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《動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)酶》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、第三章動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)酶細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)技術(shù)即是選用各種細(xì)胞的最佳生存條件對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和研究的技術(shù)，是廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)研究領(lǐng)域的重要技術(shù)。細(xì)胞系培養(yǎng)物開(kāi)始第一次傳代培養(yǎng)后的細(xì)胞有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）連續(xù)細(xì)胞系或無(wú)限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）腫瘤細(xì)胞系或株 我國(guó)已建細(xì)胞系主要為這類細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細(xì)胞。具有不死性和異體接種致瘤性。細(xì)胞株用單細(xì)胞分離培養(yǎng)增殖形成的具特定生長(zhǎng)特性的細(xì)胞群再由原細(xì)胞株進(jìn)一步分離培養(yǎng)出與原株性狀不同的細(xì)胞群，
2、亦可稱之為亞株。原代培養(yǎng)直接從體內(nèi)取出的細(xì)胞進(jìn)行的第一次培養(yǎng)物。優(yōu)點(diǎn)：組織細(xì)胞剛脫離機(jī)體，生物性狀尚未發(fā)生較大變化，在一定程度上能夠反映體內(nèi)的狀態(tài)。大鼠肝細(xì)胞原代培養(yǎng)1.細(xì)胞種類：大鼠原代肝細(xì)胞；2.培養(yǎng)的天數(shù)：剛分離，未經(jīng)培養(yǎng)；3.細(xì)胞狀態(tài)與特征簡(jiǎn)述：剛分離時(shí)球形透亮，貼壁，后呈不規(guī)則。傳代培養(yǎng)將細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到另一個(gè)培養(yǎng)瓶即稱為傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞在生長(zhǎng)、繁殖一定時(shí)間后，由于空間不足或細(xì)胞密度過(guò)大導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)枯竭，會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此需要進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，即傳代或稱為傳代培養(yǎng)。HepG2細(xì)胞細(xì)胞種類：人肝腫瘤細(xì)
3、胞； 培養(yǎng)的天數(shù)：傳代培養(yǎng)2天； 細(xì)胞狀態(tài)與特征簡(jiǎn)述：呈多角型、不規(guī)則貼壁生長(zhǎng)，成團(tuán)聚集。細(xì)胞分離方法離心機(jī)械或酶法雜交瘤愈傷組織酶消化原生質(zhì)體動(dòng)物細(xì)胞植物細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)方法懸浮固體貼壁液體淺層微載體液體懸浮動(dòng)物細(xì)胞植物細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)目的疫苗色素激素藥物多肽藥物香精抗體酶酶皮膚等動(dòng)物細(xì)胞植物細(xì)胞第一節(jié)動(dòng)植物細(xì)胞中酶生物合成的調(diào)節(jié)動(dòng)植物細(xì)胞的基因表達(dá)和調(diào)節(jié)控制比微生物復(fù)雜得多。轉(zhuǎn)錄水平翻譯水平激素水平神經(jīng)水平…1、細(xì)胞分化改變酶的生物合成基因表達(dá)的時(shí)間性和空間性2、基因擴(kuò)增加速酶的生物合成通過(guò)增加基因的數(shù)量來(lái)調(diào)節(jié)基因表達(dá)的
4、一種方式。3、增強(qiáng)子促進(jìn)酶的生物合成高效增強(qiáng)某些酶基因的表達(dá)，具有細(xì)胞或組織特異性。4、抗原誘導(dǎo)抗體酶的生物合成抗體酶抗體的高度特異性酶的高效催化能力抗體酶或催化抗體（Catalyticantibody)是一種新型人工酶制劑，是一種具有催化功能的抗體分子，在其可變區(qū)賦予了酶的屬性。它是利用現(xiàn)代生物學(xué)與化學(xué)的理論與技術(shù)交叉研究的成果，是抗體的高度選擇性和酶的高效催化能力巧妙結(jié)合的產(chǎn)物。制備的方法主要有：修飾法和誘導(dǎo)法。誘導(dǎo)法：半抗原誘導(dǎo)法和酶蛋白誘導(dǎo)法。與微生物細(xì)胞相比，動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞具有各自不同的特性，需采用各自
