禽致病性大腸桿菌aroA和luxS雙缺失株的構(gòu)建及其菌蛻疫苗的制備.pdf

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2、Ｃ，－■＊＝＊‘■＊＝＊－、？、＇－Ｓ楊立罕三八？．《’－這指導(dǎo)教）－！幣，揚(yáng)；李金貴教授州大學(xué)，江蘇揚(yáng)州，２巧００９＾：＿：＿＇—上海獸于圣青研究員，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，醫(yī)研究所，上海，２００２４１４’＼、韓先干研究員．中國農(nóng)業(yè)科學(xué)隱．上海獸醫(yī)研究所．上海．２００２４１＾、若、／申諧學(xué)位級別：碩１｜＿少；臨床獸醫(yī)壬學(xué)科專１稱ｉ？＾論文提交。期：２０１６年５月論文答辯Ｕ期：２０１６年６月馬護(hù)中‘－學(xué)位授予單位；揚(yáng)；畐６＿＿．叫＾

3、？對立授予日期午巧！…—／＾答辯委員會(huì)主席：陶建平教授．Ｖ＾＾？一＾．或雜－＾－：＾接之、一＊？？＞於．＿、、二？－戶乂－火戶一＊一‘．；．．－遙＾麵＾．％一—一．．’２０化６—心－年５＇月‘＇＇？采少篇年冰琴ｆ至二心心［，巧《術(shù)、－．－Ｖ哪：歇；＾裴ｙ＇－＇去＾Ｖ．馬：人戶Ｘ；聲氣戶，．吟成禽致病性大腸桿菌和／ｗ議雙缺失株的構(gòu)建及其菌魄疫苗的制備Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄｂａｃｔｅｒｉａｌｈｏｓｔｓｄｅｖｅｌｏ

4、ｐｍｅｎｔｏｆＡｖｉａｎｇｓｃｈｅｒｃｈａｃｏａｒｏＡ－ｕｘＳｏｕｂａｔｈｏｅｎｉｃＥｉｉｌｉｌｄｌｅｅｎｅｄｅｌｅｔｉｏｎｐｇｇｍｕｔａｎｔ研究生；楊立軍導(dǎo)師：李金貴教授于圣青研究員韓先干研究員揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院２０１６年６月舍致病化大肋抒菌和／ｍｘＳ雙缺失株的構(gòu)建及其菌晚疫苗的制備Ｉ禽致病性大腸桿菌和＊雙缺失株的構(gòu)建／ｗｘＳ及其菌蟻疫苗的制備中文摘要禽大腸桿菌病是由禽致病性大腸桿菌（ＡｖｉａｎＰａｔｈｏｇｅｎｉｃＣ０化ＡＰＥ

5、Ｃ）引起的，Ｗ氣囊炎、肝周炎和也包炎為主要特征禽類急性，是養(yǎng)禽業(yè)常見的、慢性傳染病的總稱傳染病。目前該病的防控主要通過抗生素治療及疫苗免疫，但抗生素濫用導(dǎo)致的耐藥和藥殘問題，嚴(yán)重威脅養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展和公共衛(wèi)生安全，；而傳統(tǒng)疫苗由于禽大腸桿菌的血清型較多，不能對該病提供有效防控，亟需開展新型疫苗的研制ａｃｔｅｒｉａｌｈｏｓｔ，ｓ）。菌晚（ＢｇＢＧ是通過調(diào)控唆菌體裂解基因Ｅ在革蘭氏陰性菌中表達(dá)而形成無細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞器的細(xì)菌空一，殼是種關(guān)于疫苗、藥物及呈遞系統(tǒng)的新技術(shù)。與傳統(tǒng)疫苗

6、相比，菌蟻疫苗具有制備簡單、使用安全、運(yùn)輸方便等優(yōu)點(diǎn)。本研究通過構(gòu)建禽致病性大腸桿菌ＤＥ１７（０２血清型及／Ｍ說雙缺失疫苗株，并開展菌蟻疫苗的研制及免疫效果評價(jià)，Ｗ期為禽大腸桿菌病的防控提供參考。１）禽致病性大賜桿菌流行病學(xué)調(diào)查２０１５年，自江蘇、安徽、福建等省部分養(yǎng)殖場分離、鑒定１３９株大腸桿菌，其中從病禽中分離到２０株ＡＰＥＣ。血清型檢測結(jié)果表明，〇血清型（１１株）、化血清型（１４）１株和〇７８血清型（１４株）占分離菌株總數(shù)的２８％，ＡＰＥＣ總數(shù)的５０％。表明０｜、〇２、

7、〇７８血清型仍然為ＡＰＥＣ的優(yōu)勢血清型。）參照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研充所（ＣＬＳＩ制定的抗菌藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，選?。保捶N抗菌藥對分離菌株進(jìn)行耐藥性檢測，結(jié)果表明，９９％Ｗ上分離菌株對紅霉素、克林霉素和利福平耐受，１０，５７．３％的１３。此外％％的分離菌株對種Ｗ上抗生素耐受菌株對種藥物都耐受。＇對分離菌株的毒力基因檢測結(jié)果表明：／ｗｃＺ）（８２％），ｂＡ（５８．６％），ｍ（５５％）和／咕〇（４４．６％）（．（（．有較高的分布率，而ｃｒａ／ＣＴ／１９３％），化化

8、４１４．３％），ｐａｐｃ４．３％）和Ｖ如（６７／。）＇２０％。Ｗ）＞２ＰＥＣ的，奉力基因分布率均低于表明山、？、／ＭｃＺ和崎為Ａ保守基因推測其可能在ＡＰＥＣ致病過程中發(fā)揮重要作用。２）ＤＥ１７ｚｌｗ〇ｙ４和ＤＥ１７Ｚ／ＷＯ心心Ｓ的構(gòu)建及生物學(xué)特性硏究，ＤＥ１７ｗｏｙｉ（ＤＥｚｌｗ〇４ＤＥ１７／ｕＳ本研究通過同源重組技術(shù)構(gòu)建了缺失株１７ｖ）和ｘｕ揚(yáng)州大學(xué)碩去學(xué)位論義雙缺失株（ＤＥ１７Ｊｗｏ＾Ｊ／？ｘ５