體外分析的數(shù)據(jù)處理-檢驗(yàn)核醫(yī)學(xué)

體外分析的數(shù)據(jù)處理-檢驗(yàn)核醫(yī)學(xué)

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1、體外分析的數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理基本步驟數(shù)據(jù)處理是將實(shí)驗(yàn)測(cè)得的未知樣品的直接結(jié)果換算成劑量,每次實(shí)驗(yàn)均需繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(劑量反應(yīng)曲線),從中查出待測(cè)樣品劑量。1、繪圖法(有人為誤差)2、數(shù)學(xué)模型擬合法第一節(jié)RIA、IRMA劑量反應(yīng)曲線的建立一、RIA劑量反應(yīng)曲線二、IRMA劑量反應(yīng)曲線一、RIA劑量反應(yīng)曲線反應(yīng)動(dòng)力學(xué)模式:*Ag+Ag+Ab(*Ag-Ab)+(Ag-Ab)其中:Ab——限量(*Ag+Ag)抗原決定簇>Ab結(jié)合位點(diǎn)對(duì)于Ab,*Ag和Ag不可辨別,與Ab結(jié)合機(jī)率一致如果:固定*Ag量,Ag↑則(*Ag-Ab)↓,Ag↓則(*Ag-Ab)↑;Ag濃度與(*A

2、g-Ab)放射性計(jì)數(shù)呈反向關(guān)系RIA劑量反應(yīng)曲線RIA-Kit有一組具有梯度,已知為標(biāo)準(zhǔn)濃度的Ag——標(biāo)準(zhǔn)品,以此為橫坐標(biāo),以與之相對(duì)應(yīng)的(*Ag-Ab)放射性計(jì)數(shù)為縱坐標(biāo),可建立反映Ag濃度與(*Ag-Ab)計(jì)數(shù)的反向變化規(guī)律曲線——RIA劑量反應(yīng)曲線。待測(cè)物的Ag濃度可根據(jù)其對(duì)應(yīng)的(*Ag-Ab)計(jì)數(shù),在曲線中查得。常用專業(yè)名詞T(Total)管計(jì)數(shù):每一試管投入的*Ag的放射性計(jì)數(shù)。B(Bound)管計(jì)數(shù):(*Ag-Ab)的計(jì)數(shù)也稱結(jié)合計(jì)數(shù)Bo管計(jì)數(shù):當(dāng)Ag=0濃度時(shí)的(*Ag-Ab)計(jì)數(shù),為最大結(jié)合計(jì)數(shù)F(Free)計(jì)數(shù):游離的*Ag的放射性計(jì)數(shù),F(xiàn)=

3、T-BRIA劑量反應(yīng)曲線反應(yīng)坐標(biāo)(縱坐標(biāo))表達(dá)方式B------(*Ag-Ab)計(jì)數(shù)F/B或B/F結(jié)合計(jì)數(shù)與游離計(jì)數(shù)之比BT=(*Ag-Ab)計(jì)數(shù)每管總計(jì)數(shù)<1BB0=(*Ag-Ab)計(jì)數(shù)“0”管(*Ag-Ab)計(jì)數(shù)≤1二、IRMA劑量反應(yīng)曲線反應(yīng)動(dòng)力學(xué)基本模式●-Ab(m)+Ag[●-Ab(m)·Ag]+*Ab(過(guò)量)∥[●-Ab(m)·Ag·*Ab]+*Ab(余)試中:Ag——標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品如果Ag↑[●-Ab(m)·Ag·*Ab]↑,兩者呈正向關(guān)系IRMA劑量反應(yīng)曲線以Ag濃度為橫坐標(biāo),其對(duì)應(yīng)的[●-Ab(m)·Ag·*Ab]計(jì)數(shù)為縱坐標(biāo)(反應(yīng)坐標(biāo)),

