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1、茉莉酸甲酯對(duì)丹參莖葉丹酚酸和丹酚酸B含量的影響論文【摘要】目的探討茉莉酸甲酯(methyjasmonat,MJ)對(duì)栽培丹參的藥效成分影響，并為丹參地上部分的開發(fā)利用提供一定的研究依據(jù)。方法采用比色法和HPLC法，以丹酚酸和丹酚酸B為檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)茉莉酸甲酯處理的丹參莖葉樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果丹參種苗經(jīng)茉莉酸甲酯噴施處理后的48h內(nèi)，其莖葉中丹酚酸和丹酚酸B含量均高于對(duì)照，在所測(cè)試范圍5×10-9～5×10-3的濃度中，隨濃度的升高而含量增加。結(jié)論外施茉莉酸甲酯能促進(jìn)丹參莖葉中的丹酚酸和丹酚酸B含量的積累，可以考慮在生產(chǎn)中加以應(yīng)用.freelethyljasmonate（MJ）on
2、medicinepositionofcultivarSalviamiltiorrhiza，andprovidesomereferencefortheexploitationandutilizationoftheleavesandstemsinSalviamiltiorrhiza.MethodsTheleavesandstemsofSalviamiltiorrhizaethodsofcolorimetryandHPLC.ResultsJsofSalviamiltiorrhizacanbepromotedbyMJ,andutlizationincultivatedplantin
3、gofSalviamiltiorrhizashouldbeconsidered.KeyiltiorrhizaBge.；Methyljasmonate；Salvianolicacid；SalvianolicacidB丹參SalviamiltiorrhizaBge.為唇形科植物丹參的干燥根及根莖，其有效成分包括水溶性和脂溶性兩大類。脂溶性成分主要是二萜醌類化合物（包括丹參酮、隱丹參酮等），水溶性成分主要為酚酸類化合物［包括丹參素、原兒茶醛、迷迭香酸、紫草酸、咖啡酸、丹酚酸(salvianolicacidA、B等）］。丹參的水溶性酚酸類化合物，引起了醫(yī)藥學(xué)家的極大重視，也由于丹參
4、的傳統(tǒng)應(yīng)用方式為水煎液，近些年來，對(duì)于其水溶性酚酸類化合物的研究較多［1，2］。丹酚酸B是目前研究較多的丹酚酸之一，在治療心血管疾病、慢性肝炎，抗肝纖維化、抗動(dòng)脈粥樣硬化和改善記憶功能障礙等方面發(fā)揮著重要作用［3］。最新研究表明，丹參葉中的酚酸類含量與根中相似，有些甚至高于根部［4，5］。茉莉酸甲酯（MJ）是植物響應(yīng)病原物、害蟲等多種環(huán)境脅迫的共同信號(hào)分子，廣泛存在于高等植物體內(nèi)，并作為新型的植物激素，在調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育、光合作用、抗逆反應(yīng)等方面起著重要的作用，外施到植物體可以達(dá)到一定的逆境脅迫和調(diào)節(jié)效應(yīng)［6，7］。有報(bào)道外源性MJ類化合物能有效刺激植物次生代謝物的生物合成
5、，可引起多種植物次生產(chǎn)物的迅速積累［8］。目前有利用MJ研究誘導(dǎo)丹參毛狀根中的有效成分的積累的報(bào)道［8］，本研究旨在利用MJ作為誘導(dǎo)子,在丹參的生產(chǎn)中進(jìn)行田間噴施實(shí)驗(yàn)，探索MJ對(duì)丹酚酸B的調(diào)控機(jī)制,以及MJ在丹參生產(chǎn)中的應(yīng)用及丹參地上部分的進(jìn)一步合理開發(fā)提供研究依據(jù)。1材料供試材料為丹參SalviamiltiorrhizaBge種苗,購(gòu)于山東菏澤丹參種植基地，茉莉酸甲酯（MJ）為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)地位于廣東藥學(xué)院大學(xué)城校區(qū)藥用植物實(shí)驗(yàn)園。2方法2.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及處理實(shí)驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理：（Ⅰ）對(duì)照（丹參噴清水）；（Ⅱ）噴施MJ5×10-9mol/L；（Ⅲ）噴施MJ5×10
6、-7mol/L；（Ⅳ）噴施MJ5×10-5mol/L；（Ⅴ）噴施MJ5×10-3mol/L。小區(qū)面積1m2，4次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。MJ和清水均在出齊三片復(fù)葉時(shí)噴施，將配好的各種濃度的MJ溶液用噴壺均勻地噴到對(duì)應(yīng)各組葉片上，以噴滿全部葉片為度，噴后立即套上保鮮袋。噴施后48h取樣，取每株苗的全部小葉片，將葉置60℃烘干箱烘6h，取出粉碎，過50目篩后用棕色廣口瓶保存。2.2丹參總酚酸含量測(cè)定2.2.1原兒茶醛標(biāo)準(zhǔn)曲線制定精密稱取原兒茶醛8.50mg，加水溶解并定容至20ml（425μg/ml)，作為對(duì)照品溶液。分別精密吸取原兒茶醛對(duì)照品液0.4，0.8，1.2，1.6，
7、2.0ml加水至2ml，分別加0.5%NaNO25.0ml放置5min，加入10%Al(NO3)30.5ml，放置5min，加入1mol/LNaOH液5.0ml，放置10min后，以顯色劑為空白，在500nm處測(cè)得吸光值。以濃度X為橫坐標(biāo)，吸光值Y為縱坐標(biāo)，方程為Y=0.0014X+0.0004，r=0.9991，線性范圍為26～130μg/ml。2.2.2總酚酸的測(cè)定精密稱取樣品粉末0.2g，置50ml容量瓶中，加2%鹽酸水溶液約12ml，浸泡15h，加酸水補(bǔ)足量，振搖10min，經(jīng)干燥濾紙過濾，棄去初濾液，精密
