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《番荔枝內(nèi)酯對(duì)人淋巴瘤raji細(xì)胞體外增殖和凋亡的影響論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、番荔枝內(nèi)酯對(duì)人淋巴瘤Raji細(xì)胞體外增殖和凋亡的影響論文.freelL分級(jí)作用于細(xì)胞。采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,免疫組化染色檢測(cè)各組細(xì)胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的表達(dá)情況。結(jié)果番荔枝內(nèi)酯組細(xì)胞增殖率均低于未干預(yù)組,25、50μg/mL藥物濃度組細(xì)胞增殖率低于阿霉素組,增殖率與濃度及培育時(shí)間負(fù)相關(guān)；番荔枝內(nèi)酯組細(xì)胞凋亡率高于未干預(yù)組,25、50μg/mL藥物濃度組凋亡率高于阿霉素組,和濃度、時(shí)間正相關(guān)；與未干預(yù)組相比,番荔枝內(nèi)酯組caspas
2、e-9表達(dá)量逐步增加,與阿霉素組比較,6.25μg/mL組caspase-9表達(dá)低于阿霉素組(P＜0.05),50μg/mL濃度組表達(dá)高于阿霉素組(P＜0.05)。結(jié)論番荔枝內(nèi)酯對(duì)體外人淋巴瘤Raji細(xì)胞的增殖有抑制作用,并可能通過(guò)線粒體途徑促進(jìn)其凋亡?！娟P(guān)鍵詞】番荔枝內(nèi)酯；抗腫瘤；凋亡；增殖；caspase-9；Raji細(xì)胞Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofannonaceousacetogeninonproliferationandapoptos
3、isinRajicellsanditsmechanism.MethodsRajicellsculturedinvitroycingroup.RajicellsLannonaceousacetogenin.ProliferationofRajicellsetry.Caspase-9proteinmunohistochemistry.ResultsTheRajicellproliferationrateofannonaceousacetogenindecreasedparedLgroupycingroup
4、,andite.TheapoptosisrateLgroupycingroup,andite.Theexpressionofcaspase-9proteinofannonaceousacetogeningroupe.ConclusionsAnnonaceousacetogenincouldinhibitcellproliferationinadose-dependentandtime-dependentmannerinRajicells,anditmayinduceRajicellsapoptosis
5、byup-regulatingcaspase-9expression.Keyor；apoptosis；proliferation；caspase-9；Rajicell番荔枝(AnnonasquamosaLinn.)為番荔枝科番荔枝屬植物,我國(guó)廣東、廣西、海南、福建、云南等省及臺(tái)灣地區(qū)均有栽培,東南亞、南美國(guó)家及地區(qū)也有廣泛分布。番荔枝內(nèi)酯(annonaceousacetogenins)分布在番荔枝科多種植物的根、樹(shù)皮、種子、葉以及果實(shí)中。研究表明番荔枝內(nèi)酯是一類很有希望的新抗癌藥物。筆者研究番荔枝內(nèi)酯
6、在淋巴瘤治療中的應(yīng)用,現(xiàn)將體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。1實(shí)驗(yàn)材料1.1藥物番荔枝內(nèi)酯類化合物：為本研究組參照DosSantos等1方法從番荔枝種子中提取分離所得,為白色蠟狀粉末。使用前以少許無(wú)水乙醇溶解,加生理鹽水配制成所需濃度,乙醇終濃度不超過(guò)1%；鹽酸阿霉素為意大利法瑪西亞公司產(chǎn)品。1.2主要試劑四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT,美國(guó)Sigma公司),AnnexinV-FITC凋亡檢測(cè)試劑盒(南京凱基生物公司),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)免疫組化試劑盒(深圳晶美生物工程有限公司)。1.3瘤株
7、人Burkitt’s淋巴瘤細(xì)胞系Raji細(xì)胞購(gòu)自華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院免疫教研室,并由本院實(shí)驗(yàn)室傳代保存。2實(shí)驗(yàn)方法2.1分組番荔枝內(nèi)酯組：細(xì)胞培養(yǎng)基中加入生理鹽水溶解的番荔枝內(nèi)酯,實(shí)驗(yàn)終濃度分別為6.25、12.5、25、50μg/mL；未干預(yù)組：細(xì)胞培養(yǎng)基中加入與實(shí)驗(yàn)組等體積的生理鹽水；阿霉素組：細(xì)胞培養(yǎng)基中加入生理鹽水溶解的阿霉素,終濃度為0.1μg/mL。2.2MTT比色試驗(yàn)取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Raji細(xì)胞1×105/mL,接種于96孔培養(yǎng)板,分別加入不同濃度番荔枝內(nèi)酯以及阿霉素各10μL,孵育
8、24、48、72h。孵育結(jié)束前4h,各培養(yǎng)孔加入MTT(5mg/mL)10μL,離心,棄上清,加入10%二甲基亞砜震蕩溶解結(jié)晶,上酶標(biāo)儀于波長(zhǎng)λ＝492nm處測(cè)吸光度(OD)值。通過(guò)OD值計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率。流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞凋亡率。細(xì)胞增殖抑制率(%)＝(未干預(yù)組OD均值－實(shí)驗(yàn)組OD均值)/未干預(yù)組OD均值×100%。2.3實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照AnnexinV-FITC凋亡檢測(cè)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。每份樣品檢測(cè)105個(gè)細(xì)胞,雙參數(shù)結(jié)果以二維散點(diǎn)圖顯示,數(shù)據(jù)由FC
