鱉甲炮制前后對肝星狀細胞增殖影響的比較研究的論文

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1、鱉甲炮制前后對肝星狀細胞增殖影響的比較研究的論文鱉甲炮制前后對肝星狀細胞增殖影響的比較研究【關(guān)鍵詞】鱉甲;炮制前后;肝星狀細胞;mtt法【摘要】目的比較鱉甲生品和醋制品對大鼠肝星狀細胞(hsct6)增殖的影響，為鱉甲醋制品抗肝纖維化的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法傳代培養(yǎng)的hsct6與鱉甲生品和醋制品超聲提取物，鱉甲生品和醋制品回流提取物共同培養(yǎng)72h后，采用mtt比色法測定各濃度組hsct6的增殖情況。結(jié)果兩種提取方式相互驗證了鱉甲生品和醋制品對hsct6細胞增殖均有抑制作用，且鱉甲醋制品的作用優(yōu)于鱉甲生品。結(jié)論鱉甲醋制品的抗肝纖維化作用優(yōu)于鱉

2、甲生品。【關(guān)鍵詞】鱉甲;炮制前后;肝星狀細胞;mtt法parativestudyoninfluenceofpreandpostprocessedtrionyxsinensiscarapaceonhepaticstellatecellproliferation　　shijingni,huchunling,tangyinping,etal.provincialandtheministryofeducationkeylaboratoryofresourcescienceandchineseherbalpoundinchinesemedici

3、ne,hubeicollegeoftraditionalchinesemedicine，fluenceofthecrudeandprocessedtrionyxsinensiscarapaceonrathepaticstellatecellproliferation(hsct6),thustoguidetheclinicalapplicationoftrionyxsinensiscarapaceonthethetreatmentofliverfibrosis.methodssecondaryculturehsct6invitro,rattas

4、saypactsoftrionyxsinensiscarapaceextractsatdifferentconcentrationsonhsct6.resultsthecrudeandprocessedtrionyxsinensiscarapacecanbothinhibitproliferationofhsct6,andtheantiproliferationeffectsonhsct6uturallyauthenticatedbyultrasonicextractionandrefluxextraction.conclusionthe

5、processedtrionyxsinensiscarapacehasbetterfunctioninantiliverfibrosisthanthecrude.　　[keytt　　鱉甲為鱉科動物鱉(trionyxsinensisann)的背甲[1]，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，收載于歷年版《中華人民共和國藥典》，具有滋陰潛陽，軟堅散結(jié)，退熱除蒸的功效，是治療肝纖維化疾患的常用中藥。.以鱉甲配伍組方的中藥復(fù)方制劑復(fù)方鱉甲軟肝片、鱉甲抗纖方、鱉甲煎丸等均具有較好的抗肝纖維化作用[2～4]。肝纖維化是慢性肝病發(fā)展至肝硬化甚至原發(fā)性肝細胞癌的必經(jīng)階段，是各

6、種慢性肝病的共同病理學(xué)基礎(chǔ)[5]。在肝纖維化形成的過程中，肝星狀細胞(hsc)的“持久化”激活和增殖是中心環(huán)節(jié)[6];阻抑激活的hsc增殖和誘導(dǎo)促進hsc凋亡是防治肝纖維化的重要措施[7]。關(guān)于鱉甲藥材的現(xiàn)代臨床應(yīng)用，有人主張生品入藥，有人推崇醋制品，莫衷一是。因此，探討鱉甲炮制前后對hsc增殖的影響，對于指導(dǎo)鱉甲在臨床上用于治療肝纖維化疾患具有重要的現(xiàn)實意義。本實驗采用兩種提取方式，分別對鱉甲炮制前后的肝星狀細胞增殖抑制作用進行了比較研究?！　?材料與方法　　1.1材料　　1.1.1大鼠肝星狀細胞系(hsct6)浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院肝病研究所

7、提供?！　?.1.2試驗藥物及主要試劑(1)試驗藥物：鱉甲由浙江衢化醫(yī)院提供，按2005版《中國藥典》凈制(生品)和醋制(醋制品)，粉碎后過80目篩。(2)細胞培養(yǎng)試劑：胰蛋白酶(trypsin)、非必需氨基酸(neaa)、highdmem培養(yǎng)基，gibco公司產(chǎn)品;胎牛血清，武漢三利生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品;青霉素、鏈霉素，華北制藥股份公司產(chǎn)品;二氧化碳(co2)，武漢市明輝氣體科技有限公司。(3)細胞增殖用試劑：二甲基亞砜(dmso)、噻唑藍(mtt)，武漢凌飛科技有限公司?！　?.1.3儀器co2培養(yǎng)箱，日本sanyo公司產(chǎn)品;全自動酶標(biāo)儀，

8、美國biorad公司產(chǎn)品;倒置相差顯微鏡，日本olympus公司產(chǎn)品;潔凈工作臺，上海博迅醫(yī)療設(shè)備廠產(chǎn)品?！　?.2方法　　1.2.1