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《嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞瑞氏染色后,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)不一的藍(lán)色顆粒(RNA),屬于未完全成熟紅細(xì)胞,顆粒大小不一、多少不等,原因?yàn)橹亟饘贀p傷細(xì)胞膜,使嗜堿性物質(zhì)凝集,或嗜堿性物質(zhì)變性,或血紅蛋白合成中阻斷原卟啉與鐵結(jié)合。見于鉛中毒。正常人血涂片中很少見到嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞(約占1/10000)。其他各類貧血見到點(diǎn)彩紅細(xì)胞表明骨髓造血旺盛或有紊亂現(xiàn)象。脫落細(xì)胞學(xué)檢測(cè)染色是利用細(xì)胞中各種結(jié)構(gòu)的生化組成不同,對(duì)染料的親和力不同,而顯示不同的顏色,使細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)易于辨認(rèn)。常用的染色有HE、巴氏及瑞~姬氏染色,其特點(diǎn)如下。1.HE染色:此法染色效果
2、也好,只是胞質(zhì)色彩不豐富,不能用于觀察陰道涂片對(duì)雌激素水平測(cè)定。優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)易,試劑易配制。2.巴氏染色:此法染色特點(diǎn)是細(xì)胞具有多色性,色彩豐富鮮艷,胞內(nèi)結(jié)構(gòu)清晰,染色效果好,是細(xì)胞病理學(xué)檢查常用的方法,尤其是觀察女性雌激素水平對(duì)陰道上皮細(xì)胞的影響。此法的缺點(diǎn)是操作程序復(fù)雜。3.瑞一姬氏染色:此法適用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片。血氨測(cè)定血氨測(cè)定:有兩類血氨測(cè)定方法。一類為兩步法,先從全血中分離出氨,再進(jìn)行測(cè)定,如擴(kuò)散法(已淘汰)和離子交換樹脂法;另一類為一步法,不需從全血中分離出氨直接測(cè)定,如酶法和離子選擇電極法。(1)直接顯
3、色測(cè)定法:在床旁取靜脈血2ml,以鎢酸沉淀蛋白后,用酚-——次氯酸鹽顯色,參照標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算氨含量。如嚴(yán)格掌握實(shí)驗(yàn)條件,本法分析結(jié)果能滿足臨床要求。(2)谷氨酸脫氫酶速率法:血漿中的氨在足量的α-酮戊二酸和NADPH存在時(shí),經(jīng)谷氨酸脫氫酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH,NADPH的下降速率與血漿氨濃度成正比。(3)離子交換法:去蛋白血漿標(biāo)本中的氨先被陽(yáng)離子交換樹脂吸附,再被分離出來(lái),用酚——次氯酸鹽顯色反應(yīng)求出氨含量。本法特異性好,精密度和準(zhǔn)確度均較高,已被作為血氨測(cè)定的參考方法。(4)氨電極法:氨氣敏電極選擇性較高,故這類方法特異性
4、好、準(zhǔn)確度較高,但是耐用性差,而且電極穩(wěn)定性受溫度、滲透壓、中介液等多種因素影響。結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)特點(diǎn)培養(yǎng)特點(diǎn)為專性需氧、營(yíng)養(yǎng)要求高、生長(zhǎng)緩慢,常用羅氏固體培養(yǎng)基,在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)2~4周后,形成菜花樣R型菌落,液體培養(yǎng)基上呈表面生長(zhǎng),形成菌膜??偟鞍锥繙y(cè)定1、原理磺基水楊酸為生物堿試劑,能沉淀蛋白質(zhì),但對(duì)白蛋白的沉淀能力比球蛋白強(qiáng),加適量硫酸鈉后,沉淀白、球蛋白的能力趨于一致,與標(biāo)準(zhǔn)蛋白濁度對(duì)比進(jìn)行定量測(cè)定。2、試劑磺基水楊酸~硫酸鈉試劑(SS~S)磺基水楊酸3.0g無(wú)水硫酸鈉7.0g蒸餾水加至100ml過(guò)濾后,儲(chǔ)存于棕色瓶
5、中,如顯色或混濁則不能用。3、方法(1)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線含蛋白200、400、800、1200、1600mg/L的稀釋混合人血清標(biāo)準(zhǔn)系列各0.5ml,加SS~S試劑4.5ml,充分混勻,7~15分鐘后,用420nm波長(zhǎng)比濁,以吸光度為縱坐標(biāo),蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2)樣品檢測(cè)取待測(cè)腦脊液標(biāo)本各0.5ml于兩只試管中,其中一只試管加SS~S試劑4.5ml,另一試管加154mmol/L的NaCl溶液4.5ml作為標(biāo)本空白管。在與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的條件下比濁,所得得吸光度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得蛋白質(zhì)濃度。4、注意事項(xiàng)(1)腦脊液如有多
6、量細(xì)胞或混濁,應(yīng)先離心以除去。如蛋白質(zhì)濃度過(guò)高,應(yīng)先行用生理鹽水稀釋后重新測(cè)定。(2)加入SS~S試劑的操作手法和速度、室溫及比濁前的放置時(shí)間都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。故操作時(shí)應(yīng)注意控制加入試劑的方式和比濁時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)管一致。應(yīng)隨氣溫改變,勤作標(biāo)準(zhǔn)曲線。5、正常參考值腰穿CSF蛋白含量:0.2~0.4g/L池穿CSF蛋白含量:0.1~0.25g/L側(cè)腦室穿刺CSF蛋白含量:0.05~0.15g/L腦脊液蛋白質(zhì)含量與年齡成正比,兒童含量較低,成人稍高,老年人又比成年人高。6、臨床意義腦脊液蛋白質(zhì)含量增高,為血腦屏障被破壞的標(biāo)志。頗受臨床工作者
7、的重視。蛋白質(zhì)含量增高常見于下列情況:(1)中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥。腦部感染時(shí),腦膜和脈絡(luò)叢毛細(xì)血管通透性增加,蛋白質(zhì)分子容易透過(guò),首先是白蛋白增高,隨后是球蛋白和纖維蛋白增高。(2)神經(jīng)根病變。如急性感染性多發(fā)性神經(jīng)炎(Guillain~Barre綜合征),多數(shù)病例有蛋白質(zhì)增高,而細(xì)胞數(shù)正常或接近正常,即蛋白~細(xì)胞分離現(xiàn)象。(3)椎管內(nèi)梗阻。腦與蛛網(wǎng)膜下腔互不相通,血漿蛋白由脊髓中的靜脈滲出,CSF蛋白質(zhì)含量顯著增高,有時(shí)高達(dá)30~50g/L,這時(shí)CSF變黃,可自行凝固。如脊髓腫瘤、轉(zhuǎn)移癌、粘連性蛛網(wǎng)膜炎等。此外,早產(chǎn)兒CSF蛋白含量
8、可達(dá)2g/L,新生兒為0.8~1.0g/L,出生兩個(gè)月后逐漸降至正常水平。含血的CSF蛋白質(zhì)含量增高。為了鑒別原來(lái)有無(wú)蛋白質(zhì)增高,可用每升紅細(xì)胞700×106個(gè)約相當(dāng)增加蛋白質(zhì)量0.01g/L來(lái)推算,用含血CSF的蛋白質(zhì)含量減去含紅細(xì)胞數(shù)折算成的蛋