黃芪多部位組合對化學(xué)性及免疫性肝損傷小鼠的保護作用論文

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1、黃芪多部位組合對化學(xué)性及免疫性肝損傷小鼠的保護作用論文.freelg/kg)明顯降低D-GalN小鼠升高的肝臟指數(shù)、血清ALT水平及肝勻漿MDA的含量；恢復(fù)刀豆蛋白A(ConA)誘導(dǎo)的免疫性肝損傷小鼠脾淋巴細胞增殖反應(yīng),抑制其腹腔巨噬細胞TNF-α、IL-1的產(chǎn)生；同時還能降低其血清ALT和AST水平。結(jié)論黃芪多部位組合對化學(xué)性及免疫性肝損傷小鼠均有明顯的保護作用?！娟P(guān)鍵詞】黃芪肝損傷小鼠Abstract：ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectsofpoundAstraga

2、lusExtract(CAE)onliverinjuryinmice.MethodsTheacuteliverinjurymodelsine(D-GalN,800mg/kg,ip)andBacillusCalmetteGuerin(BCG,1×107/0.2mL,iv)plusLipopolysaccharide(LPS7.5μg/0.2mL,iv)inmice.ALT,AST,MDAcontentinliverhomogenateetry.IL-1activityandConA-inducedsplenocytes

3、proliferationinedbyassayofcytotoxicityagainstL929cell.ResultsCAE(60,120,240mg/kg)couldobviouslyloandMDAcontentinliverhomogenateinD-GalNmiceandintheimmunologicalliverinjurymice.ItalsodecreasedALT,ASTlevelinserum,.freelmatoryfactorsTNF,IL-1secretedbyPMφs.Conclusi

4、onCAEshoicalandimmunologicalliverinjuryinmice.Keyice黃芪始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,具有補氣升陽、固表止汗等功效1?，F(xiàn)代臨床研究認為,黃芪粗制劑對慢性肝炎均有較好的療效,使大鼠肝纖維化程度明顯減輕2。我們多年的研究還發(fā)現(xiàn),黃芪總苷有抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、誘導(dǎo)肝癌細胞凋亡以及抗肝纖維化等作用3-6。由此,根據(jù)臨床經(jīng)驗并結(jié)合中醫(yī)理論,提取與分離了黃芪有效部位群(黃芪多糖、皂苷、酮及酚),再依據(jù)體外正交實驗結(jié)果首次組成黃芪多部位組合(poundastragalusextrac

5、t,CAE)。本實驗進一步對其抗小鼠肝損傷進行研究。1實驗材料1.1動物與細胞株昆明種小鼠,雄性,6～8周,體重(18±2)g；C57BL/6J小鼠,雄性,6～8周,體重(20±2)g；均購于安徽醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心(合格證號：皖醫(yī)實動準字01號)。小鼠成纖維細胞瘤(L929)細胞株：南京軍事醫(yī)學(xué)研究所朱敏生教授惠贈。1.2藥物與試劑CAE,合肥恒星醫(yī)藥研究所提供,批號20030508；研缽碾為細粉,0.5%羧甲基纖維素鈉溶液(CMC-Na)混懸。護肝片,黑龍江五?？ㄋ帢I(yè)有限公司產(chǎn)品,批號20041016；卡介苗(

6、BCG),上海生物制品有限公司產(chǎn)品,用前以滅菌生理鹽水配成所需濃度；D-氨基半乳糖胺(D-GalN)重慶醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程研究室,批號020327；硫代巴比妥酸(TBA),上?；瘜W(xué)試劑公司；谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)試劑盒，上海榮盛生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；3HTdR比放射性為37MBq/mL,中國原子能研究院同位素研究所產(chǎn)品；新生小牛血清(NBS),杭州四季清生物制品公司產(chǎn)品；RPMI-1640培養(yǎng)粉,美國Gibco公司產(chǎn)品；脂多糖(LPS)、Hepes、刀豆蛋白A(ConA)均為美國Sigma公司產(chǎn)

7、品。1.3儀器Napco-6100型CO2培養(yǎng)箱,美國杜邦公司產(chǎn)品；YJ-1450型醫(yī)用凈化工作臺,蘇凈集團安泰公司制造；LDR4-8.4低溫離心機,北京醫(yī)用離心機廠生產(chǎn)；XSZ-D倒置顯微鏡,重慶光學(xué)儀器廠產(chǎn)品；GL20A全自動高速冷凍離心機,湖南儀器儀表總廠離心機廠；LS-6500型液體閃爍計數(shù)儀,美國Beckman公司產(chǎn)品；內(nèi)切式組織勻漿機,浙江機械廠產(chǎn)品。2實驗方法2.1D氨基半乳糖胺誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型的建立及處理7昆明種小鼠60只,隨機平均分組：正常組、模型組、CAE3個劑量組(60,120,240mg

8、/kg)和護肝片組(800mg/kg)。灌胃給藥或溶媒,1次/d,共7d,腹腔注射D-GalN800mg/kg,給藥容積0.1mL/10g,正常對照組腹腔注射等量的生理鹽水。造模后24h眼眶采血、摘取肝臟,進行血清ALT、肝勻漿丙二醛(MDA)的測定。2.2卡介苗＋脂多糖誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷模型的建立及處理8昆明種小鼠60只,隨機平均分組(同上