5、不同的培養(yǎng)工藝。動(dòng)物細(xì)胞模式圖植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)動(dòng)物，植物和微生物細(xì)胞特性比較細(xì)胞種類植物細(xì)胞微生物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞大小/um200～3001～1010～100倍增時(shí)間/h﹥120.3-6﹥15營(yíng)養(yǎng)要求簡(jiǎn)單簡(jiǎn)單復(fù)雜光照要求大多數(shù)要求不要求不要求對(duì)剪切力敏感大多數(shù)不敏感非常敏感主要產(chǎn)物色素、藥物、香精、酶等醇、有機(jī)酸、氨基酸、抗生素、核苷酸、酶等疫苗、激素、單克隆抗體、酶等三者之間的差異主要有：植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞>微生物細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞的生產(chǎn)周期比微生物長(zhǎng)。植物細(xì)胞和微生物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)要求較簡(jiǎn)單。植物細(xì)胞的生長(zhǎng)以及次級(jí)
6、代謝物的生產(chǎn)要求一定的光照。植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞對(duì)剪切力敏感。植物、微生物和動(dòng)物細(xì)胞的主要目的產(chǎn)物各不相同。第二節(jié)植物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)酶1902年，德國(guó)植物學(xué)家G.Haberlandt就預(yù)言植物細(xì)胞培養(yǎng)的可能性。1937年前后，法國(guó)和美國(guó)科學(xué)家分別成功的進(jìn)行了胡蘿卜和煙草的組織培養(yǎng)。1966年Klein指出，能利用植物細(xì)胞培養(yǎng)物代替收集或栽培植株來(lái)生產(chǎn)生化制品。近40年來(lái)，植物細(xì)胞培養(yǎng)研究成功的例子已有不少，如用紫草懸浮培養(yǎng)物生產(chǎn)紫草寧；煙草細(xì)胞的大量培養(yǎng)等等。與微生物相比，植物細(xì)胞具有的特性細(xì)胞大，細(xì)胞壁以纖維素為主要成分
7、，耐拉不耐扭，抗剪切能力低；與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)類同，生長(zhǎng)速率慢，為防止培養(yǎng)過(guò)程中染菌，需加抗生素；細(xì)胞培養(yǎng)需氧，而培養(yǎng)液粘度大，且不能強(qiáng)力通風(fēng)攪拌；產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)且產(chǎn)量低；細(xì)胞常生長(zhǎng)成各種大小的團(tuán)塊，增加了懸浮培養(yǎng)的難度等。20世紀(jì)90年代以來(lái)，伴隨著紫杉醇的研究成功并應(yīng)用于臨床，植物細(xì)胞培養(yǎng)及其次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究進(jìn)入了新的發(fā)展時(shí)期，尤其是誘導(dǎo)子、前體飼喂、兩相法培養(yǎng)、質(zhì)體轉(zhuǎn)化、毛狀亙和冠癭瘤組織培養(yǎng)等新技術(shù)和新方法的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展，更顯示了植物細(xì)胞培養(yǎng)工程制藥的廣闊發(fā)展前景。另外，將固定化技術(shù)應(yīng)用于植物細(xì)胞培養(yǎng)中的研究對(duì)有效
8、的改善植物細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的不足有一定成效。可以認(rèn)為，固定化技術(shù)是有可能在植物細(xì)胞培養(yǎng)中得以應(yīng)用。植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中，將組織振蕩分散成游離的懸浮細(xì)胞，通過(guò)繼代培養(yǎng)使細(xì)胞增殖來(lái)獲得大量細(xì)胞群體的方法。一、植物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)酶1.植物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)（1）提高產(chǎn)率（2）縮短周期（3）易于管理，減輕勞動(dòng)強(qiáng)
