黎藥角花胡頹子提取物不同極性部位抗菌活性探究

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1、黎藥角花胡頹子提取物不同極性部位抗菌活性探究［摘要］目的研究角花胡頹子水提取液及石油瞇、乙酸乙酯、正丁醇各萃取部位的抑菌效果。方法采用平板法，測定角花胡頹子水提取液及各萃取部位對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白假絲酵母菌的抑菌效果。結(jié)果角花胡頹子正丁醇萃取部位對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌有較強(qiáng)的抑菌作用(抑菌率為100%)；石油瞇萃取部位對金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑菌作用(抑菌率〉90%)o結(jié)論角花胡頹子正丁醇萃取部位具有較強(qiáng)的抑菌作用。［關(guān)鍵詞］角花胡頹子；不同提取部位；抑菌作用［中圖分類號］R284.2［文獻(xiàn)標(biāo)識碼］A［文章編號］1673-72

2、10(2012)05(b)-0035-02角花胡頹子(ElaeagnusgonyanthesBenth.)為胡頹子科胡頹子屬植物，又名羊母奶子、吊中子藤，以根、葉、果入藥，主要分布于廣東、廣西、湖南、云南等地。據(jù)《全國中草藥匯編》中記載，胡頹子葉平喘止咳，其根能祛風(fēng)通絡(luò)，行氣止痛，消腫解毒，其果能收斂止瀉［1］,是海南黎族地區(qū)常用藥之一，也是著名黎藥品牌一一荔花鼻竇炎片的主藥。目前國內(nèi)外學(xué)者已對胡頹子屬植物如大葉胡頹子［2-3］.胡頹子的抗菌作用研究，而未見對角花胡頹子抗菌作用的研究報道，本實(shí)驗(yàn)通過角花胡頹子水提取液及各極性萃取部位對大腸桿

3、菌、金黃色葡萄球菌、白假絲酵母菌三種常見菌的體外抑菌實(shí)驗(yàn)，對不同極性部位進(jìn)行抑菌活性篩選，觀察其抑菌效果，明確各萃取部位抑菌率，確定角花胡頹子抑菌有效部位，為角花胡頹子提取物在抗微生物感染方面的開發(fā)和利用提供參考依據(jù)，為明確荔花鼻竇炎片治療鼻炎作用物質(zhì)基礎(chǔ)提供理論依據(jù)。1儀器與試藥1.1儀器潔凈工作臺；電熱恒溫培養(yǎng)箱；手提式壓力蒸汽滅菌器。1.2試藥角花胡頹子（采自海南省萬寧市）；吐溫80（分析純汕頭市光華化學(xué)廠）；正丁醇、乙酸乙酯和石油瞇（分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠）；營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司）；沙氏瓊脂培養(yǎng)基（上海研

4、生生物技術(shù)科技有限公司）。1.3菌種細(xì)菌：金黃色葡萄球菌（ATCC6538）,大腸桿菌（ATCC25922）；真菌：白假絲酵母菌（ATCC10231）,由海南醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)部微生物教研室提供。2方法與結(jié)果2.1供試藥液的提取萃取稱取角花胡頹子粉末50g,加入500mL蒸館水，水煎煮2次，每次2h,過濾，得濾液即角花胡頹子水提取物，水提取濃縮至一定量（置分液漏斗中）。分別以石油瞇（1:1）、乙酸乙酯（1:1）、正丁醇（1:1）反復(fù)萃取，合并各萃取物，減壓回收，干燥，稱重，得各萃取物，石油瞇萃取物0.75g,乙酸乙酯萃取物1.05g,正丁醇萃取物0

5、.83go實(shí)驗(yàn)時加2%吐溫80配制成所需濃度。將以上四個供試品滅菌備用。2.2菌液制備取菌株第3?14代的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物（18?24h）,用5mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（以下簡稱PBS）洗下菌苔，使菌懸浮均勻后用上述PBS稀釋至所需濃度。2.3抑菌試驗(yàn)依據(jù)按照《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)?GB15979-2002[4]附錄C4溶出性抗（抑）菌產(chǎn)品抑菌性能試驗(yàn)方法項進(jìn)行。2.4角花胡頹子不同提取部位的抑菌試驗(yàn)將試驗(yàn)菌24h斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，制成菌懸液，并分別取出100PL加入含5mL供試品樣液（角花胡頹子水提取液、

6、石油瞇萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液,共4個樣品）和對照品溶液（金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白假絲酵母菌）的試管內(nèi)，充分混勻，在（20±2）￡條件下，作用20min,取0.5mL樣液和對照品溶液加入含5mLPBS的試管內(nèi)，混勻并適當(dāng)稀釋，分別取0.5mL置于2個平皿，用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（真菌）（35±2）°C培養(yǎng)48h（金黃色葡萄球菌、大腸桿菌）或72h（白假絲酵母菌），作活菌菌落計數(shù)。試驗(yàn)重復(fù)3次，計算抑菌率。抑菌率計算公式：X4=（A-B）/AX100%（Cl）o其中式中：X4代表抑菌率（％）；A代表對照樣品平

7、均菌落數(shù);B代表被試樣品平均菌落數(shù)。2.5評價標(biāo)準(zhǔn)抑菌率在50%?90%,樣品有抑菌作用；抑菌率291%,樣品有較強(qiáng)抑菌作用。2.6結(jié)果角花胡頹子提取物及不同萃取部位的抑菌試驗(yàn)結(jié)果見表lo角花胡頹子提取物及不同萃取部位的抑菌率結(jié)果見表2o角花胡頹子水提液及各萃取部位除乙酸乙酯萃取物對白假絲小酵母菌無抑菌作用外，其他各部分均有一定抑菌作用，并且角花胡頹子正丁醇萃取液對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率可達(dá)100%,表現(xiàn)出極強(qiáng)的抑菌作用；角花胡頹子石油瞇萃取液對金黃色葡萄球菌抑菌率為98.61%,具有較強(qiáng)的抑菌作用；其他部位對3種常見菌均有一定抑

8、菌作用。各菌種的抑菌作用規(guī)律：①金黃色葡萄球菌：角花胡頹子正丁醇萃取液>石油瞇萃取液>乙酸乙酯萃取液>水提取液；②大腸桿菌：角花胡頹子正丁醇萃取液〉石油瞇萃取液>水提取液〉乙酸乙