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1、福建林學(xué)院學(xué)報(bào)2014，34(2)：152—157第34卷第2期JournalofFujianCollegeofForestry2014年4月葉子花花色DOD基因全長(zhǎng)cDNA克隆與序列分析柏忠良，佘文琴，潘東明，郭懷攀(1．福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福建福州350002；2．福建農(nóng)林大學(xué)園藝產(chǎn)品采后貯藏與保鮮研究所，福建福州350002)摘要：以葉子花花苞為材料，運(yùn)用RACE技術(shù)克隆出了葉子花苞片中的多巴雙加氧酶基因cDNA全長(zhǎng)，探討葉子花花色變化機(jī)理和甜菜色素代謝途徑。該序列長(zhǎng)度為1059bp，開(kāi)放閱讀框位于56—802bp之間，共
2、編碼249個(gè)氨基酸殘基。對(duì)該氨基酸序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析，結(jié)果表明該氨基酸序列具有多巴雙加氧酶保守結(jié)構(gòu)域，所組成的蛋白分子量為27．94kD，等電點(diǎn)為5．48，是穩(wěn)定蛋白。對(duì)其二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)：該序列具有8個(gè)0【螺旋、8個(gè)B轉(zhuǎn)角、20個(gè)B折疊，其序列大多是由親水性氨基酸殘基組成，不具有跨膜結(jié)構(gòu)和信號(hào)肽。對(duì)該氨基酸序列進(jìn)一步的Blast比對(duì)，發(fā)現(xiàn)組成多巴雙加氧酶的氨基酸序列因植物種類(lèi)而異，且親緣關(guān)系越遠(yuǎn)，差異越大，結(jié)合花青素與甜菜色素代謝途徑的不同和在自然界中不能共存的現(xiàn)象，表明多巴雙加氧酶基因在生成甜菜色素植物中具有獨(dú)特的保守性。
3、關(guān)鍵詞：葉子花；多巴雙加氧酶；甜菜色素；基因克隆中圖分類(lèi)號(hào)：Q781文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1001—389X(2014)02—0152—06Cloningandsequenceanalysisoffull-lengtheDNAoftheBougainvilleaspectabifisWilld．flowercolorDoDgeneBAIZhong—liang，，SHEWen—qing’，PANDong．ming'，GU0Huai．pan，(1．CollegeofHorticulture，F(xiàn)uiianAgricuhureandFo
4、restryUniversity，F(xiàn)uzhou，F(xiàn)ujian350002，China；2．InstituteofPostharvestScienceandTechnologyofHorticulturalProducts，F(xiàn)ujianagricultureandForestryUniversity，F(xiàn)uzhou，F(xiàn)ujian350002，China)Abstract：TheRNAofBougainvilleaspectabilisWilld．bractswereextracted，andthe4，5-DOPAdioxygenase
5、(DOD)genefull—lengtheDNAwasclonedbyRACEtechnique．ThefulllengthofthecDNAwas1059bp，openreadingflame(ORF)waslocatedbetweenthe56—802bp，whichencoding249aminoacidresidues．Accordingtobioinformatieanalyticalresultsoftheaminoacidsequence，therewas4，5-DOPAdioxygenaseconserveddom
6、aininthissequence，andthemolecularweightoftheproteincon—ponentwas27．94kD．Thep1was5．48，anditwasstableprotein．Thepredictionofthesecondarystructureshowedthattherewere8d—coils，8B—sheets，and20p—turnsinit．Mostoftheaminoacidresidueswerehydrophilic，yetnosignalpeptideandtransme
7、m—branestructurewasfound．Theblastresultsshowedthatasthedifferencesofthespeciesincreased，thesimilarityoftheDODwasdecreased．ItisindicatedthatDODgenewasquiteconservedinbetalainplantsbydiscoveringthephenomenonthatanthocyaninsmetabolismandbetalainmetabolismweredifferentand
8、couldnotcoexistinoneplant．Keywords：BougainvilleaspectabilisWilld．；4，5-DOPAdioxygenase；betalain；genecloning葉子花(Bougainvilleas
