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《小鼠肝星狀細胞對肝臟干細胞增殖及代謝的影響-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。
1、·988·華實驗外科雜志2014年5月第31卷第5期ChinJExpSurg，May2014．Vo1．31，No．5·實驗研究·小鼠肝星狀細胞對肝臟干細胞增殖及代謝的影響常文舉宋陸軍徐興遠王洪山高曉東牛偉新秦新?！菊磕康膽眯∈蟾涡菭罴毎?HSC)與小鼠成體肝臟干細胞(AHPC)體外間接共培養(yǎng)模型，觀察HSC旁分泌途徑對AHPC增殖及代謝功能的影響。方法分別建立HSC及AHPC細胞分離及培養(yǎng)模型。進一步選擇Transwell6孑L板，建立小鼠HSC與AHPC間接共培養(yǎng)模型。存共培養(yǎng)24h和96h后，計算AHPC克隆數(shù)及克隆形成率；共培養(yǎng)14d后，
2、行5一溴脫氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)增殖實驗，計算AHPC細胞克隆內(nèi)BrdU陽性的細胞數(shù)，評估細胞增殖能力。同時，收集細胞上清液行酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測細胞代謝產(chǎn)物以評估細胞的代謝能力。通過以上方法比較HSC組和空白對照組中AHPC在克隆形成率、細胞增殖及代謝功能上的差異。結(jié)果HSC組AHPC的克隆形成率為(26．88±3．31)％，對照組為(20．11±2．34)％(P<0．05)。BrdU增殖實驗提示，對照組內(nèi)BrdU／白蛋白雙陽性細胞為(69．50±18．81)／N倍視野，較HSC組增多61．29％(P<0．01)。代謝功能方面，
3、HSC組AHPC細胞上清液中自蛋白(Albumin)和尿素(Urea)的濃度分別為(14．17±3．14)mg／(L·d)和(34．83-4-l1．41)mg／(L·d)，比對照組分別提高72．17％和66．89％(P<0．05)。結(jié)論一定數(shù)量的HSC在體外培養(yǎng)時能提高AHPC克隆形成率，促進細胞增殖分，細胞代謝功能亦相應增強?！娟P(guān)鍵詞】肝星狀細胞；肝臟干細胞；共培養(yǎng)；增殖；代謝Mousehepaticstellatecellsregulateproliferationandmetabolismofadulthepaticprogentiorceil
4、sinvitroChangWenju，SongLujun，XuXingyuan，WangHongshan，GaoXiaodong，NiuWeixin，QinXinyu．DepartmentofGeneralSurgery，ZhongshanHospital，F(xiàn)udanUniversity，Shanghai，200032，ChinaCorrespondingauthor：QinXinyu。Email：qin．xinyu@gs—hospita1．sh．cn【Abstract】0bjectiveApplingco—culturemodeltoobserve
5、theeffectofhepaticstellatecells(HSC)paracrinepathwayontheproliferationandmetabolismofadulthepaticprogentiorcell(AHPC)．MethodsEstablishingHSCandAHPCindirectso—culturemodelwithTranswellsix—holeplate．At24hand96hafterco—culture，AHPCcloneformationratewasanalyzed；14daysafterco—cultur
6、e，BrdUprolif-erationassaywasdonetoassesscellproliferationability．Inaddition，thecellsupernatantwascollectedforenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)todetectionofeel1metabolism．ResultsInHSCgroup．theclonerateofAHPCwasaveraged(26．88±3．31)％．comparedwiththecontrolgroupwas(20．11±2．34)％
7、(P<0．05)．Incontrolgroup，BrdU／Albumindoublepositiveceilswere(69．50±18．81)／FOV，andHSCgroupincreased61．29％(P<0．O1)．InHSCgroup，themetabolicconcentrationofAlbuminandUreaoftheAHPCsupernatantwere(14．17±3．14)mg／(L·d)and(34．83-4-11．41)mg／(L·d)，increasedby72．17％(P<0．01)and66．89％(P<0．05)，
8、respectively，comparedtothecontrolgroup．ConclusionAcert
