T∕GZCX 020-2022 刺梨及其制品中總酚含量的測定

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T/GZCX020-2022ICS67.080.10X04T/GZCX團體標準T/GZCX020-2022刺梨及其制品中總酚含量的測定2022-11-22發(fā)布2022-12-01實施貴州省刺梨行業(yè)協(xié)會發(fā)布

1T/GZCX020-2022前言本標準按照GB/T1.1-202《0標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》給出的規(guī)則起草。本標準由國藥集團貴州大健康產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司提出。本標準由貴州省刺梨行業(yè)協(xié)會歸口。本標準起草單位：國藥集團貴州大健康產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司、國藥集團同濟堂（貴州）制藥有限公司、貴州初好農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司、貴州金維寶生物技術(shù)有限公司、貴州天賜貴寶食品有限公司、貴州明安實業(yè)有限公司、中志浩刺梨產(chǎn)業(yè)開發(fā)(貴州)有限公司。本標準主要起草人：漆正方、孫宜春、錢品、陳杉、閆福泉、朱榮金、蔡志林、王鵬嬌、龍久鈴。本標準為首次發(fā)布。第1頁共7頁

2T/GZCX020-2022刺梨及其制品中總酚含量的測定1范圍本標準規(guī)定了刺梨及其制品中總酚含量測定的紫外分光光度法。本標準適用于刺梨鮮果、刺梨干果、刺梨果脯、刺梨凍干粉、刺梨噴干粉、刺梨原汁、刺梨濃縮汁等刺梨及其制品中總酚含量的測定。本標準總酚的檢出限：0.6mg/100g；定量限：2.1mg/100g。2規(guī)范性引用文件本標準中引用的文件對于本標準的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標準。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1刺梨鮮果新鮮、未經(jīng)過加工的刺梨成熟果實。3.2刺梨干果以刺梨果實為原料，經(jīng)脫水，未經(jīng)糖漬，添加或不添加食品添加劑制成的刺梨制品。3.3刺梨果脯以刺梨果實、白砂糖或其他甜味劑為主要原料，添加或不添加1

3T/GZCX020-2022食品添加劑，經(jīng)預(yù)處理、糖漬、干燥或不干燥等工藝制成的刺梨制品。3.4刺梨凍干粉通過真空冷凍干燥方法制成的刺梨粉末制品。3.5刺梨噴干粉以刺梨果實、刺梨原汁或刺梨濃縮汁，經(jīng)噴霧干燥制成的刺梨粉末制品。3.6刺梨原汁以刺梨果實為原料，經(jīng)清洗、物理破碎、機械壓榨、過濾或不過濾、滅菌后取得的清汁或濁汁制品。3.7刺梨濃縮汁以刺梨果實為原料，經(jīng)清洗、物理破碎、機械壓榨等工藝后，再經(jīng)濃縮工藝除去一定水分后制得的制品。4方法原理在堿性條件下利用多酚的還原性，多酚可以將磷鎢酸鉬酸還原成藍色，藍色深淺與多酚含量成正相關(guān)，在760nm下測定吸光度值，外標法定量。5試劑5.1試劑除另有規(guī)定外，僅使用分析純試劑和GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1.1沒食子酸（C7H6O5，CAS：149-91-7）標準品：純度≥98%。5.1.2無水乙醇（C2H6O）。2

4T/GZCX020-20225.1.3碳酸鈉（Na2CO3）。5.1.4福林酚試劑（Folin-Phenol，BR，1mol/L）。5.2試劑配制5.2.1沒食子酸對照品儲備液（0.1mg/mL）：精密稱取10mg（精確至0.1mg）沒食子酸標準品，加入少量水溶解，轉(zhuǎn)移至100mL棕色容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻，4℃避光保存。5.2.2沒食子酸標準系列濃度溶液：準確量取沒食子酸對照品儲備液（5.2.1）0.0mL、0.25mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25mL、1.5mL于25mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻，4℃保存。沒食子酸標準系列濃度為0μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、3.0μg/mL、4.0μg/mL、5.0μg/mL、6.0μg/mL?，F(xiàn)用現(xiàn)配。5.2.312%碳酸鈉溶液：稱取無水碳酸鈉12g（精確至0.01g），加適量水溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻。5.2.480%乙醇提取劑：量取無水乙醇80mL，置100mL容量瓶中，加水溶解并定容至刻度。6儀器和設(shè)備6.1分光光度計。6.2高速破壁機。6.3超聲波提取器。6.4高速冷凍離心機：轉(zhuǎn)速10000rpm。6.5分析天平：感量0.0001g。6.6渦旋振蕩器。3

