簽字日期:年月日論文題目姓名學號論文級別博士□碩士□院/系/所專業(yè)E_mail備注:□公開□保密(向

4、校學位辦申請獲批準為“保密”,年月后公開)I摘要摘要目的:本研究觀察吐根堿(emetine)對人腎癌786-O細胞株增殖和凋亡的影響,并探討其作用機制,為吐根堿應用于腎癌的臨床研究提供理論依據(jù)。方法:1、體外培養(yǎng)腎癌786-O細胞株,選取對數(shù)生長期細胞,實驗組加入不同濃度梯度的吐根堿分別干預24h、48h及72h,并設細胞對照組(僅加培養(yǎng)基),溶媒對照組(加0.16‰DMSO)。用MTT(噻唑藍)檢測藥物對細胞增殖活性的影響。2、采用流式細胞儀檢測786-O細胞的凋亡率。3、采用RT-PCR檢測786-O細胞內(nèi)PI3K和AktmR

5、NA的相對表達量。4、采用Western-blot測定786-O細胞內(nèi)總Akt和p-Akt蛋白的相對表達量。結(jié)果:1、吐根堿對腎癌786-O細胞增殖有顯著的抑制作用,25nM以上隨藥物濃度的增大、作用時間的延長,抑制作用隨之增強,且呈劑量-時間依賴性(P<0.01)。2、實驗組細胞的凋亡率與對照組相比明顯升高,差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01),且隨吐根堿劑量的增大而升高。3、實驗組細胞內(nèi)PI3KmRNA的表達水平與對照組相比明顯減少(P<0.01),且隨吐根堿劑量的升高而減少。但AktmRNA的表達水平無明顯變化。差異無統(tǒng)計

6、學意義(P>0.05)。4、實驗組細胞內(nèi)p-Akt蛋白的表達水平與對照組相比明顯減少(P<0.01),且隨吐根堿劑量的升高而減少。但總Akt蛋白的表達水平無明顯變化,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。II摘要結(jié)論:1、吐根堿在體外可以抑制腎癌786-O細胞的增殖,且呈劑量-時間依賴性。2、吐根堿在體外可以誘導腎癌786-O細胞凋亡。3、吐根堿可以下調(diào)PI3KmRNA和p-Akt蛋白的表達水平,但對AktmRNA和總Akt蛋白的表達水平無明顯影響。4、抑制PI3K-Akt信號通路活性,可能是吐根堿發(fā)揮抗腎癌作用的重要機制。關鍵詞:吐

7、根堿;腎癌;PI3K-Akt信號通路;增殖;凋亡IIIAbstractABSTRACTObjectives:Toinvestigatetheeffectofemetineonproliferationandapoptosisinhumanrenalcarcinoma786-0cellsandthemechanisminvolved,andtoprovideatheoreticalbasisforemetineappliedintheclinicalresearchofrenalcellcarcinoma.Methods:1.Ren

8、alcellcarcinoma786-Ocellswereculturedinvitro.Weselectedthelogarithmicgrowthphasecells.Then,experimentalgroupsweretreatedwith

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