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1、啤酒生產(chǎn)過(guò)程中β-葡聚糖研究與測(cè)定鄭翔鵬福建省燕京惠泉啤酒股份有限公司362100摘要:研究了啤酒生產(chǎn)過(guò)程中β-葡聚糖的變化,發(fā)現(xiàn)剛果紅顯色法用于啤酒生產(chǎn)中半成品、成品的測(cè)定具有一定的可行性,同時(shí)運(yùn)用的數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)方法分析,測(cè)定的結(jié)果表明了其在整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程的變化以及與相應(yīng)影響因素的關(guān)系,起到指導(dǎo)生產(chǎn)的作用。關(guān)鍵詞:β-葡聚糖;剛果紅顯色法;啤酒前言β-葡聚糖是麥芽中非淀粉質(zhì)多糖的主要組成部分,其占麥芽干物質(zhì)的5%~8%,是通過(guò)β(1、3)、β(1、4)糖苷鍵隨機(jī)排列的線性連接而成的。麥芽中水不溶性的β-葡聚糖主要存在于完整胚乳細(xì)胞壁中,熱水可溶性β-葡聚糖,主要存在于
2、胚乳細(xì)胞之間和蛋白質(zhì)混合在一起。β-葡聚糖在水中溶解時(shí),濃度低時(shí)直接與水分子相互作用增加溶液粘度,濃度大時(shí),β-葡聚糖分子自身相互作用纏繞成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),能吸收水分子形成凝膠,使溶液的粘度大大的增加;啤酒中適量的β-葡聚糖對(duì)口味的豐滿有益,能增進(jìn)口感的柔和性。在糖化過(guò)程中,麥芽中游離的β-葡聚糖及其的分解產(chǎn)物溶于醪液中,使醪液的粘度上升;在35~50℃時(shí),通過(guò)內(nèi)-β-1、4葡聚糖酶和大麥內(nèi)-β-葡聚糖酶的作用,高分子的β-葡聚糖逐步分解為β-葡聚糖糊精和低分子物質(zhì),醪液的粘度逐之下降;在45~55℃,麥芽浸出物繼續(xù)溶解,β-葡聚糖繼續(xù)游離,此時(shí),內(nèi)-β-1、4葡聚糖酶
3、和大麥內(nèi)-β-葡聚糖酶的活力逐步減弱,β-葡聚糖分解緩慢,但研究表明,內(nèi)-β-1、4葡聚糖酶在50~55時(shí)仍具有一定的活力,可繼續(xù)分解β-葡聚糖;在60~70℃時(shí),β-葡聚糖溶解酶使大量的β-葡聚糖從其相結(jié)合的蛋白質(zhì)中分離出來(lái),在這個(gè)溫度上,溫度越高,游離出來(lái)的β-葡聚糖含量就越高,在65℃以上內(nèi)-β-1、4葡聚糖酶的活力逐漸失活;在70℃以上,由于上述各種β-葡聚糖分解酶均已逐漸失活,此時(shí)由β-葡聚糖分解酶溶解的β-葡聚糖保持不變。其中,影響β-葡聚糖分解的因素為:首要的還是大麥的品種與質(zhì)量,溶解良好的麥芽,其的高分子β-葡聚糖含量遠(yuǎn)低于溶解不良的,而含的酶量遠(yuǎn)
4、高于溶解不良的;粉粹條件也有一定影響,一般說(shuō)細(xì)粉溶解出較多的β-葡聚糖;糖化的條件的影響,低溫下料和低溫糖化,β-葡聚糖的分解較明顯,而高溫糖化對(duì)高分子β-葡聚糖難分解到滿意的程度,特別是對(duì)溶解不良的麥芽,但是,對(duì)麥汁中β-葡聚糖含量起作用的是麥芽質(zhì)量,糖化方法只能起到調(diào)節(jié)的作用,當(dāng)然了,延長(zhǎng)低溫休止時(shí)間,對(duì)β-葡聚糖的分解是有利的,PH值的影響不是很明顯。研究表明,45℃糖化時(shí)只有少數(shù)的β-葡聚糖釋放到麥汁中去,而在65℃糖化有大量的β-葡聚糖浸出到麥汁中,因此,就糖化溫度以及糖化其他物理性質(zhì)對(duì)糖化過(guò)程中β-葡聚糖的浸出比β-葡聚糖酶的影響更大,這將表明,麥汁中
