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《泡桐花總黃酮抗哮喘豚鼠氣道炎癥的作用機制探討 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、泡桐花總黃酮抗哮喘豚鼠氣道炎癥的作用機制探討陳保紅，李寅超，趙宜紅，傅蔓華【關鍵詞】豚鼠；,,慢性氣道變應性炎癥；,,泡桐花總黃酮 摘要：目的通過豚鼠哮喘模型研究泡桐花總黃酮抗哮喘氣道變應性炎癥的作用。方法以卵蛋白（OA）致敏豚鼠為動物模型，灌胃途徑予以泡桐花總黃酮大、小劑量，觀察各組豚鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF）中白細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞（EOS）數(shù)和嗜酸性粒細胞特異性趨化因子（Eotaxin）的改變。結果泡桐花總黃酮可顯著延長致敏豚鼠的引喘潛伏期，不同程度地抑制BALF中的EOS和白細胞總數(shù)及氣道上皮Eotaxin的過度表達。結論泡桐花總黃酮對哮喘具有一定的保護作用，其中泡桐花總
2、黃酮可能通過調(diào)控Eotaxin在氣道黏膜上皮的過度表達，進而抑制Eos向哮喘氣道的募集，消除氣道炎癥，成為其發(fā)揮抗過敏性哮喘的重要環(huán)節(jié)?！ ￡P鍵詞：豚鼠；慢性氣道變應性炎癥；泡桐花總黃酮 Abstract：ObjectiveThisstudyaticmodel,inducedbyOVAinisteredbyintragastricgavage(ig)berofacidophilsandtheEotaxininbronchoalveolarlavagefluid(BALF)mationsignificantly.Thenumberofacidophilsandtotal.Conclusi
3、onTheresultssuggestthatflavonoidsinFructusPaulomationbyinhibitingtheoverexpressionoftheEotaxinintracheaepithelium. Keysl.)Hemsl;Flavonoids;Bronchiaasthma 氣道炎癥是支氣管哮喘(asthma)的病理基礎，有多種炎癥細胞、炎癥介質(zhì)和細胞因子參與其炎癥過程〔1〕。研究發(fā)現(xiàn)〔2〕嗜酸性粒細胞（EOS）趨化聚集，在氣道炎癥的形成過程中起重要作用，Eotaxin是EOS的選擇性趨化劑〔3〕，也是EOS在哮喘發(fā)病過程中選擇性增加的原因。因此，調(diào)控
4、Eotaxin的過度表達，抑制EOS在氣道內(nèi)的募集，消除氣道炎癥，對治療哮喘具有關鍵性意義。根據(jù)文獻報道〔4，5〕，少常用草藥泡桐花在支氣管哮喘的臨床治療上具有一定的效果；泡桐花浸膏能夠明顯改善哮喘豚鼠肺組織的病理損傷，對哮喘豚鼠有顯著的治療作用；泡桐花主要成分〔6〕為揮發(fā)油、總黃酮、熊果酸等，其中總黃酮含量較豐富（3.081%）。我們以泡桐花總黃酮為研究對象，采用ig給藥途徑，結合圖象分析技術探討其抗哮喘作用及其機制。 1材料與方法 1.1動物與分組健康白化豚鼠，雌雄各半，體重（200±50）g，由河南省實驗動物中心提供。隨機分為模型、陽性、空白對照組和泡桐花總黃酮大、小劑量組。1
5、0只/組?！ ?.2藥品與試劑卵白蛋白（ovalbumin，OA）：Sigma公司，GradeⅢ；Eotaxin一抗(BA1469，Rabbitanti-Eotaxin)武漢博士德生物工程有限公司，相應二抗試劑盒及陽性對照片購自北京中山生物技術有限公司；醋酸地塞米松片，浙江仙琚制藥股份有限公司，批號051247。泡桐花總黃酮由鄭州大學藥學院生藥學研究室提供?！ ?.3動物誘喘及用藥參照宮兆華〔7〕方法，常規(guī)飼養(yǎng)觀察3d無異常后，予10％OA生理鹽水(N.S)溶液200mg/kgip致敏，并于當天開始按表1劑量給藥。第15天時，予5%OA的N.S溶液霧化吸入誘導哮喘發(fā)作。用哮喘發(fā)作（動物取
6、出后的表現(xiàn)為咳嗽、呼吸困難、煩躁、抽搐、跌倒甚至死亡)的動物進行實驗。 1.4用藥過程中哮喘防治作用觀察用藥第5，12天及第15天，3次對豚鼠進行激發(fā)實驗。予5%OA的N.S溶液霧化吸入激發(fā)10s，封閉時間共20s，觀察記錄各組動物哮喘嚴重程度，取第15天的引喘潛伏期（自霧化開始至豚鼠腹肌痙攣、腹部凹陷出現(xiàn)的時間作為引喘潛伏期，超過6min者以360s計算）為統(tǒng)計指標。在第5，12天的激發(fā)過程中，先后有8只動物（大、小劑量組各2只，模型組3只，陽性組1只）因反應劇烈，搶救不及而窒息死亡。 1.5BALF（bronchoalveolarlavagfluidBALF）的采集與細胞計數(shù)暴露
7、豚鼠氣管肺，用絲線結扎右肺門處，行氣管插管灌洗左肺。灌入N.S5ml（抽吸2次）×2次，灌洗回收率大于80%，無菌離心（1500r/min×10min），沉淀細胞以Hanks液處理后即刻在顯微鏡下計數(shù)細胞總數(shù)，細胞濃度調(diào)至2×106/ml，涂片，瑞氏染色，計數(shù)白細胞總數(shù)和EOS數(shù)?！ ?.6免疫組化Eotaxin檢測摘取右肺中葉，放入乙醇、醋酸和甲醛混合固定液中固定48h。石蠟切片（4μm×3張）脫蠟至水，行免疫組化Eotaxin（
