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《EGCG對人乳腺癌MDA-MB-435細(xì)胞株細(xì)胞增殖的抑制及機(jī)制.pdf》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、《中國癌癥雜志》2004年第14卷第1期CHINAONCOLOGY2004Vol.14No.19EGCG對人乳腺癌MDA-MB-435細(xì)胞株細(xì)胞增殖的抑制及機(jī)制＊李鶴成,陸勁松,侯意楓,邵志敏,沈鎮(zhèn)宙(復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科,上海200032)[摘要]目的:研究綠茶提取物表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯(epigallocatechin-3gallste,EGCG)對人乳腺癌細(xì)胞株細(xì)胞周期的影響及機(jī)制。方法:利用細(xì)胞增殖測定試劑盒(CellProliferationAssaykit)來制作細(xì)胞生長曲線;流式細(xì)胞儀分析EGCG作用于人乳腺癌MDA-MB-435細(xì)胞株
2、前后細(xì)胞周期的變化;RT-PCR及Western印跡法研waf1/cip1究腫瘤細(xì)胞株加藥干預(yù)前后細(xì)胞周期抑制因子p21的mRNA及蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果:EGCG可明顯抑制乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435細(xì)胞的增殖活性,40μg/mlEGCG干預(yù)后,MDA-MB435細(xì)胞主要阻滯于G0/G1期,在24小時阻滯最為明顯。在48及72小時也有阻滯。對照組G0/G1期的比例49.92%,40μg/mlEGCG干預(yù)24、48及72小時后G0/G1期的比例分別為71.56%、67.20%和61.59%。EGCG40μg/ml處理腫瘤細(xì)胞株細(xì)胞后24小時可檢測p21mRNA和蛋白表
3、達(dá)提高。結(jié)論:綠茶有效成分可抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖,這可能與其誘導(dǎo)p21表達(dá)從而抑制細(xì)胞周期的時相轉(zhuǎn)換有關(guān),這表明綠茶可能在乳腺癌的治療上具有一定的前景。[關(guān)鍵詞]表沒食子兒茶素-3-沒食子酸;細(xì)胞周期;乳腺癌;p21;培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞+中圖分類號:R73-361文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1007-3639(2004)01-0009-03Inhibitioneffectsofepigallocatechin-3-gallste(EGCG)oncellcycleofhumanbreastcancercellsMDA-MB-435anditsmechanismLIHe-chen
4、g,LUJing-song,HOUYi-feng,etal(DepartmentofBreastSurgery,CancerHospital,FudanUniversity,Shanghai200032,China)[Abstract]Purpose:TostudytheeffectofEGCG(extractsfromgreentea)oncellcycleinhumanbreastcancercelllineanditsmechanism.Methods:Cellproliferationassaykitwasusedtoproducethedose-respon
5、securve.FlowcytometricassaywasusedtoevaluatethecellcyclechangesonMDA-MB435cellswithandwithoutEGCG.TheexpressionofproteinwasdetectedbyWesternblot.Results:EGCGcouldinhibittheproliferationofthebreastcancercellsMDA-MB-435,40waf1/cip1μg/mlEGCGinducedG0/G1phasearrestandtheentrancetoSphase.Bot
6、hmRNAandproteinlevelofp21wereupregulatedinMDA-MB435cellswhentreatedby40μg/mlEGCG.Conclusions:Greenteacaninhibitthegrowthofhumanbreastcancercells,perhapsbymeansofp21andthereforeinhibitingtheprogressionofthecellcycle.[Keywords]EGCG;cellcycle;breastcancer;p21;cuturedtumorcellsWAF1/Cip1綠茶是人
7、類最常飲用的健康飲料之一,為探討(EGCG)購自Sigma公司。P21多克隆抗體綠茶對乳腺癌細(xì)胞的作用及其可能機(jī)制,我們研究購于美國SantaCruz公司。了綠茶主要成分表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯二細(xì)胞培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB435(EGCG)對人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-435細(xì)胞的購自ATCC公司,采用DMEM培養(yǎng)基(含5%小牛增殖的影響及其與細(xì)胞周期時相及細(xì)胞周期蛋白依血清,100U/ml青霉素,100μg/ml鏈霉素),在waf1/cip1賴型激酶抑制劑p21表達(dá)的關(guān)系。37℃5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。三增殖曲線繪制利用細(xì)胞增殖測
