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《胚胎大鼠紋狀體區(qū)神經(jīng)干細胞的體外培養(yǎng)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、Aug.2009,Volume6,No.8(SerialNo.57)美中醫(yī)學(xué)JournalofUS-ChinaMedicalScience,ISSN1548-6648,USA胚胎大鼠紋狀體區(qū)神經(jīng)干細胞的體外培養(yǎng)王曉峰，劉建新，李拴德，張榮軍，楊興奎（解放軍第三醫(yī)院神經(jīng)外科研究所，陜西寶雞721004）摘要：目的探討胚胎大鼠紋狀體區(qū)神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)、分化和鑒定技術(shù)。方法從胚胎大鼠紋狀體區(qū)分離神經(jīng)干細胞，用無血清培養(yǎng)技術(shù)進行體外原代培養(yǎng)、傳代，加血清進行誘導(dǎo)分化。熒光免疫染色技術(shù)進行鑒定。結(jié)果從胚胎大鼠紋狀體區(qū)分離出神經(jīng)干細胞，并可分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞。結(jié)論采用該體外
2、培養(yǎng)技術(shù)分離的紋狀體區(qū)神經(jīng)干細胞可在體外大量增殖，并有多向分化潛能。關(guān)鍵詞：紋狀體；胚胎；神經(jīng)干細胞Cultivationofembryonicstriatum-neuralstemcellsfromratinvitroWANGXiao-feng,LIUJian-xin,LIShuan-de,ZHANGRong-jun,YANGXing-kuiAbstract:ObjectiveToexplorethecultivation,differentiationandindentificationofembryonicstriation-neuralstemcellsfromrat.Met
3、hodsTheadvantageofserumfreeandcloneculturingtechnologywasperformedtoisolate,cultere,passageandinduceneuralstemcellsfromembryonicratcortex,hippocampusandstriatum.Immunofluorescencewasappliedtoidentifytheneuralstemcellsandtherepotentialofdifferentiation.ResultsThecultivatedcellshadtheabilitytopro
4、liferatecontinuouslyandcultivationdifferentiatedintoneurons,astrocytesandoligodendrocytes.ConclusionThetechniqueoftheseparationofinvitroneuralstemcellsinthestriatummayproliferatealargenumberinvitroandhavemoredifferentiationpotential.Keywords:embryonic;striatum;neuralstemcells神經(jīng)干細胞（Neuralstemcel
5、l，NSC）因其具有極大的增殖潛能，并能分化為神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)1.材料與方法細胞等神經(jīng)系統(tǒng)細胞，且無產(chǎn)生畸胎瘤的危險，是1.1材料和試劑神經(jīng)系統(tǒng)細胞治療的良好移植材料。但從成體獲得15d孕齡大鼠胚胎；DMEM/F12培養(yǎng)基、表皮神經(jīng)干細胞材料來源稀少，難以識別，分化和純化，生長因子（epidermalgrowthfactor，EGF）、堿性成難以有足夠的細胞數(shù)量用于移植而限制了其臨床纖維細胞生長因子（basicfibroblastgrowthfactor，應(yīng)用。而胚胎干細胞可在體外無限擴增，易于遺傳bFGF）、青鏈雙抗、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron操作，因此，胚胎細胞是再生移植
6、供體的理想來源[1]specificenolase，NSE）抗體、膠質(zhì)纖維酸性蛋白。本研究在無血清培養(yǎng)條件下，利用特定的生長（filialfibrillaryacidicprotein，GFAP）抗體、小鼠因子，使大鼠胚胎NSC穩(wěn)定增殖傳代并可分化出抗大鼠單克隆巢蛋白（nestin）抗體購自美國Sigma神經(jīng)系統(tǒng)的三種基本細胞，為進一步探討大鼠胚胎公司；B27、胎牛血清（fetalcalfserum，F(xiàn)CS）購NSC移植的臨床研究奠定基礎(chǔ)?！咀髡吆喗椤客鯐苑澹?972-），男，解放軍第三醫(yī)院神經(jīng)外科研究所，神經(jīng)外科學(xué)碩士；研究方向：神經(jīng)外科疾病的綜合治療。19胚胎大鼠紋狀體區(qū)神經(jīng)干細
7、胞的體外培養(yǎng)自Gibco公司。在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入下列成分：20細胞大量減少，培養(yǎng)板底見許多細胞碎片，部分胞μl的EGF，10g/L或20g/L的bFGF，20mg/L的體較大、圓形、折光性較強的懸浮細胞發(fā)生分裂，B27.1％青鏈雙抗，配制成NSC無血清培養(yǎng)液。部分細胞有出芽現(xiàn)象（不對稱分裂）。3d后逐漸形1.2NSC的分離及原代培養(yǎng)及傳代成由數(shù)個細胞組成的細胞球，7d時細胞呈碎渣樣[2]參照馮力等的研究方法，取孕齡15d的大鼠死亡，存活細胞以單細胞或細胞球
