擬南芥DnaJlike蛋白CRR1在干旱、冷和ABA脅迫應(yīng)答反應(yīng)中的作用

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1、南京大學(xué)碩士學(xué)位論文:擬南芥DnaJ.1ike蛋白CRRI在干旱、冷和ABA脅迫應(yīng)答反應(yīng)中的作用E速目錄南京大學(xué)研究生畢業(yè)論文中文摘要首頁用紙???????????????3南京大學(xué)研究生畢業(yè)論文英文摘要首頁用紙???????????????6綜述:植物對非生物脅迫的應(yīng)答調(diào)控機制????????????????81.概述?????????????????????????????82.調(diào)控產(chǎn)物在非生物脅迫應(yīng)答調(diào)控中的作用??????...??????.93.基因效應(yīng)產(chǎn)物在非生物脅迫應(yīng)答調(diào)控中的作用?????????

2、?..1l4.展望????????????????????????????..14第一章引言????????????????????????????15第二章材料與方法?????????????????????????222.1植物材料??????????????????????????222.2構(gòu)建雙元載體和轉(zhuǎn)化擬南芥??????????????????222。3DNA和RNA的提取?????????????????????..242.4Genomicwalking鑒定突變體的插入位點????????????.

3、.252.5RT-PCR和Q·PCR??????????????????????????????.252.6GUS染色??????????????????????????262。7綠色熒光蛋白(GFP)觀察???????????????????.262.8蛋白提取以及Westernbbt??????????????????.262.9基因:占片分析????????????????????????272.10酵母雙雜交實驗??????????????????????.27第三章實驗結(jié)果???????????????

4、???????????283.1環(huán)境脅迫誘導(dǎo)CRRl的表達??????????????????283.2勰RI過表達突變體增強植物的耐旱性?????????????..303.3CRRl過表達突變體增強植物的ABA耐性????????????.3l3.4C職1啟動子的組織表達特異性????????????????,.323.5CRRl的亞細胞定位?????????????????????..333.6芯片結(jié)果分析????????????????????????343.7CRRl與MYB轉(zhuǎn)錄因子的相互作用?????

5、??????????393.8CRRl的蛋白表達以及Westernblot???????????????40南京大學(xué)碩士學(xué)位論文;擬南芥DnaJ.1ike蛋白CRRI在干旱、冷和ABA脅迫應(yīng)答反應(yīng)中的作用目錄竺,?????????????I刪鼎?乾參考文獻????????????????????:一=.二._..??????一472南京大學(xué)研究生畢業(yè)論文中文搐要首頁用紙畢業(yè)論文題目:擬南芥DnaJ.1ike蛋白CRRl在干旱、洽和ABA脅迫植物學(xué)專業(yè)2QQ2級碩士生姓名:楊海燕指導(dǎo)教師:盧山教授摘要當植物受到外界

6、各種不良環(huán)境所造成的非生物脅迫時,會產(chǎn)生相應(yīng)的應(yīng)答反應(yīng),從而降低或消除這些不良因素給桓株帶來的危害。檀物的這一逆境順應(yīng)(stressacclimation)過程是多個基因相互作用共同協(xié)調(diào)的過程,許多基因的表達會發(fā)生改變,由此產(chǎn)生了一系列的從細胞到生理水平的應(yīng)答性反應(yīng)和適應(yīng)性調(diào)整,從而提高耐逆性。研究表明,參與應(yīng)答反應(yīng)的這些基因及其表達產(chǎn)物可以分為兩類:參與信號級聯(lián)放大系統(tǒng)和轉(zhuǎn)錄控制的基因及產(chǎn)物(如轉(zhuǎn)錄因子等)和直接對保護生物膜和蛋白質(zhì)起作用的基因及其產(chǎn)物(如熱激蛋白DnaJ等)。DnaJ蛋白在生物體內(nèi)具有非常重要

7、的生理功能,包括:對環(huán)境刺激的反應(yīng),避免細胞結(jié)構(gòu)的破壞:是一類重要的分子伴侶,參與蛋白質(zhì)的折疊(重塑)、轉(zhuǎn)運、分泌和降解等作用;是DnaK/Hsp70亞類的輔助因子(co.chaperone),可以調(diào)節(jié)Hsp70的三磷酸腺苷酶(ATPase)活性,使得Hsp70結(jié)合的底物多肽發(fā)生折疊。真核生物中Dna]蛋白主要由4個結(jié)構(gòu)域組成:由70個氨基酸殘基組成的N.端保守的J一結(jié)構(gòu)域:由約30個氨基酸殘墓組成的富舍甘氨酸和苯丙氨酸南京大學(xué)碩士學(xué)位論文:擬南芥Dnal-like蛋白CRRl在于旱、冷和ABA脅迫應(yīng)答反應(yīng)中的佳

8、旦皇塞塑鐾(Glycine-phenylalaninerich)的G/F結(jié)構(gòu)域;含有4個CXXCXGXG基序(moti0的富含半胱氨酸(Cysteine·richregion)l均CRR結(jié)構(gòu)域:由120-170氨基酸殘基組成的C.端低同源結(jié)構(gòu)域。研究發(fā)現(xiàn)DnaJ蛋白中富含半胱氨酸的CRR結(jié)構(gòu)域參與了很多高度保守的細胞過程,包括蛋白質(zhì)的折疊、蛋白質(zhì)復(fù)合體的組裝與分解等,而在

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