豬卵丘包裹層數(shù)與豬卵母細(xì)胞質(zhì)量的相關(guān)性研究

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1、廣東畜牧獸醫(yī)科技2014年(第39卷)第5期試驗(yàn)研究·27·豬卵丘包裹層數(shù)與豬卵母細(xì)胞質(zhì)量的相關(guān)性研究周榮1，石俊松1，周秀1，羅綠花1，麥然標(biāo)1，王青來(lái)1,2，蔡更元1,2，吳珍芳1,2*（1.廣東溫氏食品集團(tuán)股份有限公司，廣東新興527439；2.國(guó)家生豬種業(yè)工程技術(shù)研究中心，廣東新興527439）摘要：為探討如何從大量的未成熟卵母細(xì)胞中挑選出合適的卵母細(xì)胞用于體外成熟培養(yǎng)，本研究根據(jù)豬卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(COCs)的顆粒細(xì)胞層數(shù)和胞質(zhì)情況,把挑選的COCs分成A、B、C3個(gè)等級(jí)；體外成熟培養(yǎng)42～44h后，所獲得的成熟卵母細(xì)胞做孤雌激活，比較孤雌胚的發(fā)育能

2、力。結(jié)果表明：A、B、C3級(jí)卵母細(xì)胞的成熟率之間沒(méi)有差異（P＞0.05），但是A級(jí)卵母細(xì)胞與B級(jí)卵母細(xì)胞的孤雌胚胎的囊胚率顯著高于C級(jí)卵母細(xì)胞（P＜0.05）。說(shuō)明卵丘細(xì)胞包裹層數(shù)不會(huì)影響卵母細(xì)胞的成熟率，但會(huì)影響其潛在的發(fā)育能力。關(guān)鍵詞：豬；卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(COCs)；卵母細(xì)胞；質(zhì)量中圖分類號(hào)：S814.8文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1005-8567(2014)05-0027-03RelevanceAnalysisbetweentheLayersofCumulusCellsandtheQualityofPorcineOocyteZhouRong1,ShiJu

3、nsong1,ZhouXiu1,LuoLvhua1,MaiRanbiao1,WangQinglai1,CaiGengyuan1,2,WuZhenfang1,2*(1.GuangdongWen'sFoodGroupCo.,Ltd,Xinxing527439,China;2.NotionalEngineeringResearchCenterforBreedingSwineIndustry,Xinxing527439,China)Abstract：Inordertochooseappropriateoocytesfromvastimmatureoocytesforinv

4、itromaturationculture,basedongranularcelllayersofpigcumulusoocytecomplexes(COCs)andthecytoplasm,theselectedCOCsisdividedintoA,B,Cgrades.Afterinvitromaturationculturefor42-44h,parthenogeneticactivationweremadetogetmaturedoocytes,thencomparetheembryosviability.Resultsshowedthattherewasn

5、odifferencebetweenoocytematurationrate(P>0.05),butAoocytesandBoocytesparthenogeneticembryoblastocystrateissignificantlyhigherthangradeCoocytes(P<0.05).Thisindicatedthatthelayersofcumuluscellsdidnotaffectthematurationrate,butwillaffectthedevelopmentoftheembryospotentialability.Keywords

6、：Pig;cumulusoocytecomplexes(COCs);oocyte;quality自1935年P(guān)incus等在體外培養(yǎng)成熟小鼠從屠宰場(chǎng)廢棄卵巢中獲取卵母細(xì)胞，已成為胚胎卵母細(xì)胞后，哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)、受工程技術(shù)研究的主要來(lái)源。但如何從眾多數(shù)量卵精逐漸成為研究卵成熟、受精及胚胎發(fā)生機(jī)制的母細(xì)胞中挑選合適的卵母細(xì)胞成為重點(diǎn)工作之重要模型[1]，并在牛、羊、豬及嚙齒類等[2]許多物一。本研究根據(jù)豬卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(COCs)種中取得了巨大的進(jìn)展。研究表明，豬的卵母細(xì)的顆粒細(xì)胞層數(shù)，通過(guò)體外成熟培養(yǎng)42～44h胞核在38h就完成了核的成熟，42h

7、左右會(huì)完后所獲得的成熟卵做孤雌激活，比較孤雌胚的發(fā)成質(zhì)的成熟[3],通常以胚胎發(fā)育能力來(lái)衡量質(zhì)的育能力，為豬的卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)和篩選提供一成熟。目前由于從體內(nèi)獲得卵母細(xì)胞數(shù)量有限，定的參考和指導(dǎo)。收稿日期：2014-06-20*：通訊作者基金項(xiàng)目：創(chuàng)建肉雞、肉豬種業(yè)國(guó)家工程技術(shù)研究中心能力建設(shè)（2012B070801006）·28·試驗(yàn)研究豬卵丘包裹層數(shù)與豬卵母細(xì)胞質(zhì)量的相關(guān)性研究—周榮，等1材料和方法1.1材料實(shí)驗(yàn)研究所用試劑未經(jīng)特殊說(shuō)明均購(gòu)自SIGMA公司。胎牛血清(GIBCO)，生理鹽水（紫光古漢集團(tuán)衡陽(yáng)制藥有限公司）；細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)耗材為Corning公司產(chǎn)

8、品；卵母細(xì)