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《小鼠肝星狀細(xì)胞對肝臟干細(xì)胞增殖及代謝的影響-論文.pdf》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、·988·華實驗外科雜志2014年5月第31卷第5期ChinJExpSurg，May2014．Vo1．31，No．5·實驗研究·小鼠肝星狀細(xì)胞對肝臟干細(xì)胞增殖及代謝的影響常文舉宋陸軍徐興遠(yuǎn)王洪山高曉東牛偉新秦新?！菊磕康膽?yīng)用小鼠肝星狀細(xì)胞(HSC)與小鼠成體肝臟干細(xì)胞(AHPC)體外間接共培養(yǎng)模型，觀察HSC旁分泌途徑對AHPC增殖及代謝功能的影響。方法分別建立HSC及AHPC細(xì)胞分離及培養(yǎng)模型。進(jìn)一步選擇Transwell6孑L板，建立小鼠HSC與AHPC間接共培養(yǎng)模型。存共培養(yǎng)24h和96h后，計算AHPC克隆數(shù)及克隆形成率；共培養(yǎng)14d后，
2、行5一溴脫氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)增殖實驗，計算AHPC細(xì)胞克隆內(nèi)BrdU陽性的細(xì)胞數(shù)，評估細(xì)胞增殖能力。同時，收集細(xì)胞上清液行酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測細(xì)胞代謝產(chǎn)物以評估細(xì)胞的代謝能力。通過以上方法比較HSC組和空白對照組中AHPC在克隆形成率、細(xì)胞增殖及代謝功能上的差異。結(jié)果HSC組AHPC的克隆形成率為(26．88±3．31)％，對照組為(20．11±2．34)％(P<0．05)。BrdU增殖實驗提示，對照組內(nèi)BrdU／白蛋白雙陽性細(xì)胞為(69．50±18．81)／N倍視野，較HSC組增多61．29％(P<0．01)。代謝功能方面，
3、HSC組AHPC細(xì)胞上清液中自蛋白(Albumin)和尿素(Urea)的濃度分別為(14．17±3．14)mg／(L·d)和(34．83-4-l1．41)mg／(L·d)，比對照組分別提高72．17％和66．89％(P<0．05)。結(jié)論一定數(shù)量的HSC在體外培養(yǎng)時能提高AHPC克隆形成率，促進(jìn)細(xì)胞增殖分，細(xì)胞代謝功能亦相應(yīng)增強(qiáng)?！娟P(guān)鍵詞】肝星狀細(xì)胞；肝臟干細(xì)胞；共培養(yǎng)；增殖；代謝Mousehepaticstellatecellsregulateproliferationandmetabolismofadulthepaticprogentiorceil
4、sinvitroChangWenju，SongLujun，XuXingyuan，WangHongshan，GaoXiaodong，NiuWeixin，QinXinyu．DepartmentofGeneralSurgery，ZhongshanHospital，F(xiàn)udanUniversity，Shanghai，200032，ChinaCorrespondingauthor：QinXinyu。Email：qin．xinyu@gs—hospita1．sh．cn【Abstract】0bjectiveApplingco—culturemodeltoobserve
5、theeffectofhepaticstellatecells(HSC)paracrinepathwayontheproliferationandmetabolismofadulthepaticprogentiorcell(AHPC)．MethodsEstablishingHSCandAHPCindirectso—culturemodelwithTranswellsix—holeplate．At24hand96hafterco—culture，AHPCcloneformationratewasanalyzed；14daysafterco—cultur
6、e，BrdUprolif-erationassaywasdonetoassesscellproliferationability．Inaddition，thecellsupernatantwascollectedforenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)todetectionofeel1metabolism．ResultsInHSCgroup．theclonerateofAHPCwasaveraged(26．88±3．31)％．comparedwiththecontrolgroupwas(20．11±2．34)％
7、(P<0．05)．Incontrolgroup，BrdU／Albumindoublepositiveceilswere(69．50±18．81)／FOV，andHSCgroupincreased61．29％(P<0．O1)．InHSCgroup，themetabolicconcentrationofAlbuminandUreaoftheAHPCsupernatantwere(14．17±3．14)mg／(L·d)and(34．83-4-11．41)mg／(L·d)，increasedby72．17％(P<0．01)and66．89％(P<0．05)，
8、respectively，comparedtothecontrolgroup．ConclusionAcert
