T∕GZCX 020-2022 刺梨及其制品中總酚含量的測(cè)定

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T/GZCX020-2022ICS67.080.10X04T/GZCX團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)T/GZCX020-2022刺梨及其制品中總酚含量的測(cè)定2022-11-22發(fā)布2022-12-01實(shí)施貴州省刺梨行業(yè)協(xié)會(huì)發(fā)布

1T/GZCX020-2022前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-202《0標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)藥集團(tuán)貴州大健康產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司提出。本標(biāo)準(zhǔn)由貴州省刺梨行業(yè)協(xié)會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：國(guó)藥集團(tuán)貴州大健康產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司、國(guó)藥集團(tuán)同濟(jì)堂（貴州）制藥有限公司、貴州初好農(nóng)業(yè)科技開(kāi)發(fā)有限公司、貴州金維寶生物技術(shù)有限公司、貴州天賜貴寶食品有限公司、貴州明安實(shí)業(yè)有限公司、中志浩刺梨產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)(貴州)有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：漆正方、孫宜春、錢(qián)品、陳杉、閆福泉、朱榮金、蔡志林、王鵬嬌、龍久鈴。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。第1頁(yè)共7頁(yè)

2T/GZCX020-2022刺梨及其制品中總酚含量的測(cè)定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了刺梨及其制品中總酚含量測(cè)定的紫外分光光度法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于刺梨鮮果、刺梨干果、刺梨果脯、刺梨凍干粉、刺梨噴干粉、刺梨原汁、刺梨濃縮汁等刺梨及其制品中總酚含量的測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)總酚的檢出限：0.6mg/100g；定量限：2.1mg/100g。2規(guī)范性引用文件本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1刺梨鮮果新鮮、未經(jīng)過(guò)加工的刺梨成熟果實(shí)。3.2刺梨干果以刺梨果實(shí)為原料，經(jīng)脫水，未經(jīng)糖漬，添加或不添加食品添加劑制成的刺梨制品。3.3刺梨果脯以刺梨果實(shí)、白砂糖或其他甜味劑為主要原料，添加或不添加1

3T/GZCX020-2022食品添加劑，經(jīng)預(yù)處理、糖漬、干燥或不干燥等工藝制成的刺梨制品。3.4刺梨凍干粉通過(guò)真空冷凍干燥方法制成的刺梨粉末制品。3.5刺梨噴干粉以刺梨果實(shí)、刺梨原汁或刺梨濃縮汁，經(jīng)噴霧干燥制成的刺梨粉末制品。3.6刺梨原汁以刺梨果實(shí)為原料，經(jīng)清洗、物理破碎、機(jī)械壓榨、過(guò)濾或不過(guò)濾、滅菌后取得的清汁或濁汁制品。3.7刺梨濃縮汁以刺梨果實(shí)為原料，經(jīng)清洗、物理破碎、機(jī)械壓榨等工藝后，再經(jīng)濃縮工藝除去一定水分后制得的制品。4方法原理在堿性條件下利用多酚的還原性，多酚可以將磷鎢酸鉬酸還原成藍(lán)色，藍(lán)色深淺與多酚含量成正相關(guān)，在760nm下測(cè)定吸光度值，外標(biāo)法定量。5試劑5.1試劑除另有規(guī)定外，僅使用分析純?cè)噭┖虶B/T6682規(guī)定的一級(jí)水。5.1.1沒(méi)食子酸（C7H6O5，CAS：149-91-7）標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥98%。5.1.2無(wú)水乙醇（C2H6O）。2

4T/GZCX020-20225.1.3碳酸鈉（Na2CO3）。5.1.4福林酚試劑（Folin-Phenol，BR，1mol/L）。5.2試劑配制5.2.1沒(méi)食子酸對(duì)照品儲(chǔ)備液（0.1mg/mL）：精密稱(chēng)取10mg（精確至0.1mg）沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品，加入少量水溶解，轉(zhuǎn)移至100mL棕色容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻，4℃避光保存。5.2.2沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)系列濃度溶液：準(zhǔn)確量取沒(méi)食子酸對(duì)照品儲(chǔ)備液（5.2.1）0.0mL、0.25mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25mL、1.5mL于25mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻，4℃保存。沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為0μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、3.0μg/mL、4.0μg/mL、5.0μg/mL、6.0μg/mL。現(xiàn)用現(xiàn)配。5.2.312%碳酸鈉溶液：稱(chēng)取無(wú)水碳酸鈉12g（精確至0.01g），加適量水溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻。5.2.480%乙醇提取劑：量取無(wú)水乙醇80mL，置100mL容量瓶中，加水溶解并定容至刻度。6儀器和設(shè)備6.1分光光度計(jì)。6.2高速破壁機(jī)。6.3超聲波提取器。6.4高速冷凍離心機(jī)：轉(zhuǎn)速10000rpm。6.5分析天平：感量0.0001g。6.6渦旋振蕩器。3

