1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因cdna全長克隆和序列分析

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1、1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因cDNA全長克隆和序列分析植物病理ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA36(6):517—522(2006)爪哇根結(jié)線蟲p一1,4一內(nèi)切葡聚糖酶基因cDNA全長克隆和序列分析張志榮,廖金鈴,鄭靜君,崔汝強(qiáng),卓侃,李迅東,陳海燕,王鮮(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物線蟲研究室,廣州510642;湖南省出入境檢驗(yàn)檢疫局,長沙410007)摘要:以爪哇根結(jié)線蟲為材料,根據(jù)同源序列法分別進(jìn)行3末端和5末端的RACE,獲得B—l,4一內(nèi)切葡聚糖酶基因cDNA全長.此cDNA全長序列為l675b

2、p,包括l521bp的完整ORF,編碼一含506aa的多肽.該基因命名為Mj?eng-3,其推導(dǎo)蛋白的編碼氨基酸與南方根結(jié)線蟲的B—l,4一內(nèi)切葡聚糖酶基因MI—ENG—l,MI—ENG一3和MI—ENG4的同源性為95.3%,95.8%和85.3%,與另外5個(gè)植物寄生線蟲B—l,4一內(nèi)切葡聚糖酶基因推導(dǎo)蛋白PP—ENG—l,GR—ENG—l,GT—ENG—l,HG—ENG-l,HS—ENG—l編碼氨基酸的同源性分別為51.2%,43.7%,43.7%,46.8%和45.3%.關(guān)鍵詞:爪哇根結(jié)線蟲;B—l,4

3、一內(nèi)切葡聚糖酶;RT—PCR;RACECloningandsequenceanalysisoffull—lengthcDNAof3-1,4一endOgIucanasegenesofMeloidogyneiavanicaZHANGZhi.rong一,LIAOJin.1ing,CUIRu.qiang,ZHUOKan,LIXun-dong,ZHENGJing-jun,CHENHai-yan,WANGXian(TheLaboratoryofPlantNematode,SouthChinaAgriculturalUni

4、versity,Guangzhou510642,China;HunanEntry—ExitInspection&QuarantineBureau,Changsha410007,China)Abstract:Thefull-lengthcDNAsequenceofB-1,4-endoglucanasegeneMj—eng-3wasobtainedbyRT—PCRandRACEfromMeloidogynejavanica.Itconsistedof1675nucleotides,andencoded50

5、6aminoacids.TheaminoacidsequenceofMJ-ENG-3was95.3%,95.8%and85.3%identicalwithMI-ENG-1,MI-ENG-3andMI-ENG-4fromincognitarespectively,whileitwas51.2%,43.7%,43.7%,46.8%and45.3%identicalwithPP-ENG-1,GR-ENG一1,GT-ENG-1,HG-ENG-1,HS-ENG-1fromotherplantnematodes,resp

6、ectively.Keywords:Meloidogynejavanica;B-1,4-endoglucanase;RT—PCR;rapidamplificationofcDNAends(RACE)中圖分類號(hào):$432.45文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):04]2-09]4(2006)06-05]7-06爪哇根結(jié)線蟲(Meloidogynejavanica)是最重要的植物寄生線蟲之一,可以寄生2000多種植物,在我國特別是南方地區(qū)分布廣泛,并引起作物嚴(yán)重的產(chǎn)量損失.B—l,4-內(nèi)切葡聚糖酶是一類由真菌,細(xì)菌,昆蟲,動(dòng)

7、物,植物等組織產(chǎn)生的纖維素水解酶J,推測其功能是病原物通過其對(duì)復(fù)雜碳水化合物的水解作用而進(jìn)入植物組織和利用多糖產(chǎn)物.Smant等克隆了馬鈴薯金線蟲(Glo.boderarostochiensis)和大豆胞囊線蟲(Heteroderaglycines)侵染性二齡幼蟲的B-l,4.內(nèi)切葡聚糖酶基因的cDNA,并且證明了纖維素酶的產(chǎn)生及其通過口針分泌的特性.此外,已從南方根結(jié)線蟲(incognita),甜菜胞囊線蟲(14.schachtii),煙草胞囊線蟲(G.tabacum)和穿刺短體線蟲(Pratylenchu

8、s收稿日期:2006-02-25;修回日期:2006-07-03基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30471142);教育部博士點(diǎn)基金(20050564009);廣東省教育廳研究項(xiàng)目(z03003)通訊作者:廖金鈴,教授,主要從事植物線蟲學(xué)研究;E-mail:jlliao@scau.edu.en第一作者:張志榮(1978一),男湖南省郴州人,碩士,現(xiàn)在湖南省出入境檢驗(yàn)檢疫局丁作.518植物病理36

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