基于卟啉的新型電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器及其核酸蛋白分析應(yīng)用研究

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1、分類號(hào)密級(jí)ＵＤＣＥ＾之乂務(wù)；類｜糸寺建’ＭＡＮＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＣＩＥＮＣＥ＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ碩去學(xué)位論文基于叩琳的新型電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器及其核酸蛋白分析應(yīng)用研究（題名和副題名）季旭波作者姓名（）指＃名鄧盛元期教授學(xué)位類別工學(xué)巧去學(xué)科名稱生統(tǒng)工研究方向生斯傳惠、孩致分折、蛋白質(zhì)分析■滄巧較如間２０１６年３月注１：注明《國(guó)際十進(jìn)分類法ＵＤＣ》的類號(hào)。碩±學(xué)位論文基于ＢＮ林的新型電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器及其核酸蜜白分析

2、應(yīng)用研究作者：季旭波指導(dǎo)教師：鄧盛元副教授南京理工大學(xué)２０１６年０３月ＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇｈｒ－ＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＮｏｖｅｌＰｏｒｉｎＢａｓｅｄｐｙＥｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔＢｉｏｓｅｎｓｏｒｓａｎｄＡｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｎＤＮＡ＆ＰｒｏｔｅｉｎＡｓｓａｙｐｐＢｙＸｕｂｏＪｉＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｅｓｓｏｒＳｈｅｎｕａｎＤｅｎｐｙｆｇｙｇＮａｎｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔ

3、ｅｃｈｎｏｌｏｊｇｙｇｙＭａｒｃｈ２０１６，聲明本學(xué)位論文是我在導(dǎo)師的指導(dǎo)下取得的研巧成果，盡我所知，在本學(xué)位論文中，除了加Ｗ標(biāo)注和致謝的部分外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或公布過(guò)的研究成果，也不包含我為獲得任何教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或?qū)W歷而使用過(guò)的一材料。與我同工作的同事對(duì)本學(xué)位論文做出的貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明。研巧生簽名；季化瓜；ｗ俾巧《日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明南京理工大學(xué)有權(quán)保存本學(xué)位論文的電子和紙質(zhì)文檔，可?。藿栝喕蛏希崳娋W(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部?jī)?nèi)容，可［＾向有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交并授權(quán)其保存。、

4、借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部?jī)?nèi)容對(duì)于保密論文，按保密的有關(guān)規(guī)定和程序處理。研究生簽名；畫(huà)加心＞乂年＾月／名日基于？碩±學(xué)位論文ｎ［啡的新型電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器及其核酸蛋白分析應(yīng)用研究摘要電致化學(xué)發(fā)光（ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅＥＣＬ技術(shù)具有較好的可控性、選擇性、重，）現(xiàn)性及較高的檢測(cè)靈敏度，主要應(yīng)用于臨床、農(nóng)業(yè)、環(huán)境和生物檢測(cè)等領(lǐng)域。核酸是遺傳信息的攜帶者，在生命發(fā)展過(guò)程中具有重要意義。核酸適配體是能夠特異性結(jié)合某些小分子或蛋白的具有特殊結(jié)構(gòu)的核酸。核酸適配體在參與構(gòu)建生物傳感體

5、系用于檢測(cè)某些特定蛋白或小分子的過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。撲晰（ｐｏｒｐｈｙｒｉｎ及金屬）化嘟恤ｅｔａｌｌｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ）因具有高度共觀的雜環(huán)結(jié)構(gòu)而具備良好的光電效應(yīng)、電子傳輸和分離能力及電致化學(xué)發(fā)光活性。本論文主要研究基于撲嘟的電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器并研究其在核酸、蛋白質(zhì)檢測(cè)方面的應(yīng)用。一１．基于＊牌超分子納米團(tuán)簇電致化學(xué)發(fā)光的種通用的ＤＮＡ傳感巧略本實(shí)驗(yàn)ＷＨ７Ｎ９病毒Ｈ７亞型的引物序列為檢測(cè)對(duì)象，用自行設(shè)計(jì)的發(fā)卡結(jié)構(gòu)ＤＮＡ持異性捕獲目標(biāo)ＤＮＡ，發(fā)卡結(jié)構(gòu)打開(kāi)后暴露的末端修飾基團(tuán)為傳感體系構(gòu)建提供可能。根據(jù)金屬

6、臥嘛可參與軸向配位的特點(diǎn)，利用富勒帰苯胺瞇嗤復(fù)合物富集ＺｎＴＰＰ合成了一－ＺｎＴＰＰ復(fù)合物種臥琳超分子納米團(tuán)簇Ｃｅｏ，并作為電致化學(xué)發(fā)光的信號(hào)分子。我們利用環(huán)糊精分子的中空桶狀結(jié)構(gòu)及其常作為物質(zhì)包絡(luò)主體的特性，將電致化學(xué)發(fā)光體組裝并固定在ｃＤＮＡ末端，構(gòu)建了基于電致化學(xué)發(fā)光的通用ＤＮＡ傳感策略。經(jīng)電致化學(xué)發(fā)光分析檢測(cè)，本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，構(gòu)建的電致化學(xué)發(fā)光生物傳感體系能夠很好地檢測(cè)到目標(biāo)ＤＮＡ，檢測(cè)下限可達(dá)ｌ．ＯｐＭ。該體系使用通用、簡(jiǎn)易的信號(hào)標(biāo)記、放大手段和ＤＮＡ檢測(cè)策略，對(duì)核酸的靈敏度髙、重現(xiàn)性好、檢測(cè)下限低、線性范圍寬、穩(wěn)定性

7、良好，具有廣闊的應(yīng)用前景。２．Ｗ洛菌巧和血紅素共觸發(fā)的適配體功能化量子點(diǎn)的特異性電致化學(xué)發(fā)光檢測(cè)平臺(tái)一本工作基于血紅素／Ｇ四鏈體復(fù)合物設(shè)計(jì)并構(gòu)建了種窩效快速的電致化學(xué)發(fā)光平臺(tái)用于檢測(cè)溶茜酶蛋白。利用吸附在殼聚糖上的納米金來(lái)固定末端為琉基的發(fā)卡結(jié)構(gòu)核酸適配體，該發(fā)卡結(jié)構(gòu)ＤＮＡ由溶菌酶適配體和Ｇ四鏈體序列組成。在血紅素和溶菌酶同時(shí)存在的情況下－，發(fā)卡結(jié)構(gòu)可打開(kāi)并生成血紅素／Ｇ四鏈體和溶菌酶適配體復(fù)合物，前者可通過(guò)消耗電致化學(xué)發(fā)光內(nèi)源性共反應(yīng)劑〇２巧滅量子點(diǎn)ＥＣＬ效應(yīng)。送種電致化學(xué)ｉ２０ｍｌ／￣ｍＡ發(fā)光檢測(cè)策略顯示出

8、了較好的線性響應(yīng)區(qū)間，且檢測(cè)范圍可達(dá)ｐｇ５帖ｌ關(guān)鍵詞：電致化學(xué)發(fā)光，生物傳愈Ｇ四鏈體，核酸適配體，撲嘛，量子點(diǎn)ＩＡ