5T/GZCX020-20226.7組織搗碎機(jī)。7分析步驟7.1試樣制備將刺梨鮮果（3.1）刺梨鮮果去皮、去籽，組織搗碎機(jī)打漿，混合均勻，備用；去除刺梨果干（3.2）和刺梨果脯（3.3）中可見(jiàn)雜質(zhì)，用高速破壁機(jī)粉碎，將其制成粉狀，備用；刺梨凍干粉（3.4）和刺梨噴干粉（3.5）研磨均勻備用。7.2試樣提取7.2.1固態(tài)試樣：取7.1樣品0.5~2g，精密稱(chēng)定（精確到0.0001g），置50mL具塞離心管內(nèi)，加5mL水浸潤(rùn)樣品，加80%乙醇溶液30mL超聲處理90分鐘，超聲過(guò)程中振搖數(shù)次，保持固相完全分散。超聲結(jié)束后離心（9000rmp、4℃）5分鐘，濾過(guò)，用水洗滌沉淀物，合并洗液及濾液，加水定容至50mL容量瓶，即得。7.2.2液態(tài)試樣：刺梨原汁（3.6）、刺梨濃縮汁（3.7）等液體樣品，精密量取樣品1~10mL，置50mL具塞離心管內(nèi)，加80%乙醇溶液30mL超聲處理90分鐘。超聲結(jié)束后離心（9000rmp、4℃）5分鐘，濾過(guò)，用水洗滌沉淀物，合并洗液及濾液，加水定容至50mL容量瓶，即得。7.3標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)準(zhǔn)確量取沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)系列濃度溶液（5.2.2）1.0mL于25mL4

6T/GZCX020-2022刻度試管中，加1.0mol/LFolin-Phenol試劑1.0mL，搖勻后靜置5分鐘，再加入12%碳酸鈉溶液（5.2.3）2.0mL，加水定容至刻度線(xiàn)，30℃水浴加熱90分鐘，在760nm處測(cè)定吸光度。以25mL溶液中沒(méi)食子酸質(zhì)量（mg）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。7.4空白試驗(yàn)與試樣的測(cè)定平行進(jìn)行，取相同量的所有試劑，采用相同的分析步驟，但不添加試樣。7.5試樣的測(cè)定準(zhǔn)確量取提取液（7.2）1mL，置于25mL刻度試管中，加入1.0mol/LFolin-Phenol試劑1.0mL，再加入12%的碳酸鈉溶液（5.2.3）2.0mL，加水定容至刻度線(xiàn)，30℃水浴加熱90分鐘，在760nm處測(cè)定吸光度。若樣品多酚含量較高（吸光度不在0.1~0.8之間），可適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行分析測(cè)定。8分析結(jié)果的表述8.1刺梨鮮果、刺梨干果等固態(tài)試樣試樣中總酚含量（以沒(méi)食子酸計(jì)）以百分含量（%）表示，按公式（1）進(jìn)行計(jì)算。m?dx=?100%……………………（1）M?1000式中:x───試樣中總酚含量（以沒(méi)食子酸計(jì)）；5

7T/GZCX020-2022m───由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出的樣品中沒(méi)食子酸質(zhì)量，單位為毫克（mg）；M───試樣質(zhì)量，單位為克（g）；d───樣品稀釋倍數(shù)；計(jì)算結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后兩位。8.2刺梨原汁、刺梨濃縮汁等液態(tài)試樣樣品中總酚含量（以沒(méi)食子酸計(jì)）以百分含量（%）表示，按式（2）計(jì)算：m?dx=?100%……………………（2）v?1000式中:x───試樣中總酚含量（以沒(méi)食子酸計(jì)）；m───由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出的樣品中沒(méi)食子酸質(zhì)量，單位為毫克（mg）；v───試樣體積，單位為毫升（mL）；d───樣品稀釋倍數(shù)；計(jì)算結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后兩位。9精密度在重復(fù)條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值的10%。_______________________________6