4、可建立兩者的正向變化規(guī)律曲線——IRMA劑量反應(yīng)曲線。待測(cè)物Ag的濃度,可根據(jù)其對(duì)應(yīng)的[●-Ab(m)·Ag+*Ab]計(jì)數(shù)在曲線中查得。B(Bound)計(jì)數(shù):[●-Ab(m)·Ag·*Ab]放射性計(jì)數(shù)Bmax計(jì)數(shù):當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品Ag的濃度為最大的點(diǎn),對(duì)應(yīng)的[●-Ab(m)·Ag·*Ab]計(jì)數(shù)IRMA劑量反應(yīng)曲線縱坐標(biāo)(反應(yīng)坐標(biāo))表達(dá)方式B------[●-Ab(m)·Ag·*Ab]放射性計(jì)數(shù)F/B或B/F(結(jié)合計(jì)數(shù)與游離計(jì)數(shù)之比)BBmax=[●-Ab(m)·Ag·*Ab]放射性計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)品max[●-Ab(m).Ag.*Ab]計(jì)數(shù)≤1第二節(jié)RIA、IRMA劑量反應(yīng)

5、曲線處理的常用模式函數(shù)表達(dá)式y(tǒng)=f(x)模擬曲線規(guī)律常用方法有:1、線性內(nèi)插2、坐標(biāo)變換法(直線化法)3、多項(xiàng)式擬合4、樣條函數(shù)擬合5、四、五參數(shù)logistic模型6、單位點(diǎn)質(zhì)量作用定律模型最小二乘法一、線性內(nèi)插式中:Xa—未知樣品上一點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品濃度(已知)Xb—未知樣品下一點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品濃度(已知)ya—標(biāo)準(zhǔn)品Xa對(duì)應(yīng)的反應(yīng)參數(shù)(B計(jì)數(shù)或結(jié)合率—測(cè)量數(shù))yb—標(biāo)準(zhǔn)品Xb對(duì)應(yīng)的反應(yīng)參數(shù)(B計(jì)數(shù)或結(jié)合率—測(cè)量數(shù))y—未知樣品對(duì)應(yīng)的反應(yīng)參數(shù)(B計(jì)數(shù)或結(jié)合率—測(cè)量數(shù))ya-yya-yb=X-XaXb-xa(對(duì)應(yīng)邊成比例)優(yōu)點(diǎn):計(jì)算簡(jiǎn)便缺點(diǎn):誤差不均勻,尤其在直線的兩側(cè)誤差

6、不對(duì)稱,誤差較大。二、坐標(biāo)變換法(直線化法)常用log—logit方式縱坐標(biāo)變換y'=Lny/(1-y)(y為結(jié)合率B/B0)橫坐標(biāo)變換X'=LnX(X—標(biāo)準(zhǔn)品Ag濃度)數(shù)學(xué)模型:Lny/(1-y)=a+bLnXy與Lny/(1-y)的比較y=0.5Lny/(1-y)=0yLny/(1-y)yLny/(1-y)0.92.1970.1-2.1970.81.3860.2-1.3860.70.8470.3-0.8470.60.4050.4-0.405優(yōu)點(diǎn):可使誤差的不均勻性通過(guò)加權(quán)補(bǔ)償,且可將壞點(diǎn)去除。缺點(diǎn):零劑量點(diǎn)丟失,靈敏度降低。不適用于順序加樣法。如有壞點(diǎn),整

7、條曲線會(huì)偏離。三、多項(xiàng)式擬合y=a0+a1x+a2x2+a3x3+……+anxRIA和IRMA常用:y=a0+a1x+a2x2+a3x3y—結(jié)合計(jì)數(shù)或結(jié)合率或y=a0+a1x1/2+a2x+a3x3/2x—標(biāo)準(zhǔn)品Ag濃度優(yōu)點(diǎn):無(wú)論曲線好壞均可擬合。缺點(diǎn):僅能在某一區(qū)域模擬劑量反應(yīng)曲線,普遍適用性差。曲線容易出現(xiàn)震蕩,尤其是高劑量端,造成測(cè)量值偏小。四、樣條函數(shù)擬合實(shí)為曲線內(nèi)插,分段用三項(xiàng)函數(shù)擬合,然后進(jìn)行平滑修正。模式:y=ai+bi(x-xi)+ci(x-xi)2+di(x-xi)3y—反應(yīng)參數(shù)(計(jì)數(shù)或結(jié)合率)x—標(biāo)準(zhǔn)品Ag濃度五、四、五參數(shù)logistic

8、模型由log-logit轉(zhuǎn)化而來(lái)g為不

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