載脂蛋白e基因多態(tài)性與輕度認知障礙的關(guān)系論文

《載脂蛋白e基因多態(tài)性與輕度認知障礙的關(guān)系論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、載脂蛋白E基因多態(tài)性與輕度認知障礙的關(guān)系論文.freelildcognitiveimpairment(MCI).MethodsRFLP-PCRtechnologyisappliedtoanalysetheapoEallelefrequencyof56MCIpatientsand89controls.ResultsAmongthe56casesofMCI，thefrequencyofapoEε2，ε3，ε4are7.14%，71.38%.freelentsuggestthatthereissignificantd

2、ifference（P0.01）.ConclusionTheapoEε4alleleisageicriskfactorofMCI.【Keyildcognitiveimpairment;polymorphism;apolipoproteinE;genotypes輕度認知障礙（mildcognitiveimpairment，MCI）特指有輕度記憶或認知損害、但無癡呆的老年人，其病因不能由已知的醫(yī)學(xué)或神經(jīng)精神病狀況解釋。目前普遍認為MCI是介于年齡相關(guān)性記憶損害（age-associatedmemoryimpairm

3、ent，AAMI）和老年性癡呆（Alzheimersdisease，AD）之間的一種綜合征。許多資料表明：MCI患者進展為AD（主要指散發(fā)性AD）的年轉(zhuǎn)化率是同齡認知功能正常老年人的10倍，識別MCI患者將有助于早期干預(yù)和治療，所以MCI相關(guān)研究成為近年來國內(nèi)外的熱門話題。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)多個基因，如淀粉樣蛋白前體（APP）基因、早老素-1（PS-1）基因、早老素-2（PS-2）基因、載脂蛋白E（apoE）等位基因和低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白基因等遺傳因子在調(diào)控AD病理和生化異常代謝中起著重要作用。其

4、中，位于19號染色體的apoE基因是資料與目前唯一廣泛得以認同的與散發(fā)性AD和遲發(fā)性家族性AD相關(guān)的基因。本研究旨在探討apoE基因多態(tài)性與MCI之間的關(guān)系，為MCI易進展為AD尋找遺傳學(xué)依據(jù)。1資料與方法1.1一般資料研究對象源自武漢市中心醫(yī)院2002年7月~2003年6月神經(jīng)內(nèi)科和干部四科門診和病房，所有對象的文化程度均在中學(xué)及以上，分為MCI組和對照組。MCI組56例，男23例，女33例；年齡61～89歲，平均（70.12±7.24）歲。依據(jù)1997年P(guān)eterson等確立的診斷依據(jù)確定MCI組入選標(biāo)準(zhǔn)如

5、下：（1）有記憶力減退的主訴；（2）檢查時證明有輕度記憶損害；（3）沒有或很少有其他認知損害；（4）日常生活活動正常（BI指數(shù)≥95分）；（5）滿足CDR=0.5的標(biāo)準(zhǔn)；（6）MMSE評分≥24分，但≤27分；（7）不夠NINDS-ADRDA或DSMⅢ-R對癡呆的標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）昏迷；（2）失語和（或）精神異常（如抑郁、譫妄）而不能配合量表檢查者。對照組89例，男46例，女43例；年齡60～88歲，平均（69.47±8.02）歲。均符合下述入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）無記憶力減退的主訴；（2）檢查時排除認知缺損、CD

6、R=0；（3）日常生活活動正常；（4）MMSE評分＞27分；（5）年齡、性別、受教育程度、既往高血壓、糖尿病、心臟病及卒中史均與MCI組匹配。對照組和MCI組在年齡上差異無顯著性（P0.05）。1.2研究方法1.2.1基因?qū)W檢查用PCR-RFLP方法測定apoE基因型。實驗步驟如下：（1）空腹12h后，取肘靜脈血5ml，EDTANa2抗凝，用酚：氯仿抽提白細胞中的DNA，使純度達到A280/A2601.8；（2）PCR擴增目的基因片段：參照文獻［1］，引物設(shè)計如下：上游引物為5’-TAAGCTTGGCACGGC

7、TGTCCAAGGA-3’和5’-ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC-3’。擴增體系為50μl。PCR的條件為95℃變性5min，之后35次循環(huán)（94℃變性1min，62℃退火1min，72℃延伸1min），72℃繼續(xù)延伸10min后降至4℃，用1.6%瓊脂糖凝膠電泳待測擴增產(chǎn)物；（3）限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）分析：取10μlPCR產(chǎn)物，加10uHhaI內(nèi)切酶消化，37℃酶切4h，非變性聚丙烯酰胺濃度為0.1g/L，交聯(lián)度為49∶1，取5μl酶切產(chǎn)物，加等體積的甲酰胺變性液，在電壓10

8、0～200V，溫度20℃條件下，電泳5h左右；（4）銀染：電泳結(jié)束后，用乙酸固定，純水洗，銀染液染色（1.4g/L，AgNO3和甲醛），純水洗，加顯色液（30g/L，Na2CO3，甲醇400μg/L，Na2S2O3）顯色，乙酸終止反應(yīng)，根據(jù)電泳帶型確定apoE基因型。拍片。1.2.2統(tǒng)計學(xué)分析使用SPSS10.0處理數(shù)據(jù)，計算各等位基因和基因型頻率的分布，基因頻率采用Hardy-CI組