牛膝提取物神經(jīng)再生素促小鼠坐骨神經(jīng)再生的實驗研究論文

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1、牛膝提取物神經(jīng)再生素促小鼠坐骨神經(jīng)再生的實驗研究論文【摘要】目的觀察中藥牛膝提取物神經(jīng)再生素(NRF)對小鼠損傷坐骨神經(jīng)的修復作用。方法ICR小鼠50只，雌雄各半，行坐骨神經(jīng)夾傷術(shù)，隨機分成5組：NRF高、中、低劑量組，彌可保組（陽性對照），生理鹽水組（空白對照）。術(shù)后每日腹腔注射給藥。采用小鼠坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(sciaticfunctionindex,SFI)、組織形態(tài)學及電鏡檢查，觀察NRF對損傷坐骨神經(jīng)的影響。結(jié)果與空白對照組相比，NRF可顯著改善小鼠的坐骨神經(jīng)功能。超微結(jié)構(gòu)觀察表明.freelAchyranthesbidentata

2、Blume(BL)onthecrushedsciaticnerveofmouse.MethodsFiftyICRmicesufferedfromthesciaticnervescrushent.Theanimalslydividedintofivegroups:threeNRFgroups(loiddleandhighdose),Mecobalamingroup(positivecontrol)andblankcontrolgroup.ThesemiceaftersciaticnervescrushreceivedNRFbyintraper

3、itonealinjectioneveryday.Sciaticfunctionindex(SFI)orphologyandultra-structureiusmuscleberofregenerationnervefibers,thickanddegreeofmaturityofregenerationmyelinatednervesheathinNRFgroupsorethanthoseintheblankcontrolgroup.ConclusionNRFcanpromotetheregenerationofperipheralner

4、veandimprovetherecoveryoffunction.Keye(BL)；Nerveregenerationfactor；Sciaticnerveinjury；Nerveregeneration神經(jīng)再生素（nerveregenerationfactor,NRF）是從中藥懷牛膝中提取的有效組分（中國專利申請?zhí)?200710019780.4），主要成分為甾酮、多糖、多肽等。已有的研究資料顯示，神經(jīng)再生素具有促進神經(jīng)元生長、防止神經(jīng)元凋亡的作用［1～6］。本實驗采用小鼠坐骨神經(jīng)損傷模型，觀察NRF對周圍神經(jīng)損傷的修復作用，進一步探討其

5、藥理作用。1材料與方法1.1動物和試劑健康成年ICR小鼠50只(由南通大學動物中心提供)，體重（20±2）g，雌雄各半，隨機分成5組。NRF由南通大學神經(jīng)再生重點實驗室提供（批號：060213），注射用生理鹽水溶解至適當濃度備用。彌可保注射液：日本衛(wèi)材株式會社制造（批號：050665）。1.2模型制備復合麻醉劑（0.03ml/10g）作腹腔麻醉，左臀部作1cm切口，在距梨狀肌下緣0.3cm處以特制鉗子，鉗夾坐骨神經(jīng)3次，10s/次，間隙10s，擠壓損傷的寬度為2mm。損傷遠端以8-0顯微縫線在神經(jīng)外膜上作標記，縫合切口。術(shù)后每天腹腔注射給藥

6、：NRF高、中、低劑量組（0.16，0.08，0.04mg/10g體重），彌可保組（1.3μg/10g體重，按體表面積折算相當于臨床人推薦劑量），空白對照組（給予等體積生理鹽水）。1.3一般情況觀察術(shù)后每天觀察小鼠傷口愈合情況、步態(tài)變化及整體狀態(tài)。1.4坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(sciaticnerveindex,SFI)測定術(shù)后8，12，16，20d分別行足跡實驗。小鼠雙側(cè)后足蘸紅色印泥行走后每側(cè)足留下8～10個足印，測量足印長度（printlength,PL）、足趾寬度（toespread,TS）、中間足趾寬度（intermediarytoes

7、pread,IT），將上述3個變量代入Bain公式計算出坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（sciaticfunctionindex,SFI）：SFI=-38.3（EPL-NPL）/NPL+109.5（ETS-NTS）/NTS+13.3（EIT-NIT）/NIT-8.8。公式中各變量前E代表術(shù)側(cè)，N代表健側(cè)。SFI以0為正常值，-100為神經(jīng)完全斷離的指標［7］。1.5腓腸肌肌細胞截面積測量術(shù)后21d，各組小鼠經(jīng)生理鹽水和4%多聚甲醛灌注內(nèi)固定，取術(shù)側(cè)腓腸肌標本，浸入4%多聚甲醛后固定。流水沖洗24h，梯度酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋切片，厚度為5μm，常

8、規(guī)HE染色。40×顯微鏡下觀察橫切片，隨機選取6個高倍視野，每個視野計數(shù)30個肌細胞，利用LeicaQm，戊二醛固定，Epon812環(huán)氧樹脂包埋，半薄切片定位，超?。?nm）切片