海南砂仁中黃酮的提取及抗氧化研究

海南砂仁中黃酮的提取及抗氧化研究

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1、砂仁中黃酮提取及其抗氧化性研究主要儀器:TU-1810紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司);KQ-500E型超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);DJZ型粉碎機。?型電子天平,電熱鼓風干燥機,烘箱。超聲??機,漏斗主要試劑:蘆丁化學對照品(中國藥品生物制品檢定所,分析純);無水乙醇(天津市德恩化學試劑有限公司,分析純);硝酸鋁(分析純);亞硝酸鈉(分析純);氫氧化鈉(分析純);蒸餾水;甲醇。黃酮提?。禾幚恚簩⑸叭嗜ず笕?、皮、整個分別用粉碎機粉碎,分別研磨稱取2g左右,分別加25ml甲醇用超聲??機攪拌1h。過濾,保存濾液,及得到三種提取液。1)標準溶液配制在電子天平準確

2、稱取16.51mg蘆丁用甲醇定容25mL的容量瓶中,得到濃度為0.6604mg/mL的蘆丁溶液。2)5%NaNO2溶液配制:用電子天平稱取5.00gNaNO2于小燒杯中移至100mL容量瓶中,定容。3)10%Al(NO3)3的溶液配制:用電子天平稱取10.00gAl(NO3)3于小燒杯中移至100mL容量瓶中,定容。4)NaOH溶液配制:用電子天平稱取21.51gNaOH于燒杯中移至500mL容量瓶中,定容。6,測定波長的選擇:取蘆丁標準溶液0.5mL,置于25mL容量瓶中,加甲醇6ml,再加5%亞硝酸鈉1ml,震蕩放置6min,加10%硝酸鋁1mi.搖勻,再放置6min,加氫氧化

3、鈉10ml,用甲醇定容至刻度,10min后,加5%亞硝酸鈉,10%硝酸鋁和氫氧化鈉的甲醇溶液為空白組,用1cm比色皿在190—600波長內掃描,確定最大吸收波長。47,標準曲線的繪制準確移取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL的0.6604mg/mL蘆丁標準溶液。分別置于25mL的容量瓶中,各加入甲醇溶液6mL。然后依次加入1mL5%的NaNO2溶液,6min后加入1mL10%的Al(NO3)3溶液,6min后加入10mlNaOH溶液,10min后用甲醇溶液定容于25ml。10min后,以相應空白溶劑為空白組已確定波長下,測定每個標準樣的吸光度值(A)。濃

4、度/(mg/mL)吸光度/A以蘆丁標準系列溶液的濃度為橫坐標,以對應的吸光度值為縱坐標,繪制出標準曲線圖,如下圖。稱取1ml仁=皮的濾液用蒸餾水定容于200ml容量瓶中,按“黃2“處理測吸光度,按標準曲線算濃度。黃酮提取率公式為:黃酮提取率=總黃酮濃度mg/ml乘以稀釋倍數(shù)乘以0.001乘以蘆丁分子質量(664.56)除以砂仁皮+仁樣品質量??寡趸匝芯?)配置試劑4DPPH溶液(2×10-4mol/L):準確稱取0.0079g(0.0020)DPPH用無水乙醇溶解并用無水乙醇定容于100mL(25ml)容量瓶中,再移入棕色試劑瓶中避光保存。4)實驗步驟①提取液配制②測出Ai:樣品

5、溶液2mL和DPPH溶液(2×10-4mol/L)2mL,室溫反應30min后,在已測最大波長處的吸光度;測出Ae:無水乙醇2mL和DPPH溶液(2×10-4mol/L)2mL,室溫反應30min后,在測?波長處的吸光度;測出Aj:樣品溶液2mL和無水乙醇2mL,反應30min后,在?nm波長處的吸光度。多測幾組。5)數(shù)據(jù)處理及結果計算測出Ai、Ae、Aj以及DPPH清除率的計算結果如下表6表6中吸光度Ai、Ae、Aj以及清除率的計算結果濃度吸光度Ae吸光度Ai吸光度AjDPPH清除率4以黃酮濃度/(ug/mL)為橫軸,DPPH清除率%為縱軸作的曲線如下圖8圖8黃酮濃度與DPPH清

6、除率的關系由上圖可以看出:隨著黃酮濃度的增加,DPPH的清除率越來越強。4

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