5、的β-葡聚糖含量主要取決于制麥過(guò)程中胚乳細(xì)胞壁所經(jīng)受酶的水解程度。對(duì)于麥汁、發(fā)酵液以及成品酒中β-葡聚糖的檢測(cè)分析,作者根據(jù)多種分析方法研究分析實(shí)踐,如利用苯酚法等,最終確定剛果紅顯色法進(jìn)行分析研究。通過(guò)研究表明,該方法具有良好的線性,操作簡(jiǎn)單、方便,對(duì)于實(shí)際樣品的檢測(cè)有一定的指導(dǎo)生產(chǎn)的作用。本文主要基于該檢測(cè)方法上,研究整個(gè)啤酒釀造過(guò)程中β-葡聚糖的變化情況,同時(shí)根據(jù)不同品種的啤酒其β-葡聚糖的差異,表明一定的問(wèn)題。1、實(shí)驗(yàn)材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料標(biāo)準(zhǔn)β-葡聚糖(美國(guó)Sigma公司生產(chǎn))剛果紅(進(jìn)口分裝)磷酸緩沖溶液(PH=8.0)分光光度計(jì)(hp公司生產(chǎn))恒溫
6、水浴槽5PH計(jì)1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制根據(jù)要求濃度配置標(biāo)準(zhǔn)β-葡聚糖溶液,依次比色。以β-葡聚糖濃度C為橫坐標(biāo),吸光度A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,在曲線上求A為1時(shí)相當(dāng)?shù)摩?葡聚糖微克數(shù)(即為K值)。其中,每組為3個(gè)平行樣,圖1中各點(diǎn)為3個(gè)平行樣的平均值。當(dāng)A=1時(shí),代入公式求得K值為91.2μg/ml。1.2.2樣品的處理和制備麥汁:稀釋10倍;發(fā)酵液和啤酒:除氣后稀釋10倍1.2.3樣品的測(cè)定取稀釋好的樣品2.0ml分別加入4.0ml的剛果紅準(zhǔn)確計(jì)時(shí),20℃水浴中準(zhǔn)確反應(yīng)10分鐘,以2.0ml蒸餾水代替樣品作空白調(diào)零,測(cè)反應(yīng)液的吸光度A。1.2.
7、4數(shù)據(jù)計(jì)算樣品的β-葡聚糖(mg/l)=K(91.2μg/ml)×A×稀釋倍數(shù)(10倍)備注:有關(guān)實(shí)驗(yàn)方法參數(shù)選定的優(yōu)化,具體的說(shuō)明見(jiàn)有關(guān)說(shuō)明,這里略。1、結(jié)果分析2、2.1生產(chǎn)過(guò)程跟蹤選擇三個(gè)不同品種的啤酒(原麥汁濃度不同)從糖化過(guò)程到成品酒進(jìn)行跟蹤分析。其中,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所有工藝參數(shù)等均一樣,具體分析的點(diǎn)為:碘試完全后,過(guò)濾槽,煮沸終了,冷麥汁,主發(fā)酵,后發(fā)酵,清酒,成品酒,發(fā)酵過(guò)程的全程跟蹤;結(jié)果如下:表一釀造過(guò)程β-葡聚糖含量的變化分析單位:mg/l原濃%碘試完全過(guò)濾槽煮沸終了冷麥汁主發(fā)酵后發(fā)酵清酒成品酒8.090.985.378.175.168.262.
8、357.2