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《黃芪多部位組合對化學(xué)性及免疫性肝損傷小鼠的保護(hù)作》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、黃芪多部位組合對化學(xué)性及免疫性肝損傷小鼠的保護(hù)作【摘要】:目的研究黃芪多部位組合對化學(xué)性及免疫性肝損傷小鼠的保護(hù)作用。方法采用D-氨基半乳糖胺(D-GalN)、卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)分別誘導(dǎo)小鼠化學(xué)性和免疫性肝損傷模型。L929細(xì)胞殺傷法檢測腫瘤壞死因子(TNF-α)活性;TBA比色法測肝勻漿丙二醛(MDA)含量;[3H]TdR摻入法測脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)及白細(xì)胞介素1(IL-1)的活性;賴氏法檢測血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的水平。結(jié)果黃芪多部位組合(60、120、240mg/kg)明顯降低D-GalN小鼠升高的肝臟指數(shù)、血清ALT水平及肝勻漿MDA的
2、含量;恢復(fù)刀豆蛋白A(ConA)誘導(dǎo)的免疫性肝損傷小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng),抑制其腹腔巨噬細(xì)胞TNF-α、IL-1的產(chǎn)生;同時(shí)還能降低其血清ALT和AST水平。結(jié)論黃芪多部位組合對化學(xué)性及免疫性肝損傷小鼠均有明顯的保護(hù)作用?!娟P(guān)鍵詞】黃芪 肝損傷 小鼠 Abstract:ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectsofpoundAstragalusExtract(CAE)onliverinjuryinmice.MethodsTheacuteliverinjurymodelsine(D-GalN,800mg/kg,ip)andBacillusCa
3、lmetteGuerin(BCG,1×107/0.2mL,iv)plusLipopolysaccharide(LPS7.5μg/0.2mL,iv)inmice.ALT,AST,MDAcontentinliverhomogenateetry.IL-1activityandConA-inducedsplenocytesproliferationinedbyassayofcytotoxicityagainstL929cell.ResultsCAE(60,120,240mg/kg)couldobviouslyloandMDAcontentinliverhomogenateinD-GalNmi
4、ceandintheimmunologicalliverinjurymice.ItalsodecreasedALT,ASTlevelinserum,recoveredConA-inducedsplenocytesproliferation.IthadinhibitoryeffectoninflammatoryfactorsTNF,IL-1secretedbyPMφs.ConclusionCAEshoicalandimmunologicalliverinjuryinmice. Keyice 黃芪始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,具有補(bǔ)氣升陽、固表止汗等功效[1]?,F(xiàn)代臨床研究認(rèn)為,黃芪粗制劑對慢性
5、肝炎均有較好的療效,使大鼠肝纖維化程度明顯減輕[2]。我們多年的研究還發(fā)現(xiàn),黃芪總苷有抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡以及抗肝纖維化等作用[3-6]。由此,根據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)并結(jié)合中醫(yī)理論,提取與分離了黃芪有效部位群(黃芪多糖、皂苷、酮及酚),再依據(jù)體外正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果首次組成黃芪多部位組合(poundastragalusextract,CAE)。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步對其抗小鼠肝損傷進(jìn)行研究?! ?實(shí)驗(yàn)材料 1.1動物與細(xì)胞株 昆明種小鼠,雄性,6~8周,體重(18±2)g;C57BL/6J小鼠,雄性,6~8周,體重(20±2)g;均購于安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心(合格證號:皖醫(yī)實(shí)動準(zhǔn)字01
6、號)。小鼠成纖維細(xì)胞瘤(L929)細(xì)胞株:南京軍事醫(yī)學(xué)研究所朱敏生教授惠贈?! ?.2藥物與試劑 CAE,合肥恒星醫(yī)藥研究所提供,批號20030508;研缽碾為細(xì)粉,0.5%羧甲基纖維素鈉溶液(CMC-Na)混懸。護(hù)肝片,黑龍江五??ㄋ帢I(yè)有限公司產(chǎn)品,批號20041016;卡介苗(BCG),上海生物制品有限公司產(chǎn)品,用前以滅菌生理鹽水配成所需濃度;D-氨基半乳糖胺(D-GalN)重慶醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程研究室,批號020327;硫代巴比妥酸(TBA),上?;瘜W(xué)試劑公司;谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)試劑盒,上海榮盛生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品;[3H]TdR比放射性為37MB
7、q/mL,中國原子能研究院同位素研究所產(chǎn)品;新生小牛血清(NBS),杭州四季清生物制品公司產(chǎn)品;RPMI-1640培養(yǎng)粉,美國Gibco公司產(chǎn)品;脂多糖(LPS)、Hepes、刀豆蛋白A(ConA)均為美國Sigma公司產(chǎn)品。 1.3儀器 Napco-6100型CO2培養(yǎng)箱,美國杜邦公司產(chǎn)品;YJ-1450型醫(yī)用凈化工作臺,蘇凈集團(tuán)安泰公司制造;LDR4-8.4低溫離心機(jī),北京醫(yī)用離心機(jī)廠生產(chǎn);XSZ-D倒置顯微鏡,重慶光學(xué)儀器廠產(chǎn)品;GL20A全自動