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《安定對大鼠局灶性腦梗死半影區(qū)神經(jīng)細胞死亡的保護作用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、安定對大鼠局灶性腦梗死半影區(qū)神經(jīng)細胞死亡的保護作用摘要:目的研究安定對光化學(xué)誘發(fā)腦梗死后細胞死亡的保護作用.方法使用光化學(xué)誘發(fā)的大鼠局灶性腦缺血模型.采用原位末端標(biāo)記技術(shù)（TUNEL）檢測凋亡細胞.大鼠腦梗死術(shù)后存活3，6，12，24，48和72h，分別觀察梗死灶壞死中心面積和凋亡細胞數(shù)目.術(shù)前24h開始腹腔注射安定（10mg・kg-1・8h-1），直到處死動物.結(jié)果TUNEL陽性細胞位于壞死中心與正常皮層之間的半影區(qū).TUNEL陽性細胞的均數(shù)隨著梗死后時間的延長逐漸增多，24h達到高峰.在24h時間點，安定治療組梗死壞死中心的平均最大面積和TUNEL陽性細
2、胞均數(shù)與對照組相比，明顯減少（P<0.001）.結(jié)論安定可明顯減少成年大鼠局灶性腦梗死后的細胞壞死和凋亡.該結(jié)果可為臨床使用安定治療缺血性腦血管病提供理論依據(jù).Key;apoptosis;necrosis;cerebralischemia;cerebralinfarction Abstract:AIMTostudytheprotectiveeffectsofdiazepamagainstnervouscelldeathafterphotochemicallyinducedcere-bralischemia.METHODSFocalcerebralischemiainducedb
3、yphotothrombosisinadultratsodel.Apop-tosisinaldeoxynucleotidyltransferasemediateddUTP-biotinnickendlabeling（TUNEL）.Theareasofnecroticcoresandthenumbersofapoptoticcells（10mg・kg-1・8h-1）alsalcortex.Themeannum-berofTUENL-positivecellseincreasedfrom3，6to12handpeakedat24h.Themeanmaximuma
4、reaofthenecroticcoresandmeannumberofTUNEL-positivecellsat24h-treatedexperi-mentalgroupthaninthesaline-treatedcontrolgroup.CONCLUSIONDiazepamcansignificantlyreducebothnecrosisandapoptosisfolloiainducedbyphotothrombosisinadultrats.Thesefindingsprovideatheo-reticalinischemiccerebrovasculardiseases.
5、 0引言 近年來有研究顯示，安定具有保護腦部缺血性神經(jīng)元，防止其退行性變的作用［1，2］.我們采用大鼠光化學(xué)局灶性腦梗死模型，觀察安定對大鼠腦梗死后半影區(qū)神經(jīng)細胞凋亡的影響，旨在探索治療腦梗死的新途徑與方法. 1材料和方法 1.1材料SD雄性大鼠48只，體質(zhì)量200～250g，由第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供.其中36只大鼠按術(shù)后存活3，6，12，24，48和72h隨機分為6組，每個時間點6只;另外12只大鼠被隨機分為安定治療組和對照組，每組6只. 1.2方法 1.2.1大鼠光化學(xué)腦梗死模型動物均采用10g・L-1戊巴比妥鈉50mg・kg-1，腹腔
6、注射麻醉，俯臥位固定于腦立體定向儀上（Narishiga，日本）.常規(guī)皮膚消毒，正中矢狀切開頭皮，細心分離部分顳肌以暴露頂葉，光導(dǎo)纖維（孔徑3mm）置于前囟后3mm、矢狀縫左旁開3mm之交點處，光纖與顱骨表面距離為2mm.其下對應(yīng)于頂葉感覺皮層（parietalsensorycortex）.光照前1min內(nèi)自尾靜脈注射玫瑰紅B（10g・L-1，生理鹽水配制），劑量25mg・kg-1.光照強度12，照射時間10min，造成局部皮層缺血梗死［3］.照射過程中顱骨表面溫度為（36±1）℃，照射完畢縫合頭皮.安定治療組大鼠術(shù)前24h開始腹腔注射安定注射液，劑量10m
7、g・kg-1・8h-1，直至處死動物;對照組將安定換成等量的生理鹽水，其余同安定組. 1.2.2組織處理術(shù)后大鼠存活24h，再次麻醉，經(jīng)升主動脈用生理鹽水沖洗，40g・L-1多聚甲醛磷酸鹽緩沖液（4℃，pH7.4）灌注固定后取腦，觀察梗死灶，而后以200g・L-1蔗糖-PB于4℃浸泡直至沉底.經(jīng)恒冷箱行冠狀連續(xù)切片，片厚10μm，取每5張中的第一張，貼于多聚賴氨酸處理的切片上，尼氏染色顯
