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1、第三章動植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶細胞培養(yǎng)(cellculture)技術(shù)即是選用各種細胞的最佳生存條件對活細胞進行培養(yǎng)和研究的技術(shù)，是廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)研究領(lǐng)域的重要技術(shù)。細胞系培養(yǎng)物開始第一次傳代培養(yǎng)后的細胞有限細胞系（FiniteCellLine）連續(xù)細胞系或無限細胞系（InfiniteCellLine）腫瘤細胞系或株 我國已建細胞系主要為這類細胞。腫瘤細胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細胞。具有不死性和異體接種致瘤性。細胞株用單細胞分離培養(yǎng)增殖形成的具特定生長特性的細胞群再由原細胞株進一步分離培養(yǎng)出與原株性狀不同的細胞群，
2、亦可稱之為亞株。原代培養(yǎng)直接從體內(nèi)取出的細胞進行的第一次培養(yǎng)物。優(yōu)點：組織細胞剛脫離機體，生物性狀尚未發(fā)生較大變化，在一定程度上能夠反映體內(nèi)的狀態(tài)。大鼠肝細胞原代培養(yǎng)1.細胞種類：大鼠原代肝細胞；2.培養(yǎng)的天數(shù)：剛分離，未經(jīng)培養(yǎng)；3.細胞狀態(tài)與特征簡述：剛分離時球形透亮，貼壁，后呈不規(guī)則。傳代培養(yǎng)將細胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到另一個培養(yǎng)瓶即稱為傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)的細胞在生長、繁殖一定時間后，由于空間不足或細胞密度過大導(dǎo)致營養(yǎng)枯竭，會影響細胞的生長，因此需要進行擴大培養(yǎng)，即傳代或稱為傳代培養(yǎng)。HepG2細胞細胞種類：人肝腫瘤細
3、胞； 培養(yǎng)的天數(shù)：傳代培養(yǎng)2天； 細胞狀態(tài)與特征簡述：呈多角型、不規(guī)則貼壁生長，成團聚集。細胞分離方法離心機械或酶法雜交瘤愈傷組織酶消化原生質(zhì)體動物細胞植物細胞細胞培養(yǎng)方法懸浮固體貼壁液體淺層微載體液體懸浮動物細胞植物細胞細胞培養(yǎng)目的疫苗色素激素藥物多肽藥物香精抗體酶酶皮膚等動物細胞植物細胞第一節(jié)動植物細胞中酶生物合成的調(diào)節(jié)動植物細胞的基因表達和調(diào)節(jié)控制比微生物復(fù)雜得多。轉(zhuǎn)錄水平翻譯水平激素水平神經(jīng)水平…1、細胞分化改變酶的生物合成基因表達的時間性和空間性2、基因擴增加速酶的生物合成通過增加基因的數(shù)量來調(diào)節(jié)基因表達的
4、一種方式。3、增強子促進酶的生物合成高效增強某些酶基因的表達，具有細胞或組織特異性。4、抗原誘導(dǎo)抗體酶的生物合成抗體酶抗體的高度特異性酶的高效催化能力抗體酶或催化抗體（Catalyticantibody)是一種新型人工酶制劑，是一種具有催化功能的抗體分子，在其可變區(qū)賦予了酶的屬性。它是利用現(xiàn)代生物學(xué)與化學(xué)的理論與技術(shù)交叉研究的成果，是抗體的高度選擇性和酶的高效催化能力巧妙結(jié)合的產(chǎn)物。制備的方法主要有：修飾法和誘導(dǎo)法。誘導(dǎo)法：半抗原誘導(dǎo)法和酶蛋白誘導(dǎo)法。與微生物細胞相比，動物細胞和植物細胞具有各自不同的特性，需采用各自
5、不同的培養(yǎng)工藝。動物細胞模式圖植物細胞結(jié)構(gòu)動物，植物和微生物細胞特性比較細胞種類植物細胞微生物細胞動物細胞細胞大小/um200～3001～1010～100倍增時間/h﹥120.3-6﹥15營養(yǎng)要求簡單簡單復(fù)雜光照要求大多數(shù)要求不要求不要求對剪切力敏感大多數(shù)不敏感非常敏感主要產(chǎn)物色素、藥物、香精、酶等醇、有機酸、氨基酸、抗生素、核苷酸、酶等疫苗、激素、單克隆抗體、酶等三者之間的差異主要有：植物細胞>動物細胞>微生物細胞。動物細胞、植物細胞的生產(chǎn)周期比微生物長。植物細胞和微生物細胞的營養(yǎng)要求較簡單。植物細胞的生長以及次級
6、代謝物的生產(chǎn)要求一定的光照。植物細胞和動物細胞對剪切力敏感。植物、微生物和動物細胞的主要目的產(chǎn)物各不相同。第二節(jié)植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶1902年，德國植物學(xué)家G.Haberlandt就預(yù)言植物細胞培養(yǎng)的可能性。1937年前后，法國和美國科學(xué)家分別成功的進行了胡蘿卜和煙草的組織培養(yǎng)。1966年Klein指出，能利用植物細胞培養(yǎng)物代替收集或栽培植株來生產(chǎn)生化制品。近40年來，植物細胞培養(yǎng)研究成功的例子已有不少，如用紫草懸浮培養(yǎng)物生產(chǎn)紫草寧；煙草細胞的大量培養(yǎng)等等。與微生物相比，植物細胞具有的特性細胞大，細胞壁以纖維素為主要成分
7、，耐拉不耐扭，抗剪切能力低；與動物細胞培養(yǎng)類同，生長速率慢，為防止培養(yǎng)過程中染菌，需加抗生素；細胞培養(yǎng)需氧，而培養(yǎng)液粘度大，且不能強力通風(fēng)攪拌；產(chǎn)物在細胞內(nèi)且產(chǎn)量低；細胞常生長成各種大小的團塊，增加了懸浮培養(yǎng)的難度等。20世紀(jì)90年代以來，伴隨著紫杉醇的研究成功并應(yīng)用于臨床，植物細胞培養(yǎng)及其次級代謝產(chǎn)物的研究進入了新的發(fā)展時期，尤其是誘導(dǎo)子、前體飼喂、兩相法培養(yǎng)、質(zhì)體轉(zhuǎn)化、毛狀亙和冠癭瘤組織培養(yǎng)等新技術(shù)和新方法的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展，更顯示了植物細胞培養(yǎng)工程制藥的廣闊發(fā)展前景。另外，將固定化技術(shù)應(yīng)用于植物細胞培養(yǎng)中的研究對有效
8、的改善植物細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的不足有一定成效?？梢哉J為，固定化技術(shù)是有可能在植物細胞培養(yǎng)中得以應(yīng)用。植物細胞培養(yǎng)是指在離體條件下將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中，將組織振蕩分散成游離的懸浮細胞，通過繼代培養(yǎng)使細胞增殖來獲得大量細胞群體的方法。一、植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶1.植物細胞培養(yǎng)的特點（1）提高產(chǎn)率（2）縮短周期（3）易于管理，減輕勞動強
