黎藥角花胡頹子提取物不同極性部位抗菌活性探究

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1、黎藥角花胡頹子提取物不同極性部位抗菌活性探究[摘要]目的研究角花胡頹子水提取液及石油瞇、乙酸乙酯、正丁醇各萃取部位的抑菌效果。方法采用平板法,測(cè)定角花胡頹子水提取液及各萃取部位對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和白假絲酵母菌的抑菌效果。結(jié)果角花胡頹子正丁醇萃取部位對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌有較強(qiáng)的抑菌作用(抑菌率為100%);石油瞇萃取部位對(duì)金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑菌作用(抑菌率〉90%)o結(jié)論角花胡頹子正丁醇萃取部位具有較強(qiáng)的抑菌作用。[關(guān)鍵詞]角花胡頹子;不同提取部位;抑菌作用[中圖分類號(hào)]R284.2[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]1673-72

2、10(2012)05(b)-0035-02角花胡頹子(ElaeagnusgonyanthesBenth.)為胡頹子科胡頹子屬植物,又名羊母奶子、吊中子藤,以根、葉、果入藥,主要分布于廣東、廣西、湖南、云南等地。據(jù)《全國(guó)中草藥匯編》中記載,胡頹子葉平喘止咳,其根能祛風(fēng)通絡(luò),行氣止痛,消腫解毒,其果能收斂止瀉[1],是海南黎族地區(qū)常用藥之一,也是著名黎藥品牌一一荔花鼻竇炎片的主藥。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者已對(duì)胡頹子屬植物如大葉胡頹子[2-3].胡頹子的抗菌作用研究,而未見(jiàn)對(duì)角花胡頹子抗菌作用的研究報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)角花胡頹子水提取液及各極性萃取部位對(duì)大腸桿

3、菌、金黃色葡萄球菌、白假絲酵母菌三種常見(jiàn)菌的體外抑菌實(shí)驗(yàn),對(duì)不同極性部位進(jìn)行抑菌活性篩選,觀察其抑菌效果,明確各萃取部位抑菌率,確定角花胡頹子抑菌有效部位,為角花胡頹子提取物在抗微生物感染方面的開(kāi)發(fā)和利用提供參考依據(jù),為明確荔花鼻竇炎片治療鼻炎作用物質(zhì)基礎(chǔ)提供理論依據(jù)。1儀器與試藥1.1儀器潔凈工作臺(tái);電熱恒溫培養(yǎng)箱;手提式壓力蒸汽滅菌器。1.2試藥角花胡頹子(采自海南省萬(wàn)寧市);吐溫80(分析純汕頭市光華化學(xué)廠);正丁醇、乙酸乙酯和石油瞇(分析純,天津市大茂化學(xué)試劑廠);營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(廣東環(huán)凱微生物科技有限公司);沙氏瓊脂培養(yǎng)基(上海研

4、生生物技術(shù)科技有限公司)。1.3菌種細(xì)菌:金黃色葡萄球菌(ATCC6538),大腸桿菌(ATCC25922);真菌:白假絲酵母菌(ATCC10231),由海南醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)部微生物教研室提供。2方法與結(jié)果2.1供試藥液的提取萃取稱取角花胡頹子粉末50g,加入500mL蒸館水,水煎煮2次,每次2h,過(guò)濾,得濾液即角花胡頹子水提取物,水提取濃縮至一定量(置分液漏斗中)。分別以石油瞇(1:1)、乙酸乙酯(1:1)、正丁醇(1:1)反復(fù)萃取,合并各萃取物,減壓回收,干燥,稱重,得各萃取物,石油瞇萃取物0.75g,乙酸乙酯萃取物1.05g,正丁醇萃取物0

5、.83go實(shí)驗(yàn)時(shí)加2%吐溫80配制成所需濃度。將以上四個(gè)供試品滅菌備用。2.2菌液制備取菌株第3?14代的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物(18?24h),用5mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液(以下簡(jiǎn)稱PBS)洗下菌苔,使菌懸浮均勻后用上述PBS稀釋至所需濃度。2.3抑菌試驗(yàn)依據(jù)按照《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)?GB15979-2002[4]附錄C4溶出性抗(抑)菌產(chǎn)品抑菌性能試驗(yàn)方法項(xiàng)進(jìn)行。2.4角花胡頹子不同提取部位的抑菌試驗(yàn)將試驗(yàn)菌24h斜面培養(yǎng)物用PBS洗下,制成菌懸液,并分別取出100PL加入含5mL供試品樣液(角花胡頹子水提取液、

6、石油瞇萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液,共4個(gè)樣品)和對(duì)照品溶液(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白假絲酵母菌)的試管內(nèi),充分混勻,在(20±2)£條件下,作用20min,取0.5mL樣液和對(duì)照品溶液加入含5mLPBS的試管內(nèi),混勻并適當(dāng)稀釋,分別取0.5mL置于2個(gè)平皿,用營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙氏瓊脂培養(yǎng)基(真菌)(35±2)°C培養(yǎng)48h(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌)或72h(白假絲酵母菌),作活菌菌落計(jì)數(shù)。試驗(yàn)重復(fù)3次,計(jì)算抑菌率。抑菌率計(jì)算公式:X4=(A-B)/AX100%(Cl)o其中式中:X4代表抑菌率(%);A代表對(duì)照樣品平

7、均菌落數(shù);B代表被試樣品平均菌落數(shù)。2.5評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)抑菌率在50%?90%,樣品有抑菌作用;抑菌率291%,樣品有較強(qiáng)抑菌作用。2.6結(jié)果角花胡頹子提取物及不同萃取部位的抑菌試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表lo角花胡頹子提取物及不同萃取部位的抑菌率結(jié)果見(jiàn)表2o角花胡頹子水提液及各萃取部位除乙酸乙酯萃取物對(duì)白假絲小酵母菌無(wú)抑菌作用外,其他各部分均有一定抑菌作用,并且角花胡頹子正丁醇萃取液對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率可達(dá)100%,表現(xiàn)出極強(qiáng)的抑菌作用;角花胡頹子石油瞇萃取液對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌率為98.61%,具有較強(qiáng)的抑菌作用;其他部位對(duì)3種常見(jiàn)菌均有一定抑

8、菌作用。各菌種的抑菌作用規(guī)律:①金黃色葡萄球菌:角花胡頹子正丁醇萃取液>石油瞇萃取液>乙酸乙酯萃取液>水提取液;②大腸桿菌:角花胡頹子正丁醇萃取液〉石油瞇萃取液>水提取液〉乙酸乙

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