5T/GZCX020-20226.7組織搗碎機。7分析步驟7.1試樣制備將刺梨鮮果（3.1）刺梨鮮果去皮、去籽，組織搗碎機打漿，混合均勻，備用；去除刺梨果干（3.2）和刺梨果脯（3.3）中可見雜質(zhì)，用高速破壁機粉碎，將其制成粉狀，備用；刺梨凍干粉（3.4）和刺梨噴干粉（3.5）研磨均勻備用。7.2試樣提取7.2.1固態(tài)試樣：取7.1樣品0.5~2g，精密稱定（精確到0.0001g），置50mL具塞離心管內(nèi)，加5mL水浸潤樣品，加80%乙醇溶液30mL超聲處理90分鐘，超聲過程中振搖數(shù)次，保持固相完全分散。超聲結(jié)束后離心（9000rmp、4℃）5分鐘，濾過，用水洗滌沉淀物，合并洗液及濾液，加水定容至50mL容量瓶，即得。7.2.2液態(tài)試樣：刺梨原汁（3.6）、刺梨濃縮汁（3.7）等液體樣品，精密量取樣品1~10mL，置50mL具塞離心管內(nèi)，加80%乙醇溶液30mL超聲處理90分鐘。超聲結(jié)束后離心（9000rmp、4℃）5分鐘，濾過，用水洗滌沉淀物，合并洗液及濾液，加水定容至50mL容量瓶，即得。7.3標準工作曲線準確量取沒食子酸標準系列濃度溶液（5.2.2）1.0mL于25mL4

6T/GZCX020-2022刻度試管中，加1.0mol/LFolin-Phenol試劑1.0mL，搖勻后靜置5分鐘，再加入12%碳酸鈉溶液（5.2.3）2.0mL，加水定容至刻度線，30℃水浴加熱90分鐘，在760nm處測定吸光度。以25mL溶液中沒食子酸質(zhì)量（mg）為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。7.4空白試驗與試樣的測定平行進行，取相同量的所有試劑，采用相同的分析步驟，但不添加試樣。7.5試樣的測定準確量取提取液（7.2）1mL，置于25mL刻度試管中，加入1.0mol/LFolin-Phenol試劑1.0mL，再加入12%的碳酸鈉溶液（5.2.3）2.0mL，加水定容至刻度線，30℃水浴加熱90分鐘，在760nm處測定吸光度。若樣品多酚含量較高（吸光度不在0.1~0.8之間），可適當(dāng)稀釋后再進行分析測定。8分析結(jié)果的表述8.1刺梨鮮果、刺梨干果等固態(tài)試樣試樣中總酚含量（以沒食子酸計）以百分含量（%）表示，按公式（1）進行計算。m?dx=?100%……………………（1）M?1000式中:x───試樣中總酚含量（以沒食子酸計）；5

7T/GZCX020-2022m───由標準曲線查出的樣品中沒食子酸質(zhì)量，單位為毫克（mg）；M───試樣質(zhì)量，單位為克（g）；d───樣品稀釋倍數(shù)；計算結(jié)果保留小數(shù)點后兩位。8.2刺梨原汁、刺梨濃縮汁等液態(tài)試樣樣品中總酚含量（以沒食子酸計）以百分含量（%）表示，按式（2）計算：m?dx=?100%……………………（2）v?1000式中:x───試樣中總酚含量（以沒食子酸計）；m───由標準曲線查出的樣品中沒食子酸質(zhì)量，單位為毫克（mg）；v───試樣體積，單位為毫升（mL）；d───樣品稀釋倍數(shù)；計算結(jié)果保留小數(shù)點后兩位。9精密度在重復(fù)條件下，獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不超過算術(shù)平均值的10%。_______________________________6